DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/L Glucose, w: 2,5 mM L-Glutamine, w: 15 mM HEPES, w: 0,5 mM Natriumpyruvaat, w: 1,2 g/L NaHCO3
DMEM:Ham's F12 is een algemeen erkend en veelgebruikt basismedium in celkweek voor biologisch onderzoek. Het dient als een fundamentele bron van voedingsstoffen voor de groei van verschillende zoogdiercellijnen, vooral wanneer het wordt aangevuld met foetaal runderserum (FBS).
Deze unieke formulering combineert Dulbecco's Modified Eagle Medium (DMEM) en Ham's F-12 (Ham's Nutrient Mixture F-12) in een nauwkeurige 1:1 verhouding. De toevoeging van L-glutamine verbetert de samenstelling nog verder.
DMEM, afgeleid van Eagle's Minimal Essential Medium (EMEM), biedt een verhoogde concentratie aminozuren en vitaminen vergeleken met zijn voorganger. Ham's F-12 daarentegen is gebaseerd op Ham's F-10 medium en biedt een aanvullende set essentiële componenten.
Om optimale celgroei te ondersteunen, is het gebruikelijk om DMEM:Ham's F12 aan te vullen met FBS in een typische concentratie van 5-10%. Deze toevoeging is nodig omdat het medium geen groeihormonen, lipiden en eiwitten bevat die cruciaal zijn voor de ontwikkeling van cellen.
DMEM:Ham's F12 bevat een pH-buffersysteem en wordt vaak aangevuld met fenolrood, een pH-indicator. Voor het kweken van cellen in DMEM:Ham's F12, of elk medium dat het bicarbonaat-buffersysteem gebruikt, is een gecontroleerde CO2-omgeving van 5-10% nodig om de juiste pH-niveaus te handhaven.
Kwaliteitscontrole
- Steriel gefilterd
Opslag en houdbaarheid
- Bewaren bij +2°C tot +8°C, beschermd tegen licht.
- Na opening bewaren bij 4°C en binnen 6-8 weken gebruiken.
Verzendomstandigheden
- Omgevingstemperatuur
Onderhoud
- Koel bewaren bij +2°C tot +8°C in het donker. Vermijd invriezen en frequente opwarming tot +37°C, omdat dit de kwaliteit van het product vermindert.
- Verwarm het medium niet verder dan 37°C en gebruik geen ongecontroleerde warmtebronnen zoals magnetrons.
- Als slechts een deel van het medium gebruikt wordt, verwijder dan de benodigde hoeveelheid en warm het op tot kamertemperatuur voor gebruik.
Samenstelling
| Categorie | Bestanddelen | Concentratie (mg/L) |
| Aminozuren | Glycine | 18.75 |
| L-Alanine | 4.45 | |
| L-Arginine HCl | 147.50 | |
| L-Asparagine H₂O | 7.50 | |
| L-Asparaginezuur | 6.65 | |
| L-Cysteïne HCl H₂O | 17.56 | |
| L-Cystine 2 HCl | 31.29 | |
| L-Glutaminezuur | 7.35 | |
| L-Glutamine | 365.00 | |
| L-Histidine HCl H₂O | 31.48 | |
| L-Isoleucine | 54.47 | |
| L-Leucine | 59.05 | |
| L-Lysine HCl | 91.25 | |
| L-Methionine | 17.24 | |
| L-Fenylalanine | 35.48 | |
| L-Proline | 17.25 | |
| L-Serine | 26.25 | |
| L-Threonine | 53.45 | |
| L-Tryptofaan | 9.02 | |
| L-Tyrosine Dinatriumzout | 48.10 | |
| L-Valine | 52.85 | |
| Vitaminen | D-Biotine | 0.0035 |
| Choline Chloride | 8.98 | |
| D-Calcium Pantothenaat | 2.24 | |
| Foliumzuur | 2.66 | |
| myo-Inositol | 12.60 | |
| Nicotinamide | 2.02 | |
| Pyridoxine HCl | 0.031 | |
| Pyridoxaal HCl | 2.00 | |
| Riboflavine | 0.219 | |
| Thiamine HCl | 2.17 | |
| Vitamine B12 | 0.68 | |
| Anorganische zouten | CaCl₂ 2 H₂O | 154.50 |
| CuSO₄ 5 H₂O | 0.0013 | |
| Fe(NO₃)₃ 9 H₂O | 0.05 | |
| FeSO₄ 7 H₂O | 0.417 | |
| KCl | 311.80 | |
| MgCl₂ 6 H₂O | 61.20 | |
| MgSO₄ | 48.84 | |
| NaCl | 6996.00 | |
| NaHCO₃ | 1200.00 | |
| Na₂HPO₄ | 71.02 | |
| NaH₂PO₄ | 54.30 | |
| ZnSO₄ 7 H₂O | 0.432 | |
| Andere componenten | D-glucose | 3151.00 |
| Hypoxanthine | 2.40 | |
| HEPES | 3574.50 | |
| Linolzuur | 0.042 | |
| Liponzuur | 0.105 | |
| Fenolrood natriumzout | 8.63 | |
| Putrescine 2 HCl | 0.081 | |
| Natriumpyruvaat | 55.00 | |
| Thymidine | 0.365 |