DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/L glukose, w: 2,5 mM L-glutamin, w: 15 mM HEPES, w: 0,5 mM natriumpyruvat, w: 1,2 g/L NaHCO3
DMEM:Ham's F12 er et anerkjent og mye brukt basalmedium i cellekulturer for biologisk forskning. Det fungerer som en grunnleggende næringskilde for vekst av ulike cellelinjer fra pattedyr, særlig når det er supplert med Fetal Bovine Serum (FBS).
Denne unike formuleringen kombinerer Dulbecco's Modified Eagle Medium (DMEM) og Ham's F-12 (Ham's Nutrient Mixture F-12) i et nøyaktig 1:1-forhold. Sammensetningen er ytterligere forbedret ved tilsetning av L-glutamin.
DMEM, som er avledet fra Eagle's Minimal Essential Medium (EMEM), har en høyere konsentrasjon av aminosyrer og vitaminer enn forgjengeren. Ham's F-12 er derimot basert på Ham's F-10 medium, og gir et komplementært sett med essensielle komponenter.
For å støtte optimal cellevekst er det vanlig praksis å supplere DMEM:Ham's F12 med FBS i en typisk konsentrasjon på 5-10 %. Dette er nødvendig fordi mediet mangler veksthormoner, lipider og proteiner som er avgjørende for cellenes utvikling.
DMEM:Ham's F12 inneholder et pH-buffersystem og tilsettes ofte fenolrødt, som er en pH-indikator. Celler som dyrkes i DMEM:Ham's F12, eller i et hvilket som helst medium som bruker bikarbonatbuffersystemet, krever et kontrollert CO2-miljø på 5-10 % for å opprettholde passende pH-nivåer.
Kvalitetskontroll
- Sterilfiltrert
Oppbevaring og holdbarhet
- Oppbevares ved +2 °C til +8 °C, beskyttet mot lys.
- Etter åpning, oppbevares ved 4 °C og brukes innen 6-8 uker.
Transportforhold
- Omgivelsestemperatur
Vedlikehold
- Oppbevares i kjøleskap ved +2 °C til +8 °C i mørke. Unngå frysing og hyppig oppvarming til +37 °C, da det reduserer produktkvaliteten.
- Ikke varm opp mediet til mer enn 37 °C eller bruk ukontrollerte varmekilder som mikrobølgeovner.
- Hvis bare en del av mediet skal brukes, ta ut den nødvendige mengden og varm den opp til romtemperatur før bruk.
Sammensetning
| Kategori | Komponenter | Konsentrasjon (mg/L) |
| Aminosyrer | Glysin | 18.75 |
| L-Alanin | 4.45 | |
| L-arginin HCl | 147.50 | |
| L-asparagin H₂O | 7.50 | |
| L-asparaginsyre | 6.65 | |
| L-cystein HCl H₂O | 17.56 | |
| L-Cystin 2 HCl | 31.29 | |
| L-glutaminsyre | 7.35 | |
| L-glutamin | 365.00 | |
| L-Histidin HCl H₂O | 31.48 | |
| L-isoleucin | 54.47 | |
| L-Leucin | 59.05 | |
| L-Lysin HCl | 91.25 | |
| L-metionin | 17.24 | |
| L-fenylalanin | 35.48 | |
| L-prolin | 17.25 | |
| L-Serin | 26.25 | |
| L-Threonin | 53.45 | |
| L-Tryptofan | 9.02 | |
| L-Tyrosin Dinatriumsalt | 48.10 | |
| L-Valin | 52.85 | |
| Vitaminer | D-Biotin | 0.0035 |
| Kolinklorid | 8.98 | |
| D-kalsiumpantotenat | 2.24 | |
| Folsyre | 2.66 | |
| myo-Inositol | 12.60 | |
| Nikotinamid | 2.02 | |
| Pyridoksin HCl | 0.031 | |
| Pyridoksal HCl | 2.00 | |
| Riboflavin | 0.219 | |
| Tiamin HCl | 2.17 | |
| Vitamin B12 | 0.68 | |
| Uorganiske salter | CaCl₂ 2 H₂O | 154.50 |
| CuSO₄ 5 H₂O | 0.0013 | |
| Fe(NO₃)₃ 9 H₂O | 0.05 | |
| FeSO₄ 7 H₂O | 0.417 | |
| KCl | 311.80 | |
| MgCl₂ 6 H₂O | 61.20 | |
| MgSO₄ | 48.84 | |
| NaCl | 6996.00 | |
| NaHCO₃ | 1200.00 | |
| Na₂HPO₄ | 71.02 | |
| NaH₂PO₄ | 54.30 | |
| ZnSO₄ 7 H₂O | 0.432 | |
| Andre komponenter | D-Glukose | 3151.00 |
| Hypoksantin | 2.40 | |
| HEPES | 3574.50 | |
| Linolsyre | 0.042 | |
| Liposyre | 0.105 | |
| Fenolrødt natriumsalt | 8.63 | |
| Putrescin 2 HCl | 0.081 | |
| Natriumpyruvat | 55.00 | |
| Tymidin | 0.365 |