Egérsejtvonal-hitelesítés (rövid tandemismétlés (STR))
Tekintettel a keresztszennyeződés és a téves azonosítás gyakoriságára, a tudományos kutatási projektekben használt sejtek hitelessége komoly aggodalomra ad okot. Becslések szerint a sejtvonalakon alapuló kutatások mintegy 15-20%-a tévesen azonosított sejtvonalakkal dolgozik. Ezért a sejtvonal profiljának STR-analízis segítségével történő meghatározása kulcsfontosságú a megbízható és megismételhető kutatások elvégzéséhez. Emellett egyre több folyóirat követeli meg a sejtvonalak ellenőrzését, mielőtt egy cikket elfogadnak.
Szolgáltatásunk a következőket foglalja magában
- Sejtvonal-hitelesítés
- Összehasonlítás online adatbázisokkal
- Publikációra kész elemzési jelentés
Könnyen használható
- Kérjük, töltse le a sejtvonal-hitelesítési megrendelőlapot, és a kitöltött és kinyomtatott lapot csatolja a mintaszállítmányhoz.
- Kérjük, hogy a mintákat szobahőmérsékleten, kitömött borítékban küldje el nekünk.
- A gDNS esetében kérjük, küldjön nekünk ≥ 50 μl 50ng/μl gDNS-t Trisben vagy EDTA-ban (10 mM Tris, 0,1 mM EDTA).
- Sejtpellet esetén kérjük, hogy 1,0-5,0 millió sejtet adjon nekünk sejtpelletként. Kérjük, mosson kétszer PBS-szel, és szuszpendálja újra 0,5 ml 70-90%-os etanolban.
Markerek
- A humán sejteket a Promega PowerPlex rendszerével tipizáljuk 16 STR markerrel.
- Az egérsejteket 18 STR markerrel tipizáljuk.
- A patkánysejteket 14 STR markerrel és egy nemspecifikus markerrel tipizáljuk.
- A kutyasejteket 11 STR markerrel tipizálják.
- A hörcsögsejteket 10 STR markerrel tipizálják.
Eredmények
Az eredményeket 2 héten belül megkapja e-mailben. Az eredmények tartalmazzák az adatok összehasonlítását a Cellosaurus adatbázisával. A sejtvonalat hitelesítettnek vagy tévesen azonosítottnak minősítjük.
Rövid tandemismétlődések (STR)
Egy 2-13 bázisból álló, akár több százszor ismétlődő DNS-motívum alkotja a rövid tandemismétlést (STR). Az STR-ben lévő ismétlődések számának egyéni változékonysága a PCR alkalmazásakor az előállított fragmentumok hosszának eltéréséhez vezet. A sejtvonalakat a fragmentumok hosszának ezen variációi alapján profilozzák több lokalizációban.
A sejtvonalak keverékeinek kimutatása
Egy sejtvonal egy vagy több további sejtvonallal való szennyeződését a szennyező sejtvonal 10%-os gyakoriságáig lehet azonosítani. A sejtvonal-kombinációk jellemzően három vagy több csúcsot tartalmazó STR-profilokat adnak egy vagy több lókuszra vonatkozóan.