Cellule MCF10A

Il Freeze Medium CM-1 di Cytion è un mezzo di crioconservazione all'avanguardia, progettato per garantire il massimo livello di vitalità e funzionalità delle cellule dopo il disgelo. Questo terreno versatile è adatto a un ampio spettro di tipi di cellule, comprese quelle umane e animali, ed è quindi uno strumento essenziale per diverse applicazioni di ricerca. Formulato con una combinazione meticolosamente bilanciata di crioprotettori e nutrienti essenziali, Freeze Medium CM-1 riduce al minimo la formazione di cristalli di ghiaccio e lo stress cellulare durante il processo di congelamento, preservando così l'integrità cellulare.
Le caratteristiche principali del Freeze Medium CM-1 includono:

Ampia compatibilità: Efficace per un'ampia gamma di tipi di cellule, tra cui cellule primarie, cellule staminali e linee cellulari consolidate.
Alta vitalità: Ottimizzato per massimizzare il recupero e la vitalità delle cellule dopo lo scongelamento, garantendo risultati sperimentali affidabili.
Pronto all'uso: Comodamente preparato e sterilizzato per l'applicazione immediata, riducendo i tempi di preparazione e il rischio di contaminazione.
Maggiore stabilità: Mantiene prestazioni costanti in condizioni di crioconservazione standard, garantendo risultati riproducibili.
Lunga durata di conservazione: CM-1 è un terreno di crioconservazione contenente siero, pronto all'uso, che può essere conservato in frigorifero fino a un anno.


Uso del CM-1 per il congelamento delle cellule

Per utilizzare CM-1 per il congelamento di cellule aderenti e in sospensione, procedere come segue

Per le cellule aderenti, lavarle e dissociarle dal substrato di coltura. Per le cellule in sospensione, passare direttamente alla fase successiva.
Contare le cellule per assicurarsi che siano alla giusta concentrazione.
Centrifugare le cellule per pellettizzarle, quindi risospenderle nel terreno di coltura CM-1.
Trasferire le cellule risospese in crioviali.
Utilizzare un metodo di congelamento lento prima di trasferire le cellule alla conservazione a lungo termine





Metodo
Descrizione
Passi





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Congelamento manuale

Un metodo graduale che prevede una riduzione graduale della temperatura per garantire la vitalità delle cellule

1️⃣ Mettere le cellule nel terreno di coltura in un congelatore a 4°C per 40 minuti.
2️⃣ Trasferire in un congelatore a -80°C per 24 ore.
3️⃣ Conservare le cellule in azoto liquido per la conservazione a lungo termine



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Utilizzo di Mr. Frosty

Un comodo dispositivo che consente di controllare la velocità di congelamento senza l'uso di energia elettrica

1️⃣ Preparare le cellule in crioviali con terreno di congelamento.
2️⃣ Collocare le crioviali nel contenitore Mr. Frosty.
3️⃣ Conservare a -80°C per 24 ore prima di trasferire in azoto liquido



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Congelatore a velocità controllata

Un congelatore di alta precisione di Thermo Fisher o di altri produttori progettato per la riduzione controllata della temperatura

1️⃣ Programmare il dispositivo per ridurre gradualmente la temperatura.
2️⃣ Collocare le cellule preparate nel congelatore.
3️⃣ Dopo il ciclo di congelamento, trasferire le cellule in azoto liquido









Conservare le crioviali a temperature inferiori a -130°C o in azoto liquido per la conservazione a lungo termine.


Ingredienti

Contiene FBS, DMSO, Glucosio, Sali
Capacità tampone: pH = 7,2
- 7,6


Il terreno di congelamento CM-1 di Cytion offre una soluzione affidabile per la crioconservazione, garantendo un'elevata vitalità cellulare e funzionalità dopo il disgelo per un'ampia gamma di applicazioni di ricerca.

DMEM:Ham's F12 è un terreno di coltura basale ampiamente riconosciuto e utilizzato nella ricerca biologica. Serve come fonte fondamentale di nutrienti per la crescita di varie linee cellulari di mammifero, in particolare se integrato con siero bovino fetale (FBS).

Questa formulazione unica combina il Dulbecco's Modified Eagle Medium (DMEM) e l'Ham's F-12 (Ham's Nutrient Mixture F-12) in un preciso rapporto di 1:1. L'aggiunta di L-glutammina ne migliora ulteriormente la composizione.

Il DMEM, derivato dall'Eagle's Minimal Essential Medium (EMEM), offre una maggiore concentrazione di aminoacidi e vitamine rispetto al suo predecessore. Ham's F-12, invece, è basato sul terreno Ham's F-10 e fornisce un insieme complementare di componenti essenziali.

Per favorire una crescita cellulare ottimale, è prassi comune integrare il DMEM:Ham's F12 con FBS a una concentrazione tipica del 5-10%. Questa aggiunta è necessaria in quanto il terreno di coltura manca di ormoni della crescita, lipidi e proteine fondamentali per lo sviluppo cellulare.

Il DMEM:Ham's F12 incorpora un sistema tampone di pH e viene spesso integrato con il rosso fenolo, un indicatore di pH. Le cellule coltivate in DMEM:Ham's F12, o in qualsiasi terreno che utilizzi il sistema tampone del bicarbonato, richiedono un ambiente controllato con CO2 del 5-10% per mantenere livelli di pH appropriati.


Controllo di qualità

Filtrato sterile


Conservazione e durata di conservazione

Conservare a +2°C a +8°C, al riparo dalla luce.
Una volta aperto, conservare a 4°C e utilizzare entro 6-8 settimane.


Condizioni di spedizione

Temperatura ambiente


Manutenzione

Conservare in frigorifero a +2°C a +8°C al buio. Evitare il congelamento e il riscaldamento frequente a +37°C, in quanto riduce la qualità del prodotto.
Non riscaldare il terreno di coltura oltre i 37°C e non utilizzare fonti di calore non controllate come le microonde.
Se si deve utilizzare solo una parte del terreno di coltura, prelevare la quantità necessaria e riscaldarla a temperatura ambiente prima dell'uso.


Composizione



Categoria
Componenti
Concentrazione (mg/L)


Aminoacidi
Glicina
18.75


L-alanina
4.45


L-Arginina HCl
147.50


L-Asparagina H₂O
7.50


Acido L-Aspartico
6.65


L-Cisteina HCl H₂O
17.56


L-cistina 2 HCl
31.29


Acido L-Glutammico
7.35


L-Glutammina
365.00


L-istidina HCl H₂O
31.48


L-Isoleucina
54.47


L-Leucina
59.05


L-lisina HCl
91.25


L-metionina
17.24


L-fenilalanina
35.48


L-Prolina
17.25


L-Serina
26.25


L-treonina
53.45


L-triptofano
9.02


L-tirosina sale disodico
48.10


L-Valina
52.85


Vitamine
D-Biotina
0.0035


Cloruro di colina
8.98


D-pantotenato di calcio
2.24


Acido folico
2.66


mio-inositolo
12.60


Nicotinamide
2.02


Piridossina HCl
0.031


Piridossale HCl
2.00


Riboflavina
0.219


Tiamina HCl
2.17


Vitamina B12
0.68


Sali inorganici
CaCl₂ 2 H₂O
154.50



CuSO₄ 5 H₂O
0.0013



Fe(NO₃)₃ 9 H₂O
0.05



FeSO₄ 7 H₂O
0.417



KCl
311.80



MgCl₂ 6 H₂O
61.20



MgSO₄
48.84



NaCl
6996.00



NaHCO₃
1200.00



Na₂HPO₄
71.02



NaH₂PO₄
54.30



ZnSO₄ 7 H₂O
0.432


Altri componenti
D-Glucosio
3151.00


Ipossantina
2.40


HEPES
3574.50


Acido linoleico
0.042


Acido lipoico
0.105


Sale sodico di rosso fenolo
8.63


Putrescina 2 HCl
0.081


Sodio piruvato
55.00


Timidina
0.365

Reagente di dissociazione cellulare Accutase
- Un'alternativa delicata alla tripsina
Accutase è una soluzione per il distacco delle cellule che sta rivoluzionando il settore delle colture cellulari. Si tratta di una miscela di enzimi proteolitici e collagenolitici che imita l'azione della tripsina e della collagenasi. A differenza della tripsina, Accutase non contiene componenti di mammiferi o batteri ed è molto più delicato per le cellule, il che lo rende una soluzione ideale per il distacco di routine delle cellule dai contenitori di plastica standard per colture di tessuti e dai contenitori di plastica con rivestimento di adesione. In questo post esploreremo i vantaggi e gli usi di Accutase e come sta cambiando il gioco nella coltura cellulare.
Vantaggi di Accutase
Accutase presenta diversi vantaggi rispetto alle soluzioni di tripsina tradizionali. In primo luogo, può essere utilizzato ogni volta che è necessario un distacco delicato ed efficiente di qualsiasi linea cellulare aderente, il che lo rende un sostituto diretto della tripsina. In secondo luogo, Accutase funziona molto bene sulle cellule staminali embrionali e neuronali e ha dimostrato di mantenere la vitalità di queste cellule dopo il passaging. In terzo luogo, Accutase preserva la maggior parte degli epitopi per la successiva analisi in citometria a flusso, rendendola ideale per l'analisi dei marcatori della superficie cellulare.
Inoltre, non è necessario neutralizzare Accutase durante il passaggio di cellule aderenti. L'aggiunta di altro terreno dopo la divisione delle cellule diluisce Accutase in modo che non sia più in grado di staccare le cellule. Ciò elimina la necessità di una fase di inattivazione e fa risparmiare tempo ai tecnici delle colture cellulari. Infine, Accutase non deve essere aliquotato e un flacone è stabile in frigorifero per 2 mesi.
Applicazioni di Accutase
Accutase è un sostituto diretto della soluzione di tripsina e può essere utilizzato per il passaging delle linee cellulari. Inoltre, l'Accutasi è in grado di staccare le cellule per l'analisi di molti marcatori della superficie cellulare mediante citometria a flusso e per lo smistamento cellulare. Altre applicazioni a valle del trattamento con Accutase includono l'analisi dei marcatori della superficie cellulare, il saggio di crescita dei virus, la proliferazione cellulare, i saggi di migrazione delle cellule tumorali, il passaggio cellulare di routine, la scalabilità della produzione (bioreattore) e la citometria a flusso.
Composizione di Accutase
Accutase non contiene componenti di mammiferi o batteri ed è una miscela di enzimi naturali con attività enzimatica proteolitica e collagenolitica. È formulato a una concentrazione molto più bassa rispetto alla tripsina e alla collagenasi, il che lo rende meno tossico e più delicato, ma altrettanto efficace.
Efficacia di Accutase
È stato dimostrato che Accutase è efficiente nel distaccare le cellule primarie e staminali, mantenendo un'elevata vitalità cellulare rispetto agli enzimi di origine animale come la tripsina. il 100% delle cellule viene recuperato dopo 10 minuti e non vi è alcun danno nel lasciare le cellule in Accutase fino a 45 minuti, grazie all'autodigestione di Accutase.
In sintesi
In conclusione, Accutase è una soluzione potente che sta cambiando il gioco della coltura cellulare. Grazie alla sua natura delicata, all'efficienza e alla versatilità, Accutase è l'alternativa ideale alla tripsina. Se siete alla ricerca di una soluzione affidabile ed efficiente per il distacco delle cellule, Accutase è la soluzione che fa per voi.

Panoramica del prodotto
Volume: 100 ml Conservazione: ≤-15°C Sterilità: Filtrato sterile
Lasoluzione antibiotica/antimicotica (100x) è un concentrato sterile pronto all'uso, progettato per ridurre i rischi di contaminazione microbica nelle colture cellulari e nelle relative applicazioni di laboratorio. Questa soluzione 100x contiene una combinazione consolidata di penicillina, streptomicina e amfotericina B, che fornisce un'attività antimicrobica ad ampio spettro contro batteri Gram-positivi e Gram-negativi, lieviti e funghi filamentosi. La formulazione è adatta all'uso in colture cellulari eucariotiche, terreni di coltura batterici e altri sistemi sensibili alla contaminazione, a sostegno di operazioni di laboratorio pulite e coerenti.
Applicazione e vantaggi Ottimizzata per i protocolli di ricerca di routine, questa soluzione è ampiamente utilizzata per mantenere condizioni asettiche nei flussi di lavoro delle colture cellulari. Offre prestazioni affidabili in ambienti sensibili alla contaminazione, aiutando i ricercatori a ridurre il rischio di crescita microbica senza compromettere la salute delle cellule o la riproducibilità degli esperimenti. La formulazione filtrata sterile elimina la necessità di ulteriori fasi di solubilizzazione, favorendo una preparazione semplificata dei terreni di coltura e riducendo la variabilità delle procedure quotidiane di laboratorio.
Uso e compatibilità Per ottenere concentrazioni standard di lavoro, diluire la soluzione 1:100 nel terreno di coltura completo. Il prodotto è compatibile con un'ampia gamma di linee cellulari di mammifero e di terreni di coltura basali. Grazie alla disponibilità costante delle scorte, i ricercatori possono beneficiare di una continuità di approvvigionamento affidabile e di una pianificazione logistica semplificata. La soluzione deve essere conservata a ≤ -15 °C e protetta da ripetuti cicli di congelamento e scongelamento per mantenerne la stabilità. Solo per uso di ricerca. Non per l'uso in procedure diagnostiche o terapeutiche. Non per uso umano o animale.

Soluzione salina tampone con fosfati (PBS)
La soluzione salina fosfato-bufferata (PBS) è una soluzione tampone ampiamente utilizzata nella ricerca biologica e chimica. Svolge un ruolo cruciale nel mantenere l'equilibrio del pH e l'osmolarità durante varie procedure sperimentali, tra cui l'elaborazione dei tessuti e la coltura cellulare. La nostra soluzione PBS è formulata meticolosamente con ingredienti di elevata purezza per garantire stabilità e affidabilità in ogni esperimento. L'osmolarità e le concentrazioni di ioni del nostro PBS imitano fedelmente quelle del corpo umano, rendendolo isotonico e non tossico per la maggior parte delle cellule.

Composizione della nostra soluzione PBS
La nostra soluzione PBS è una miscela regolata in base al pH di tamponi fosfatici e soluzioni saline di grado ultrapuro. A una concentrazione di lavoro 1X, contiene:

8000 mg/L di cloruro di sodio (NaCl)
200 mg/L Cloruro di potassio (KCl)
1150 mg/L Fosfato di sodio bibasico anidro (Na2HPO4)
200 mg/L Fosfato di potassio monobasico anidro (KH2PO4)

Questa composizione garantisce un pH e un equilibrio ionico ottimali, adatti a un'ampia gamma di applicazioni biologiche.

Applicazioni della nostra soluzione PBS
La nostra soluzione PBS è ideale per diverse applicazioni nella ricerca biologica. Le sue proprietà isotoniche e non tossiche la rendono adatta alla diluizione delle sostanze e al risciacquo dei contenitori cellulari. Le soluzioni PBS contenenti EDTA sono efficaci per staccare le cellule attaccate e raggrumate. Tuttavia, i metalli divalenti come lo zinco non devono essere aggiunti al PBS, poiché possono causare precipitazioni. In questi casi, si consiglia di utilizzare i tamponi Good's. Inoltre, la nostra soluzione di PBS è un'alternativa accettabile al terreno di trasporto virale per il trasporto e la conservazione dei virus a RNA, compreso il SARS-CoV-2.

Controllo di qualità

Filtrato sterile


Conservazione e durata di conservazione

Conservare a +2°C a +25°C, al riparo dalla luce.
Una volta aperto, conservare a 2°C
- 25°C e utilizzare entro 24 mesi.


Condizioni di spedizione

Temperatura ambiente


Manutenzione

Conservare in frigorifero a +2°C a +8°C al buio. Evitare il congelamento e il riscaldamento frequente a +37°C, in quanto riduce la qualità del prodotto.
Non riscaldare il terreno di coltura oltre i 37°C e non utilizzare fonti di calore non controllate come le microonde.
Se si deve utilizzare solo una parte del terreno di coltura, prelevare la quantità necessaria e riscaldarla a temperatura ambiente prima dell'uso.

Composizione



Categoria
Componenti
Concentrazione (mg/L)


Sali
Cloruro di potassio
200



Potassio fosfato monobasico anidro
200



Cloruro di sodio
8000



Sodio fosfato bibasico anidro
1150

Organismo	Umano
Tessuto	Seno
Malattia	Adenocarcinoma

Organismo	Umano
Tessuto	Seno
Malattia	Adenocarcinoma