Ham's F12K Medium, w: 2.0 mM L-Glutamine, w: 2.0 mM Sodium pyruvate, w: 2.5 g/L NaHCO3
הצגת Ham's F-12K (Kaighn's) Medium, שינוי מיוחד של Ham's F-12 medium שנועד לענות על הדרישות הייחודיות של מחקר ביולוגי. מדיום מתקדם זה מציע יתרונות בולטים, המשפרים את גידול תאי כבד אנושיים ראשוניים, כמו גם תאי כבד של חולדות ותרנגולות, במיוחד בתנאים של רמות נמוכות של סרום.
המדיום F-12K (Kaighn's) של Ham's פותח בקפידה כדי לייעל את תנאי תרבית התאים. הוא כולל הרכב מועשר, המספק רמות גבוהות של רכיבים חיוניים כגון חומצות אמינו ופירובט נתרן, וכן רכיבים נוספים כגון פוטרצין, תימידין, היפוקסנטין ואבץ. תוספות אלה מאפשרות לחוקרים להוסיף למדיום סרום מינימלי או רכיבים מוגדרים לסוגים ספציפיים של תאים, ובכך להקל על יצירת תנאי ניסוי מדויקים.
יש לציין כי תמיסת F-12K (Kaighn's) של Ham אינה מכילה חלבונים או גורמי גדילה. כתוצאה מכך, לעתים קרובות יש צורך בתוספת של גורמי גדילה ו-FBS (Fetal Bovine Serum), מה שמאפשר לחוקרים להתאים את התמיסה לדרישות של קווי התאים הספציפיים שלהם. לקבלת ביצועים מיטביים, יש לייעל בקפידה את ריכוז ה-FBS עבור כל קו תאים, כדי להבטיח גדילה ותפקוד מיטביים.
כדי לשמור על pH פיזיולוגי, התמיסה F-12K (Kaighn's) של Ham משתמשת במערכת חיץ של סודיום ביקרבונט (2.5 גרם/ליטר), הדורשת סביבה מבוקרת של 5-10% CO2 במהלך התרבית. כך מובטח שה-pH של התמיסה יישאר בטווח האידיאלי לצמיחת תאים וחיוניותם
בקרת איכות
- pH = 7.2 +/- 0.02 ב-20-25°C.
- כל אצווה נבדקה על מנת לוודא שהיא סטרילית ונטולת מיקופלסמה וחיידקים.
תחזוקה
- יש לשמור בקירור בטמפרטורה של +2°C עד +8°C במקום חשוך. הקפאה או חימום לטמפרטורה של +37°C פוגעים באיכות המוצר.
- אין לחמם את התמיסה ליותר מ-37°C או להשתמש במקורות חום בלתי נשלטים (למשל, מכשירי מיקרוגל).
- אם יש להשתמש רק בחלק מהמדיום, יש להוציא את הכמות הדרושה מהבקבוק ולחמם אותה בטמפרטורת החדר.
- אורך חיי המדף של כל המדיום, למעט המדיום הבסיסי, הוא 8 שבועות מיום הייצור.
הרכב
| מרכיבים | מ"ג/ל | |
| מלחים אנאורגניים | כלוריד סידן x 2H2O | 135,24 |
| סולפט נחושת (II) x 5H2O | 0 | |
| ברזל (II) סולפט x 7H2O | 0,83 | |
| כלוריד מגנזיום x 6H2O | 105,72 | |
| סולפט מגנזיום x 7H2O | 394,49 | |
| אשלגן כלורי | 283,29 | |
| אשלגן דיהידרוגן פוספט | 58 | |
| נתרן כלורי | 7597 | |
| די-נתרן מימן פוספט ללא מים |
115,02 | |
| סולפט אבץ x 7H2O | 0,14 | |
| מרכיבים נוספים | D(+)-גלוקוז נטול מים | 1260 |
| היפוקסנטין | 4,08 | |
| חומצה DL-α-ליפואית | 0,21 | |
| אדום פנול | 3 | |
| פוטריצין x 2HCl | 0,32 | |
| פירובט נתרן | 220 | |
| NaHCO3 | 2500 | |
| תימידין | 0,73 | |
| חומצות אמינו | L-אלנין | 17,82 |
| L-ארגינין x HCl | 421,40 | |
| L-אספרגין x H2O | 30 | |
| חומצה L-אספרטית | 26,62 | |
| L-ציסטאין x HCl x H2O | 70,2 | |
| L-גלוטמין | 292,20 | |
| חומצה L-גלוטמית | 29 | |
| גליצין | 15,01 | |
| L-היסטידין x HCl x H2O | 41,92 | |
| L-איזולאוצין | 7,87 | |
| L-לאוצין | 26,2 | |
| L-ליזין x HCl | 73,04 | |
| L-מתיונין | 8,95 | |
| L-פנילאלנין | 9,91 | |
| L-פרולין | 69,06 | |
| L-סרין | 21,02 | |
| L-תראונין | 23,82 | |
| L-טריפטופן | 4,08 | |
| L-טירוזין | 10,87 | |
| L-ואלין | 23,42 | |
| ויטמינים | D(+)-ביוטין | 0,07 |
| D-פנטותנט סידן | 0,48 | |
| כלוריד כולין | 13,96 | |
| חומצה פולית | 1,32 | |
| מיו-אינוסיטול | 18 | |
| ניקוטיןאמיד | 0,04 | |
| פירידוקסין x HCl | 0,06 | |
| ריבופלבין | 0,04 | |
| תיאמין x HCl | 0,34 | |
| ויטמין B12 | 1,36 |