DMEM, w: 4.5 g/L גלוקוז, w: 4 mM L-גלוטמין, w: 3.7 g/L NaHCO3, w: 1.0 mM נתרן פירובט
DMEM (Dulbecco's Modified Eagle Medium) הוא מצע בסיסי רב-תכליתי ונפוץ, שנועד לתמוך בצמיחת מגוון רחב של תאים יונקיים במחקר ביולוגי. הוא משמש מצע אידיאלי לגידול פיברובלסטים ראשוניים, נוירונים, תאי גליה, HUVECs, תאי שריר חלק, וכן קווי תאים פופולריים כמו HeLa, 293, Cos-7 ו-PC-12.
מה שמבדיל את DMEM ממדיומים אחרים הוא ההרכב הייחודי שלו. הוא מכיל ריכוז חומצות אמינו וויטמינים גבוה פי ארבעה בהשוואה למדיום המינימלי החיוני המקורי של Eagle. DMEM, שפותח בתחילה עם רמות נמוכות של גלוקוז (1 גרם/ליטר) ופירובט נתרן, משמש לעתים קרובות עם רמות גלוקוז גבוהות יותר, עם או בלי פירובט נתרן. יש לציין כי DMEM אינו מכיל חלבונים, שומנים או גורמי גדילה, ולכן יש צורך בתוספים. כדי להשיג צמיחה מיטבית, גישה נפוצה היא להוסיף ל-DMEM 10% סרום עגלי (FBS). בנוסף, DMEM משתמש במערכת חיץ של סודיום ביקרבונט, הדורשת סביבה של 5-10% CO2 כדי לשמור על pH פיזיולוגי.
Dulbecco's Modified Eagle Medium (DMEM) זוכה להערכה רבה בקרב המדיומים המוגדרים לגידול תאים ורקמות, ומספק את צרכי הגידול של פנוטיפים שונים של תאים נצמדים. הוא עולה על Eagle's Medium המקורי, שפותח בשנות ה-50 לגידול תאי עוף, בזכות הנוסחה המשופרת הידועה כשינוי של Dulbecco. שינוי זה מעלה באופן משמעותי את תכולת חומצות אמינו וויטמינים נבחרים עד פי ארבעה בהשוואה למדיום המקורי.
בתחום תרביות התאים, DMEM ממלא תפקיד חיוני כמדיום גידול עבור סוגים שונים של תאים, כולל תאים ראשוניים, תאי גזע ותאים שעברו שינוי. חוקרים גם משתמשים בגרסה המשופרת של DMEM למגוון רחב של יישומים מחקריים, כגון גילוי תרופות, הנדסת רקמות ומחקר של מסלולי איתות תאיים.
בקרת איכות
- מסונן סטרילי
אחסון ותוקף
- יש לאחסן בטמפרטורה של +2°C עד +8°C, הרחק מאור.
- לאחר הפתיחה, יש לאחסן בטמפרטורה של 4°C ולהשתמש תוך 6–8 שבועות.
תנאי משלוח
- טמפרטורת הסביבה
תחזוקה
- יש לאחסן בקירור בטמפרטורה של +2°C עד +8°C במקום חשוך. יש להימנע מהקפאה ומחימום תכוף ל-+37°C, מכיוון שהדבר פוגע באיכות המוצר.
- אין לחמם את התמיסה מעבר ל-37°C או להשתמש במקורות חום בלתי מבוקרים כגון מכשירי מיקרוגל.
- אם יש להשתמש רק בחלק מהמדיום, יש להוציא את הכמות הנדרשת ולחמם אותה לטמפרטורת החדר לפני השימוש.
הרכב
| קטגוריה | מרכיבים | ריכוז (מ"ג/ל') |
| חומצות אמינו | גליצין | 30.0 |
| L-ארגינין HCl | 84.0 | |
| L-ציסטין 2 HCl | 62.5 | |
| L-גלוטמין | 584.0 | |
| L-היסטידין HClH2O | 42.0 | |
| L-איזולאוצין | 105.0 | |
| L-לאוצין | 105.0 | |
| L-ליזין HCl | 146.0 | |
| L-מתיונין | 30.0 | |
| L-פנילאלנין | 66.0 | |
| L-סרין | 42.0 | |
| L-תראונין | 95.0 | |
| L-טריפטופן | 16.0 | |
| L-טירוזין 2 Na2H2O | 103.79 | |
| L-ואלין | 94.0 | |
| ויטמינים | כלוריד כולין | 4.0 |
| D-פנטותנט סידן | 4.0 | |
| חומצה פולית | 4.0 | |
| מיו-אינוסיטול | 7.2 | |
| ניקוטיןאמיד | 4.0 | |
| פירידוקסל HCl | 4.0 | |
| ריבופלבין | 0.4 | |
| תיאמין HCl | 4.0 | |
| מלחים אנאורגניים | CaCl2 2H2O | 265.0 |
| Fe(NO3)3 9H2O | 0.10 | |
| KCl | 400.0 | |
| MgSO47H2O | 200.10 | |
| NaCl | 6400.0 | |
| NaHCO3 | 3700.0 | |
| NaH2PO42H2O | 141.73 | |
| רכיבים אחרים | D-גלוקוז | 4500.0 |
| מלח נתרן של פנול אדום | 15.90 | |
| פירובט נתרן | 110.0 |