DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/L glukos, w: 2,5 mM L-glutamin, w: 15 mM HEPES, w: 0,5 mM natriumpyruvat, w: 1,2 g/L NaHCO3
DMEM:Ham's F12 är ett allmänt erkänt och flitigt använt basalt medium för cellodling inom biologisk forskning. Det fungerar som en grundläggande näringskälla för tillväxt av olika cellinjer från däggdjur, särskilt när det kompletteras med fetalt bovint serum (FBS).
Denna unika formulering kombinerar Dulbeccos Modified Eagle Medium (DMEM) och Ham's F-12 (Ham's Nutrient Mixture F-12) i ett exakt förhållande 1:1. Tillsatsen av L-glutamin förbättrar dess sammansättning ytterligare.
DMEM, som härrör från Eagle's Minimal Essential Medium (EMEM), erbjuder en ökad koncentration av aminosyror och vitaminer jämfört med sin föregångare. Ham's F-12 är däremot baserat på Ham's F-10 medium, vilket ger en kompletterande uppsättning essentiella komponenter.
För att stödja optimal celltillväxt är det vanligt att DMEM:Ham's F12 kompletteras med FBS i en typisk koncentration på 5-10%. Detta tillskott är nödvändigt eftersom mediet saknar tillväxthormoner, lipider och proteiner som är avgörande för cellutvecklingen.
DMEM:Ham's F12 innehåller ett pH-buffert-system och kompletteras ofta med fenolrött, en pH-indikator. Odlade celler i DMEM:Ham's F12, eller i något annat medium som använder bikarbonatbuffertsystemet, kräver en kontrollerad CO2-miljö på 5-10% för att upprätthålla lämpliga pH-nivåer.
Kvalitetskontroll
- Sterilt filtrerad
Förvaring och hållbarhetstid
- Förvaras vid +2°C till +8°C, skyddad från ljus.
- Efter öppnandet, förvara vid 4°C och använd inom 6-8 veckor.
Förhållanden vid leverans
- Omgivande temperatur
Underhåll
- Förvaras i kylskåp vid +2°C till +8°C i mörker. Undvik frysning och frekvent uppvärmning till +37°C, eftersom det försämrar produktkvaliteten.
- Värm inte upp mediet över 37°C och använd inte okontrollerade värmekällor som t.ex. mikrovågsugnar.
- Om endast en del av mediet ska användas, ta ut den mängd som behövs och värm det till rumstemperatur före användning.
Sammansättning
| Kategori | Komponenter | Koncentration (mg/L) |
| Aminosyror | Glycin | 18.75 |
| L-Alanin | 4.45 | |
| L-arginin HCl | 147.50 | |
| L-Asparagin H₂O | 7.50 | |
| L-Asparaginsyra | 6.65 | |
| L-cystein HCl H₂O | 17.56 | |
| L-cystin 2 HCl | 31.29 | |
| L-glutaminsyra | 7.35 | |
| L-glutamin | 365.00 | |
| L-Histidin HCl H₂O | 31.48 | |
| L-Isoleucin | 54.47 | |
| L-Leucin | 59.05 | |
| L-Lysin HCl | 91.25 | |
| L-metionin | 17.24 | |
| L-fenylalanin | 35.48 | |
| L-prolin | 17.25 | |
| L-Serin | 26.25 | |
| L-Threonin | 53.45 | |
| L-tryptofan | 9.02 | |
| L-Tyrosin Dinatriumsalt | 48.10 | |
| L-Valin | 52.85 | |
| Vitaminer | D-Biotin | 0.0035 |
| Kolinklorid | 8.98 | |
| D-kalciumpantotenat | 2.24 | |
| Folsyra | 2.66 | |
| myo-Inositol | 12.60 | |
| Nikotinamid | 2.02 | |
| Pyridoxin HCl | 0.031 | |
| Pyridoxal HCl | 2.00 | |
| Riboflavin | 0.219 | |
| Tiamin HCl | 2.17 | |
| Vitamin B12 | 0.68 | |
| Oorganiska salter | CaCl₂ 2 H₂O | 154.50 |
| CuSO₄ 5 H₂O | 0.0013 | |
| Fe(NO₃)₃ 9 H₂O | 0.05 | |
| FeSO₄ 7 H₂O | 0.417 | |
| KCl | 311.80 | |
| MgCl₂ 6 H₂O | 61.20 | |
| MgSO₄ | 48.84 | |
| NaCl | 6996.00 | |
| NaHCO₃ | 1200.00 | |
| Na₂HPO₄ | 71.02 | |
| NaH₂PO₄ | 54.30 | |
| ZnSO₄ 7 H₂O | 0.432 | |
| Övriga komponenter | D-Glukos | 3151.00 |
| Hypoxantin | 2.40 | |
| HEPES | 3574.50 | |
| Linolsyra | 0.042 | |
| Liponsyra | 0.105 | |
| Fenolrött natriumsalt | 8.63 | |
| Putrescin 2 HCl | 0.081 | |
| Natriumpyruvat | 55.00 | |
| Tymidin | 0.365 |