Ham's F12K-medium, w: 2,0 mM L-glutamine, w: 2,0 mM natriumpyruvaat, w: 2,5 g/L NaHCO3
Introductie van Ham's F-12K (Kaighn's) medium, een gespecialiseerde modificatie van Ham's F-12 medium, ontworpen om te voldoen aan de unieke eisen van biologisch onderzoek. Dit geavanceerde medium biedt duidelijke voordelen en verbetert de kweek van primaire menselijke hepatocyten en levercellen van ratten en kippen, met name in omstandigheden met gereduceerd serum.
Ham's F-12K (Kaighn's) medium is zorgvuldig geformuleerd om de omstandigheden voor celkweek te optimaliseren. Het heeft een verrijkte samenstelling en biedt verhoogde gehaltes aan essentiële componenten zoals aminozuren en natriumpyruvaat, evenals extra elementen zoals putrescine, thymidine, hypoxanthine en zink. Deze toevoegingen stellen onderzoekers in staat om het medium aan te vullen met minimaal serum of gedefinieerde componenten voor specifieke celtypes, waardoor precieze experimentele omstandigheden mogelijk worden.
Met name Ham's F-12K (Kaighn's) medium bevat geen eiwitten of groeifactoren. Bijgevolg is aanvulling met groeifactoren en foetaal runderserum (FBS) vaak noodzakelijk, waardoor onderzoekers het medium kunnen aanpassen aan de vereisten van hun specifieke cellijnen. Voor optimale prestaties moet de concentratie FBS zorgvuldig worden geoptimaliseerd voor elke cellijn, om optimale groei en functionaliteit te garanderen.
Om de fysiologische pH te handhaven, maakt Ham's F-12K (Kaighn's) medium gebruik van een natriumbicarbonaat buffersysteem (2,5 g/L), waardoor een gecontroleerde 5-10% CO2 omgeving nodig is tijdens de kweek. Dit zorgt ervoor dat de pH van het medium binnen het ideale bereik blijft voor celgroei en levensvatbaarheid
Kwaliteitscontrole
- pH = 7,2 +/- 0,02 bij 20-25°C.
- Elk lot is getest op steriliteit en afwezigheid van mycoplasma en bacteriën.
Onderhoud
- Koel bewaren bij +2°C tot +8°C in het donker. Invriezen en opwarmen tot +37°C minimaliseren de kwaliteit van het product.
- Verwarm het medium niet tot meer dan 37°C en gebruik geen oncontroleerbare warmtebronnen (bijv. magnetronapparatuur).
- Als slechts een deel van het medium wordt gebruikt, haal dan deze hoeveelheid uit de fles en warm het op bij kamertemperatuur.
- Houdbaarheid voor elk medium behalve het basismedium is 8 weken vanaf de productiedatum.
Samenstelling
| Bestanddelen | mg/L | |
| Anorganische zouten | Calciumchloride x 2H2O | 135,24 |
| Koper(II)sulfaat x 5H2O | 0,00 | |
| IJzer(II)sulfaat x 7H2O | 0,83 | |
| Magnesiumchloride x 6H2O | 105,72 | |
| Magnesiumsulfaat x 7H2O | 394,49 | |
| Kaliumchloride | 283,29 | |
| Kaliumdiwaterstoffosfaat | 58,52 | |
| Natriumchloride | 7597,20 | |
| dinatriumwaterstoffosfaat watervrij |
115,02 | |
| Zinksulfaat x 7H2O | 0,14 | |
| Andere componenten | D(+)-Glucose watervrij | 1260,00 |
| Hypoxanthine | 4,08 | |
| DL-α liponzuur | 0,21 | |
| Fenol rood | 3,00 | |
| Putrescine x 2HCl | 0,32 | |
| Natriumpyruvaat | 220,00 | |
| NaHCO3 | 2500,00 | |
| Thymidine | 0,73 | |
| Aminozuren | L-Alanine | 17,82 |
| L-Arginine x HCl | 421,40 | |
| L-Asparagine x H2O | 30,02 | |
| L-Asparaginezuur | 26,62 | |
| L-Cysteïne x HCl x H2O | 70,24 | |
| L-Glutamine | 292,20 | |
| L-Glutaminezuur | 29,42 | |
| Glycine | 15,01 | |
| L-Histidine x HCl x H2O | 41,92 | |
| L-Isoleucine | 7,87 | |
| L-Leucine | 26,24 | |
| L-Lysine x HCl | 73,04 | |
| L-Methionine | 8,95 | |
| L-Fenylalanine | 9,91 | |
| L-proline | 69,06 | |
| L-Serine | 21,02 | |
| L-Threonine | 23,82 | |
| L-Tryptofaan | 4,08 | |
| L-Tyrosine | 10,87 | |
| L-Valine | 23,42 | |
| Vitaminen | D(+)-Biotine | 0,07 |
| D-Calcium pantothenaat | 0,48 | |
| Choline chloride | 13,96 | |
| Foliumzuur | 1,32 | |
| myo-Inositol | 18,02 | |
| Nicotinamide | 0,04 | |
| Pyridoxine x HCl | 0,06 | |
| Riboflavine | 0,04 | |
| Thiamine x HCl | 0,34 | |
| Vitamine B12 | 1,36 |