A549-RFP-celler
800,00 €*
Produktene sendes frosset på tørris i kryorør. Hvert kryorør inneholder vanligvis 3 × 10 6 celler for vedheftende linjer eller 5 × 106 celler for suspensjonslinjer (se batch-CoA for detaljer).
Generell informasjon
| Beskrivelse | A549-RFP er et fluorescerende merket derivat av den humane A549 lungeadenokarsinomcellelinjen, konstruert for å konstant uttrykke rødt fluorescerende protein (RFP) for visualisering og sporing i sanntid. Den opprinnelige A549-linjen ble etablert fra et lungeadenokarsinom fra en voksen donor og viser epitelial morfologi med vedheftende vekstegenskaper. A549-celler beholder egenskapene til type II alveolære epitelceller, inkludert uttrykk av cytokeratiner og evnen til å produsere overflateaktive proteiner. Innføringen av en stabil RFP-ekspresjonskassett muliggjør kontinuerlig fluorescens uten å endre de iboende proliferative og metabolske egenskapene til den opprinnelige linjen i nevneverdig grad, noe som gjør A549-RFP egnet for longitudinelle bildediagnostiske studier. Funksjonell karakterisering av A549-celler i store kreftcellepaneler har vist at cellestørrelse, proteininnhold og proteinsyntesehastighet er positivt korrelert med cellevolum, og at større celler har en tendens til å proliferere langsommere. I komparative analyser er A549-celler plassert blant relativt mindre, raskere prolifererende epitelkreftcellelinjer, i motsetning til større, mer mesenkymale celler som viser høyere vimentinuttrykk og lavere E-kadherinnivåer. Disse metabolske og fenotypiske forskjellene er relevante for eksperimentell tolkning, da proteinsyntesehastigheter og metabolske strømmer skaleres med cellestørrelse og påvirker følsomheten for midler som retter seg mot proliferasjon eller mTOR-regulerte anabole veier. RFP-modifiseringen bevarer A549-cellers egnethet for slike metabolske og farmakologiske undersøkelser, samtidig som den muliggjør direkte visualisering. A549-RFP er mye brukt i samdyrkningssystemer, ortotopiske og ektopiske xenotransplantasjonsmodeller og invasjons- eller metastaseassayer der fluorescerende merking letter skillet mellom tumorceller og stromale eller vertskomponenter. Den stabile røde fluorescensen støtter anvendelser som live-cell imaging, high-content screening, flowcytometri-basert kvantifisering og in vivo optisk imaging. Som en sporbar variant av en velkarakterisert lungeadenokarsinom-modell, gir A549-RFP en robust plattform for å studere tumorcelleproliferasjon, epitel-mesenkymalt overgang, medikamentrespons og interaksjoner mellom tumor og mikromiljø både in vitro og in vivo. |
|---|---|
| Organisme | Menneskelig |
| Vev | Lunge |
| Sykdom | Adenokarsinom i lungene |
| Synonymer | A 549, A549, NCI-A549, A549/ATCC, A549 ATCC, A549ATCC, hA549 |
Kjennetegn
| Alder | 58 år |
|---|---|
| Kjønn | Mann |
| Etnisitet | Kaukasisk |
Regulatoriske data
| Sitat | A549-RFP (Cytion katalognummer 305659) |
|---|---|
| Biosikkerhetsnivå | 1 |
| NCBI_TaxID | 9606 |
| CellosaurusAccession | CVCL_0023 |
| GMO-status | GMO-S1: Denne A549-lungekreftlinjen inneholder en lentiviral RFP-konstruksjon som muliggjør rød fluorescensavbildning. Denne klassifiseringen gjelder kun i Tyskland og kan være annerledes andre steder. |
Biomolekylære data
| Proteinuttrykk | RFP |
|---|---|
| MSI-status | Mutasjon: p.Gly12Ser, homozygot; Mutasjon: p.Gln37Ter, homozygot |
| Mutasjonsprofil | Mutasjon: p.Gly12Ser, homozygot; Mutasjon: p.Gln37Ter, homozygot |
Håndtering
| Kulturmedium | DMEM, m: 4,5 g/L glukose, m: 4 mM L-glutamin, m: 3,7 g/L NaHCO3, m: 1,0 mM natriumpyruvat (Cytion artikkelnummer 820300a) |
|---|---|
| Kosttilskudd | Suppler mediet med 10 % FBS |
| Dissosiasjonsreagens | Accutase |
| Doblingstid | 20–40 timer |
| Frys medium | Som kryopreserveringsmedium bruker vi komplett vekstmedium + 10 % DMSO for å sikre tilstrekkelig levedyktighet etter opptining. |
| Opptining og dyrking av celler |
|
| Inkubasjonsatmosfære | 37 °C, 5 %CO2, befuktet atmosfære. |
| Leveringsbetingelser | Kryopreserverte cellelinjer sendes på tørris i validert, isolert emballasje med tilstrekkelig kjølemiddel til å opprettholde en temperatur på ca. -78 °C under hele transporten. Ved mottak skal beholderen inspiseres umiddelbart, og hetteglassene skal straks overføres til egnet lagringsplass. |
| Lagringsforhold | For langtidsoppbevaring plasseres hetteglassene i flytende nitrogen i dampfase ved ca. -150 til -196 °C. Lagring ved -80 °C er kun akseptabelt som et kort mellomtrinn før overføring til flytende nitrogen. |
Kvalitetskontroll / Genetisk profil / HLA
Avtale om materialoverføring
Hvis du har tenkt å bruke Cytion-cellelinjer utelukkende til intern forskning på ett enkelt forskningssted, må du fylle ut og signere vår materialoverføringsavtale (MTA) og sende den sammen med bestillingen din.
For alle kommersielle anvendelser – inkludert, men ikke begrenset til, betaling for tjenester, kvalitetskontrolltesting, produktutgivelse, diagnostisk bruk eller regulatoriske studier – vennligst fyll ut skjemaet for tiltenkt bruk, slik at vi kan utarbeide en avtale som er tilpasset prosjektet ditt.
Merk: MTA gjelder kun for visse cellelinjer. Hvis denne merknaden og MTA-dokumentet vises på en produktside, gjelder avtalen. For cellelinjer som ikke dekkes av MTA, vil det ikke vises noen henvisning til avtalen. MTA er ikke gyldig for kunder i Amerika, Kina eller Taiwan. Kontakt vårt amerikanske selskap for å motta den aktuelle avtalen.
-
Nødvendige produkter
Nødvendige produkter
Frysemedium CM-1 - 50 mlVarianter av kryopreserveringsmedier: 50 mlCytions frysemedium CM-1 er et toppmoderne kryopreserveringsmedium som er utviklet for å sikre det høyeste nivået av cellelevedyktighet og funksjonalitet etter opptining. Dette allsidige mediet er egnet for et bredt spekter av celletyper, inkludert både humane og animalske celler, noe som gjør det til et viktig verktøy for ulike forskningsapplikasjoner. Freeze Medium CM-1 er formulert med en nøye balansert kombinasjon av kryobeskyttende midler og essensielle næringsstoffer, og minimerer dannelsen av iskrystaller og cellestress under fryseprosessen, slik at cellenes integritet bevares.
De viktigste egenskapene til Freeze Medium CM-1 inkluderer
Bred kompatibilitet: Effektivt for et bredt spekter av celletyper, inkludert primærceller, stamceller og etablerte cellelinjer.
Høy levedyktighet: Optimalisert for å maksimere cellegjenvinning og levedyktighet etter opptining, noe som sikrer pålitelige eksperimentelle resultater.
Klar til bruk: Praktisk tilberedt og sterilisert for umiddelbar bruk, noe som reduserer forberedelsestiden og risikoen for kontaminering.
Forbedret stabilitet: Opprettholder konsistent ytelse under standard kryopreserveringsforhold, noe som sikrer reproduserbare resultater.
Lang holdbarhet: CM-1 er et serumholdig kryopreserveringsmedium som er klart til bruk, og som kan oppbevares i kjøleskapet i opptil ett år.
Bruk av CM-1 til nedfrysing av celler
Følg disse trinnene for å bruke CM-1 til nedfrysing av både adherente celler og suspensjonsceller
For adherente celler, vask og dissosier dem fra kultursubstratet. For suspensjonsceller går du direkte til neste trinn.
Tell cellene for å sikre at de har riktig konsentrasjon.
Sentrifuger cellene for å pelleter dem, og resuspender dem deretter i CM-1-frysemedium.
Overfør de resuspenderte cellene til kryovialer.
Bruk en langsom nedfrysingsmetode før du overfører cellene til langtidslagring
Metode
Beskrivelse
Trinn
❄️
Manuell frysing
En trinnvis metode som innebærer gradvis reduksjon av temperaturen for å sikre cellenes levedyktighet
1️⃣ Plasser celler i frysemedium i en fryser på 4 °C i 40 minutter.
2️⃣ Overfør til en fryser på -80 °C i 24 timer.
3️⃣ Oppbevar cellene i flytende nitrogen for langtidsoppbevaring
❄️
Bruk av Mr. Frosty
Et praktisk apparat som gjør det mulig å kontrollere frysehastigheten uten elektrisk strøm
1️⃣ Klargjør celler i kryovialer med frysemedium.
2️⃣ Plasser kryovialene i Mr. Frosty-beholderen.
3️⃣ Oppbevares ved -80 °C i 24 timer før de overføres til flytende nitrogen
❄️
Fryser med kontrollert hastighet
En høypresisjonsfryser fra Thermo Fisher eller andre produsenter som er utviklet for kontrollert temperaturreduksjon
1️⃣ Programmer enheten til å senke temperaturen gradvis.
2️⃣ Plasser de forberedte cellene i fryseren.
3️⃣ Etter frysesyklusen overføres cellene til flytende nitrogen
Oppbevar kryovialene ved temperaturer under -130 °C eller i flytende nitrogen for langtidsoppbevaring.
Ingredienser
Inneholder FBS, DMSO, glukose, salter
Bufferkapasitet: pH = 7,2 til 7,6
Cytions frysemedium CM-1 er en pålitelig løsning for kryopreservering som sikrer høy cellelevedyktighet og funksjonalitet etter opptining for et bredt spekter av forskningsapplikasjoner.59,00 €*AccutaseVarianter: 100 mlAccutase Cell Dissociation Reagent
- et skånsomt alternativ til Trypsin
Accutase er en celledissosiasjonsløsning som revolusjonerer cellekulturindustrien. Det er en blanding av proteolytiske og kollagenolytiske enzymer som etterligner virkningen av trypsin og kollagenase. I motsetning til trypsin inneholder Accutase ingen pattedyr
- eller bakteriekomponenter og er mye mer skånsom mot cellene, noe som gjør den til en ideell løsning for rutinemessig løsgjøring av celler fra standard vevskulturplast og adhesjonsbelagt plast. I dette blogginnlegget skal vi se nærmere på fordelene og bruksområdene til Accutase, og hvordan det endrer spillet innen cellekultur.
Fordeler med Accutase
Accutase har flere fordeler sammenlignet med tradisjonelle trypsinløsninger. For det første kan den brukes når det er behov for skånsom og effektiv løsgjøring av en hvilken som helst adherente cellelinje, noe som gjør den til en direkte erstatning for trypsin. For det andre fungerer Accutase svært godt på embryonale og nevronale stamceller, og det har vist seg at den opprettholder levedyktigheten til disse cellene etter passering. For det tredje bevarer Accutase de fleste epitoper for påfølgende flowcytometrianalyse, noe som gjør den ideell for analyse av celleoverflatemarkører.
I tillegg trenger ikke Accutase å nøytraliseres ved passering av adherente celler. Ved å tilsette mer media etter at cellene er delt, fortynnes Accutase slik at den ikke lenger er i stand til å løsrive celler. Dette eliminerer behovet for et inaktiveringstrinn og sparer tid for cellekulturteknikerne. Accutase trenger heller ikke å alikvoteres, og en flaske er stabil i kjøleskapet i to måneder.
Bruksområder for Accutase
Accutase er en direkte erstatning for trypsinløsning og kan brukes til passering av cellelinjer. I tillegg fungerer Accutase godt når celler skal løsnes for analyse av mange celleoverflatemarkører ved hjelp av flowcytometri og for cellesortering. Andre nedstrøms bruksområder for Accutase-behandling omfatter analyse av celleoverflatemarkører, virusvekstanalyse, celleproliferasjon, tumorcellemigrasjonsanalyser, rutinemessig cellepassasje, produksjonsoppskalering (bioreaktor) og strømningscytometri.
Sammensetning av Accutase
Accutase inneholder ingen pattedyr
- eller bakteriekomponenter og er en naturlig enzymblanding med proteolytisk og kollagenolytisk enzymaktivitet. Den er formulert i en mye lavere konsentrasjon enn trypsin og kollagenase, noe som gjør den mindre giftig og mer skånsom, men like effektiv.
Effektiviteten til Accutase
Accutase har vist seg å være effektivt når det gjelder å løsrive primær
- og stamceller og opprettholde høy cellelevedyktighet sammenlignet med enzymer av animalsk opprinnelse, som trypsin. 100 % av cellene gjenvinnes etter 10 minutter, og det er ikke farlig å la cellene ligge i Accutase i opptil 45 minutter, takket være Accutases autodigestion.
Oppsummering
Konklusjonen er at Accutase er en kraftfull løsning som er i ferd med å endre spillereglene for cellekultur. Med sin skånsomme natur, effektivitet og allsidighet er Accutase det ideelle alternativet til trypsin. Hvis du er på utkikk etter en pålitelig og effektiv løsning for celledelingen, er Accutase løsningen for deg.75,00 €*Antibiotisk/antimykotisk løsning (100x)Produktoversikt
Volum: 100 ml Oppbevaring: ≤-15 °C Sterilitet: Sterilfiltrert
Antibiotic/Antimycotic Solution (100x) er et sterilt, bruksklart konsentrat som er utviklet for å redusere risikoen for mikrobiell kontaminering i cellekulturer og relaterte laboratorieapplikasjoner. Denne 100x-løsningen inneholder en veletablert kombinasjon av penicillin, streptomycin og amfotericin B, som gir bredspektret antimikrobiell aktivitet mot grampositive og gramnegative bakterier, gjærsopp og filamentøse sopper. Formuleringen er egnet for bruk i eukaryote cellekulturer, bakteriemedier og andre systemer som er følsomme for kontaminering, og støtter rene og konsekvente laboratorieoperasjoner.
Anvendelse og fordeler Denne løsningen er optimalisert for rutinemessige forskningsprotokoller og brukes i stor utstrekning for å opprettholde aseptiske forhold i arbeidsflyter for cellekulturer. Den gir pålitelig ytelse i kontamineringssensitive miljøer, og hjelper forskere med å redusere risikoen for mikrobiell overvekst uten at det går på bekostning av cellenes helse eller eksperimentell reproduserbarhet. Den sterilfiltrerte formuleringen eliminerer behovet for ytterligere solubiliseringstrinn, noe som bidrar til strømlinjeformet tilberedning av medier og reduserer variabiliteten i daglige laboratorieprosedyrer.
Bruk og kompatibilitet For å oppnå standard arbeidskonsentrasjoner fortynner du løsningen 1:100 i ditt komplette dyrkingsmedium. Produktet er kompatibelt med et bredt spekter av pattedyrcellelinjer og basalmedier. Med konsekvent lagertilgjengelighet kan forskere dra nytte av pålitelig forsyningskontinuitet og forenklet logistikkplanlegging. Løsningen skal oppbevares ved ≤ -15 °C og beskyttes mot gjentatte fryse-tine-sykluser for å opprettholde stabiliteten. Kun til forskningsbruk. Ikke til bruk i diagnostiske eller terapeutiske prosedyrer. Ikke til bruk på mennesker eller dyr.45,00 €*PBSFosfatbufret saltvannsløsning (PBS)
Fosfatbufret saltvann (PBS) er en mye brukt bufferløsning i biologisk og kjemisk forskning. Den spiller en avgjørende rolle når det gjelder å opprettholde pH-balansen og osmolariteten under ulike eksperimentelle prosedyrer, inkludert vevsprosessering og cellekultur. Vår PBS-løsning er omhyggelig formulert med ingredienser av høy renhet for å sikre stabilitet og pålitelighet i hvert eneste eksperiment. Osmolariteten og ionekonsentrasjonene i PBS-løsningen vår etterligner i stor grad de som finnes i menneskekroppen, noe som gjør den isotonisk og ugiftig for de fleste celler.
Sammensetningen av vår PBS-løsning
Vår PBS-løsning er en pH-justert blanding av ultrarene fosfatbuffere og saltvannsløsninger. Ved en 1X arbeidskonsentrasjon inneholder den
8000 mg/L natriumklorid (NaCl)
200 mg/L kaliumklorid (KCl)
1150 mg/L vannfritt dibasisk natriumfosfat (Na2HPO4)
200 mg/L Vannfritt kaliumfosfat monobasisk (KH2PO4)
Denne sammensetningen sikrer en optimal pH
- og ionebalanse, og er egnet for et bredt spekter av biologiske anvendelser.
Bruksområder for vår PBS-løsning
Vår PBS-løsning er ideell for ulike bruksområder innen biologisk forskning. De isotone og giftfrie egenskapene gjør den egnet til fortynning av substanser og skylling av cellebeholdere. PBS-løsninger som inneholder EDTA, er effektive for å løsne celler som sitter fast og klumper seg sammen. PBS bør imidlertid ikke tilsettes toverdige metaller som sink, da dette kan føre til utfelling. I slike tilfeller anbefales Good's buffere. I tillegg er vår PBS-løsning et akseptabelt alternativ til viralt transportmedium for transport og lagring av RNA-virus, inkludert SARS-CoV-2.
Kvalitetskontroll
Sterilfiltrert
Oppbevaring og holdbarhet
Oppbevares ved +2 °C til +25 °C, beskyttet mot lys.
Etter åpning, oppbevares ved 2 °C til 25 °C og brukes innen 24 måneder.
Transportforhold
Omgivelsestemperatur
Vedlikehold
Oppbevares i kjøleskap ved +2 °C til +8 °C i mørke. Unngå frysing og hyppig oppvarming til +37 °C, da det reduserer produktkvaliteten.
Ikke varm opp mediet til mer enn 37 °C eller bruk ukontrollerte varmekilder som mikrobølgeovner.
Hvis bare en del av mediet skal brukes, ta ut den nødvendige mengden og varm den opp til romtemperatur før bruk.
Sammensetning
Kategori
Komponenter
Konsentrasjon (mg/L)
Salter
Kaliumklorid
200
Kaliumfosfat, vannfritt, monobasisk
200
Natriumklorid
8000
Natriumfosfat, vannfritt, dibasisk
115020,00 €* -
Relaterte produkter
Relaterte produkter