McCoys 5A בינוני (משופר), w: 3.0 g/L גלוקוז, w: גלוטמין יציב, w: 2.0 mM נתרן פירובט, w: 2.2 g/L NaHCO3
מדיום 5A של McCoy הוא מדיום מומלץ במיוחד המיועד להקל על צמיחה ושכפול של נגיפים בתרבויות תאים ראשוניות. הוא זכה להכרה משמעותית בזכות ביצועיו יוצאי הדופן במגוון יישומים במחקר ביולוגי.
אחד היישומים הבולטים של McCoy's 5A Medium הוא השימוש בו בתרבית של קווי תאים של קרצינומה במעי הגס האנושי. באופן ספציפי, הוא שימש במחקר על קולטן G-protein-coupled receptor (LGR5) העשיר בלויסין ותפקידו בגרורות של סרטן המעי הגס. מדיום זה שימש ביעילות בגידול מספר קווי תאים של קרצינומה במעי הגס, כולל HCT116, RKO, FET, CBS, HCT116b ו-TENN, ואפשר לחוקרים להעמיק את המחקר על המנגנונים העומדים בבסיס גרורות סרטן המעי הגס.
בנוסף ליישום במחקר הסרטן, McCoy's 5A Medium הוכח כחיוני במחקר של אוסטאובלסטים. חוקרים הבוחנים את תגובתיות היונים של הידרוקסיאפטיט חסר סידן במדיום תרבית תאים סטנדרטי השתמשו במדיום זה לגידול אוסטאובלסטים. יישום זה סייע להבנה טובה יותר של האינטראקציות בין אוסטאובלסטים והידרוקסיאפטיט חסר סידן, ותרם להתקדמות בתחום מחקר העצמות.
תמיסת McCoy's 5A פותחה בקפדנות על ידי שינוי חומצות האמינו הנמצאות בתמיסת Basal Medium Eagle, כדי לספק תמיכה מיטבית לתאי גידול בכבד. תרכובת מועשרת זו מאפשרת את התאמתה למגוון רחב של קווי תאים מבוססים, כמו גם לתאים ראשוניים, מה שמגביר עוד יותר את הרבגוניות והיישומים שלה במגוון סביבות מחקר.
McCoy's 5A Medium מרחיב את השפעותיו הביוכימיות והפיזיולוגיות מעבר לתאי גידול בכבד. הוא שימש בהצלחה לתמיכה בצמיחה בתרבויות ראשוניות של מח עצם, עור, חניכיים, כליה, אומנטום, יותרת הכליה, ריאה, טחול, עובר חולדה וסוגים אחרים של תאים. מגוון רחב זה של יישומים מעיד על השימושיות הרחבה של McCoy's 5A Medium בתמיכה בצמיחה ובתחזוקה של סוגים שונים של תאים למחקר ביולוגי מקיף.
הרכב
מדיום McCoy's 5A (משופר) זה מכיל 3.0 גרם/ליטר גלוקוז, גלוטמין יציב, 2.0 מ"מ נתרן פירובט ו-2.2 גרם/ליטר NaHCO3.
בקרת איכות
- pH = 7.2 +/- 0.02 בטמפרטורה של 20-25°C.
- כל אצווה נבדקה על מנת לוודא שהיא סטרילית ונטולת מיקופלסמה וחיידקים.
תחזוקה
- יש לשמור בקירור בטמפרטורה של +2°C עד +8°C במקום חשוך. הקפאה וחימום עד +37°C פוגעים באיכות המוצר.
- אין לחמם את התמיסה ליותר מ-37°C או להשתמש במקורות חום בלתי נשלטים (למשל, מכשירי מיקרוגל).
- אם יש להשתמש רק בחלק מהמדיום, יש להוציא את הכמות הדרושה מהבקבוק ולחמם אותה בטמפרטורת החדר.
- אורך חיי המדף של כל המדיום, למעט המדיום הבסיסי, הוא 6 עד 8 שבועות מיום הפתיחה.
הרכב
| מרכיבים | מ"ג/ל | |
| מלחים אנאורגניים | כלוריד סידן x 2H2O | 132.00 |
| סולפט מגנזיום | 97.67 | |
| אשלגן כלורי | 400 | |
| נתרן כלורי | 6,460 | |
| דיסודיום הידרוגן פוספט (ללא מים) | 504 | |
| מרכיבים אחרים | D(+)-גלוקוז (ללא מים) | 3,000 |
| גלוטתיון (מופחת) | 0 | |
| פפטון בשר | 600 | |
| מלח נתרן פנול אדום | 11 | |
| חומצות אמינו | L-אלנין | 13 |
| L-ארגינין x HCl | 42.14 | |
| L-אספרגין x H2O | 45.03 | |
| חומצה L-אספרטית | 19.9 | |
| L-ציסטאין x HCl x H2O | 31.75 | |
| L-גלוטמין (יציב) | 219.15 | |
| חומצה L-גלוטמית | 22 | |
| גליצין | 7 | |
| L-היסטידין x HCl x H2O | 20.9 | |
| L-הידרוקסיפרולין | 19.6 | |
| L-איזולאוצין | 39.3 | |
| L-לאוצין | 39.36 | |
| L-ליזין x HCl | 36.54 | |
| L-מתיונין | 14.92 | |
| L-פנילאלנין | 16.5 | |
| L-פרולין | 17.27 | |
| L-סרין | 26.28 | |
| L-תראונין | 17.87 | |
| L-טריפטופן | 3.06 | |
| מלח דיסודיום L-טירוזין | 26.10 | |
| L-ואלין | 17.57 | |
| ויטמינים | חומצה p-אמינובנזואית | 1 |
| חומצה אסקורבית | 0.56 | |
| D(+)-ביוטין | 0 | |
| D-פנטותנט סידן | 0.2 | |
| כלוריד כולין | 5 | |
| חומצה פולית | 10 | |
| מיו-אינוסיטול | 36 | |
| ניקוטיןאמיד | 0 | |
| חומצה ניקוטינית | 0.5 | |
| פירידוקסל HCl | 0.5 | |
| פירידוקסין HCl | 0.5 | |
| ריבופלבין | 0.2 | |
| תיאמין HCl | 0. | |
| ויטמין B12 | 2.0 |