Medium 199, w: 2,7 mM stabilt glutamin, w: 2,2 g/L NaHCO3, w: EBSS
Medium 199 är ett mångsidigt och välanvänt cellodlingsmedium som är speciellt utformat för odling av primära explantat. Detta omfattande medium kombinerar essentiella vitaminer, aminosyror och andra faktorer för att ge en helt definierad näringskälla för en mängd olika celltyper. Det är särskilt lämpligt för icke-transformerade celler, vilket gör det till ett ovärderligt verktyg för biologisk forskning.
Medium 199 erbjuder en rad olika tillämpningar inom området. Det kan effektivt upprätthålla kumulus-oocytkomplexet (COC) och stödja in vitro-mognaden av oocyter. Dessutom används det för att skölja aspirationskanaler vid insamling av ägg från tyska Holstein-kor. Medium 199 är dessutom ett utmärkt medium för odling av hjärtats endotelceller från råttor. Dessa tillämpningar visar på Medium 199:s mångsidighet och anpassningsförmåga till olika experimentella behov.
Mediets historia
Utvecklingen av Medium 199 på 1950-talet innebar ett betydande framsteg inom vävnadsodlingsmedier. Innan det introducerades var många odlingsmedier beroende av produkter och vävnadsextrakt från djur. Morgan och hans kollegor revolutionerade dock området genom att formulera en helt definierad näringskälla för cellkulturer. Genom sina experiment med olika kombinationer av vitaminer, aminosyror och andra faktorer upptäckte de de exceptionella tillväxtfrämjande egenskaperna hos Medium 199.
Kvalitetskontroll
- pH = 7,2 +/- 0,02 vid 20-25°C.
- Varje parti har testats för sterilitet och frånvaro av mykoplasma och bakterier.
Förvaring
- Förvaras i kylskåp vid +2°C till +8°C i mörker. Frysning och uppvärmning upp till +37°C minimerar produktens kvalitet.
- Värm inte upp mediet till mer än 37° C och använd inte okontrollerbara värmekällor (t.ex. mikrovågsugnar).
- Om endast en del av mediet ska användas, ta ut denna mängd ur flaskan och värm upp den i rumstemperatur.
- Hållbarheten för alla medier utom basmediet är 8 veckor från tillverkningsdatumet.
Sammansättning
| Komponenter | mg/L | |
| Oorganiska salter | Kalciumklorid x 2H2O | 264,92 |
| Järn(III)nitrat x 9H2O | 0,72 | |
| Magnesiumsulfat | 97,67 | |
| Kaliumklorid | 400,00 | |
| Natriumacetat x 3H2O | 82,95 | |
| Natriumklorid | 6,800.00 | |
| Natriumdivätefosfat x H2O | 140,00 | |
| Övriga komponenter | Adeninsulfat | 10,00 |
| AMP | 0,20 | |
| ATP | 1,00 | |
| Kolesterol | 0,20 | |
| 2'-Deoxiribos | 0,50 | |
| D(+)-Glukos vattenfri | 1,000.00 | |
| Glutation (röd) | 0,05 | |
| Guanin x HCl | 0,30 | |
| Hypoxanthin | 0,30 | |
| Fenol röd | 10,00 | |
| D-Ribos | 0,50 | |
| Tymin | 0,30 | |
| Tween 80 | 4,90 | |
| Uracil | 0,30 | |
| Xanthin | 0,30 | |
| NaHCO3 | 2,200.00 | |
| Aminosyror | L-Alanin | 25,00 |
| L-arginin x HCl | 70,00 | |
| L-Asparaginsyra | 30,00 | |
| L-Cystein x HCl x H2O | 0,10 | |
| L-Cystin | 20,00 | |
| L-Glutamin stabil | 149,00 | |
| L-glutaminsyra | 67,00 | |
| Glycin | 50,00 | |
| L-Histidin x HCl x H2O | 21,88 | |
| L-Hydroxyprolin | 10,00 | |
| L-Isoleucin | 20,00 | |
| L-Leucin | 60,00 | |
| L-Lysin x HCl | 70,00 | |
| L-metionin | 15,00 | |
| L-fenylalanin | 25,00 | |
| L-prolin | 40,00 | |
| L-Serin | 25,00 | |
| L-Threonin | 30,00 | |
| L-tryptofan | 10,00 | |
| L-Tyrosin | 40,00 | |
| L-Valin | 25,00 | |
| Vitaminer | 4-Amino bensoesyra | 0,05 |
| Askorbinsyra | 0,05 | |
| D(+)-Biotin | 0,01 | |
| Calciferol | 0,10 | |
| D-kalciumpantotenat | 0,01 | |
| Kolinklorid | 0,50 | |
| Folsyra | 0,01 | |
| myo-Inositol | 0,05 | |
| Menadion | 0,01 | |
| Nikotinsyra | 0.025 | |
| Nikotinamid | 0.025 | |
| Pyridoxal x HCl | 0.025 | |
| Pyridoxol x HCl | 0.025 | |
| Riboflavin | 0,01 | |
| DL-α-tokoferolfosfat dinatriumsalt | 0,01 | |
| Tiamin x HCl | 0,01 | |
| Vitamin A-acetat | 0,14 |