RPMI 1640, med: 2,0 mM stabilt glutamin, med: 2,0 g/L NaHCO3
RPMI 1640 Medium, även känt som RPMI medium, är ett mycket mångsidigt cellodlingsmedium som används inom biologisk forskning för att odla olika däggdjursceller. Mediet utvecklades av George E. Moore, Robert E. Gerner och H. Addison Franklin 1966 vid det berömda Roswell Park Comprehensive Cancer Center och har fått sitt namn från sitt ursprung vid Roswell Park Memorial Institute (RPMI).
RPMI 1640 Medium utformades ursprungligen för att stödja tillväxten av mänskliga leukemiceller i både suspension och monolagerkulturer, men har utvecklats genom modifieringar av forskare och kommersiella leverantörer för att bli lämpligt för ett brett spektrum av däggdjursceller. Det är exceptionellt kompatibelt med cellinjer som HeLa, Jurkat, MCF-7, PC12, PBMC, astrocyter och karcinom.
RPMI 1640 Medium skiljer sig från andra cellodlingsmedier på grund av sin unika sammansättning. Det innehåller en betydande mängd fosfat, aminosyror och vitaminer. Framför allt innehåller det biotin, vitamin B12 och PABA, som saknas i Eagle's Minimal Essential Medium eller Dulbecco's Modified Eagle Medium. Dessutom uppvisar RPMI 1640 Medium signifikant förhöjda koncentrationer av vitaminerna inositol och kolin. Det innehåller dock inte proteiner, lipider eller tillväxtfaktorer. Följaktligen krävs ofta tillsats av 10% fetalt bovint serum (FBS) för att ge optimala förutsättningar för celltillväxt.
Buffringssystemet i RPMI 1640 Medium är beroende av natriumbikarbonat och kräver en 5-10% CO2-miljö för att upprätthålla ett fysiologiskt lämpligt pH. Inkluderingen av reduktionsmedlet glutation skiljer detta medium ytterligare från andra.
Kvalitetskontroll
- Sterilt filtrerad
Förvaring och hållbarhetstid
- Förvaras vid +2°C till +8°C, skyddat från ljus.
- Efter öppnandet, förvara vid 4°C och använd inom 6-8 veckor.
Förhållanden vid leverans
- Omgivande temperatur
Underhåll
- Förvaras i kylskåp vid +2°C till +8°C i mörker. Undvik frysning och frekvent uppvärmning till +37°C, eftersom det försämrar produktkvaliteten.
- Värm inte upp mediet över 37°C och använd inte okontrollerade värmekällor som t.ex. mikrovågsugnar.
- Om endast en del av mediet ska användas, ta ut den mängd som behövs och värm det till rumstemperatur före användning.
Sammansättning
| Kategori | Komponenter | Koncentration (mg/L) |
| Aminosyror | Glycin | 10.00 |
| L-Alanyl-L-Glutamin | 434.40 | |
| L-arginin | 200.00 | |
| L-AsparaginH2O | 56.82 | |
| L-Asparaginsyra | 20.00 | |
| L-kystin 2HCl | 65.20 | |
| L-glutaminsyra | 20.00 | |
| L-Histidin HClH2O | 20.27 | |
| L-hydroxi-L-prolin | 20.00 | |
| L-Isoleucin | 50.00 | |
| L-Leucin | 50.00 | |
| L-Lysin HCl | 40.00 | |
| L-metionin | 15.00 | |
| L-fenylalanin | 15.00 | |
| L-prolin | 20.00 | |
| L-Serin | 30.00 | |
| L-Threonin | 20.00 | |
| L-Tryptofan | 5.00 | |
| L-tyrosin 2Na 2H2O | 28.83 | |
| L-Valin | 20.00 | |
| Vitaminer | p-Amino bensoesyra | 1.00 |
| D-biotin | 0.20 | |
| Kolinklorid | 3.00 | |
| D-kalciumpantotenat | 0.25 | |
| Folsyra | 1.00 | |
| myo-Inositol | 35.00 | |
| Nikotinamid | 1.00 | |
| Pyridoxin HCl | 1.00 | |
| Riboflavin | 0.20 | |
| Tiamin HCl | 1.00 | |
| Vitamin B12 | 0.005 | |
| Oorganiska salter | Ca(NO3)2 4H2O | 100.00 |
| KCl | 400.00 | |
| MgSO4 7H2O | 100.00 | |
| NaCl | 6000.00 | |
| NaHCO3 | 2000.00 | |
| Na2HPO4 | 800.00 | |
| Övriga komponenter | D-Glukos | 2000.00 |
| L-glutation reducerad | 1.00 | |
| Fenolrött natriumsalt | 5.30 |