Bunky HEK293-FAP
5 000,00 €*
Produkty sa dodávajú zmrazené na suchom ľade v kryotrubkách. Každá kryotrubka obsahuje zvyčajne 3 × 10 6 buniek pre adhezívne línie alebo 5 × 106 buniek pre suspenzné línie (podrobnosti nájdete v certifikáte analýzy šarže).
Všeobecné informácie
| Popis | Upozornenie: Zobrazené ceny bunkových línií sú určené výlučne pre neziskových zákazníkov. Ak zastupujete komerčný subjekt, kontaktujte nás, prosím, pre alternatívne ceny. Bunková línia HEK293-FAP je stabilná rekombinantná bunková línia HEK293 vytvorená na expresiu proteínu aktivácie fibroblastov (FAP) na vysokej úrovni, približne 123 000 molekúl na bunku. Táto bunková línia bola vyvinutá pomocou technológie pristávacej podložky spoločnosti inscreenex, ktorá zabezpečuje presnú a reprodukovateľnú integráciu génu FAP na špecifickom, vopred overenom genomickom lokuse. FAP, známa aj ako sepráza alebo DPPIV, je serínová proteáza, ktorá sa podieľa na remodelácii extracelulárnej matrix, čo je obzvlášť dôležité pri procesoch, ako je hojenie rán, oprava tkanív a fibróza. FAP je tiež vysoko regulovaná v stróme mnohých epitelových rakovín, čo z nej robí cenný cieľ pre onkologický výskum a potenciálny biomarker pre fibroblasty spojené s rakovinou. Expresia FAP v tejto bunkovej línii bola potvrdená pomocou prietokovej cytometrie s protilátkou špecifickou pre cieľ, čím sa zabezpečila konzistentná a spoľahlivá hustota receptora v celej bunkovej populácii. |
|---|---|
| Organizmus | Ľudské |
| Tkanivo | Fetálne obličky |
Charakteristika
| Vek | Plod |
|---|---|
| Pohlavie | Ženy |
| Morfológia | Epitelu podobné |
| Rastové vlastnosti | Monovrstva, priliehajúca |
Regulačné údaje
| Citácie | HEK293-FAP (katalógové číslo Cytion 305419) |
|---|---|
| Úroveň biologickej bezpečnosti | 1 |
| NCBI_TaxID | 9606 |
| Status GMO | GMO-S1: Tento derivát HEK293 obsahuje expresný konštrukt fibroblastového aktivačného proteínu (FAP) na štúdie funkcie receptorov. Táto klasifikácia platí len v Nemecku a môže sa líšiť v iných krajinách. |
Biomolekulárne údaje
| Expresia receptorov | FAP (Seprase alebo DPPIV) |
|---|
Spracovanie
| Kultúrne médium | RPMI 1640, w: 2,0 mM stabilný glutamín, w: 2,0 g/L NaHCO3 (číslo výrobku Cytion 820700a) |
|---|---|
| Doplnky | Doplňte médium o 10 % FBS, 1 mM pyruvát sodný, 10 mM HEPES, 1 % NEAA. Pridajte geneticín (G418-Sulfat) na dosiahnutie konečnej koncentrácie 1 mg/ml. |
| Disociačné činidlo | Trypsín-EDTA |
| Subkultivácia | Na bežné adherentné bunkové kultúry: Odstráňte staré kultivačné médium z adherentných buniek a premyte ich PBS, aby ste odstránili zvyšné médium. Po odsatí PBS pridajte príslušný objem roztoku trypsínu/EDTA podľa veľkosti kultivačnej nádoby (napr. 1 ml pre banku T25, 3 ml pre banku T75) a inkubujte pri izbovej teplote alebo 37 °C, kým sa bunky neoddelia (5 - 10 minút). Oddeľovanie sledujte pod mikroskopom a v prípade potreby jemne poklepte na nádobu, aby sa bunky uvoľnili. Po oddelení pridajte kompletné médium na inaktiváciu trypsínu/EDTA, jemne resuspendujte bunky a alikvotnú časť bunkovej suspenzie preneste do novej kultivačnej nádoby obsahujúcej čerstvé médium. Nádobu umiestnite do inkubátora nastaveného na 37 °C s 5 %CO2 a médium vymieňajte každé 2 - 3 dni. |
| Obnova tekutín | 2 až 3-krát týždenne |
| Obnova po rozmrazení | Po rozmrazení rozdeľte bunky v pomere 1:2 až 1:3 do banky T25 a nechajte bunky zotaviť sa z procesu zmrazovania a priľnúť aspoň 24 hodín. Na dosiahnutie čo najlepšieho prichytenia a životaschopnosti buniek po rozmrazení odporúčame na prvé nasadenie po kryozotavení použiť banky alebo platne potiahnuté kolagénom. Na následnú bežnú kultiváciu buniek sa kolagénový povlak nevyžaduje. |
| Zmrazovacie médium | Ako kryokonzervačné médium používame kompletné rastové médium (vrátane FBS) + 10 % DMSO na zabezpečenie primeranej životaschopnosti po rozmrazení alebo CM-1 (katalógové číslo 800100 spoločnosti Cytion), ktoré obsahuje optimalizované osmoprotektanty a metabolické stabilizátory na zlepšenie regenerácie a zníženie stresu spôsobeného kryo. |
| Rozmrazovanie a kultivácia buniek |
|
| Inkubačná atmosféra | 37 °C, 5 %CO2, zvlhčená atmosféra. |
| Povrchová úprava banky | Na dosiahnutie optimálneho uchytenia a životaschopnosti po rozmrazení odporúčame používať banky alebo platne s kolagénom. |
| Postup zmrazovania | Kryokonzervované bunkové línie sa prepravujú na suchom ľade v overených, izolovaných obaloch s dostatočným množstvom chladiva na udržanie teploty približne -78 °C počas celej prepravy. Po prijatí ihneď skontrolujte obal a bezodkladne premiestnite injekčné liekovky do vhodného skladu. |
| Podmienky prepravy | Kryokonzervované bunkové línie sa prepravujú na suchom ľade v overených, izolovaných obaloch s dostatočným množstvom chladiva na udržanie teploty približne -78 °C počas celej prepravy. Po prijatí ihneď skontrolujte obal a bezodkladne premiestnite injekčné liekovky do vhodného skladu. |
| Podmienky skladovania | Na dlhodobé uchovávanie umiestnite injekčné liekovky do kvapalnej fázy dusíka v pare pri teplote približne -150 až -196 °C. Skladovanie pri teplote -80 °C je prijateľné len ako krátky prechodný krok pred presunom do tekutého dusíka. |
Kontrola kvality / Genetický profil / HLA
| Sterilita | Kontaminácia mykoplazmami sa vylučuje pomocou testov založených na PCR a metód detekcie mykoplaziem založených na luminiscencii. Aby sa zabezpečilo, že nedošlo ku kontaminácii baktériami, hubami alebo kvasinkami, bunkové kultúry sa denne vizuálne kontrolujú. |
|---|
Dohoda s treťou stranou
Upozorňujeme, že táto bunková línia nie je dostupná v rámci štandardnej dohody Cytion MTA, pretože si vyžaduje dohodu s treťou stranou a/alebo je predmetom rokovaní s pôvodným poskytovateľom licencie.-
Požadované produkty
Požadované produkty
Mraziace médium CM-1 - 50 mlVarianty kryokonzervačných médií: 50 mlMraziace médium CM-1 spoločnosti Cytion je najmodernejšie kryokonzervačné médium navrhnuté na zabezpečenie najvyššej úrovne životaschopnosti a funkčnosti buniek po rozmrazení. Toto univerzálne médium je vhodné pre široké spektrum typov buniek vrátane ľudských aj živočíšnych buniek, čo z neho robí základný nástroj pre rôzne výskumné aplikácie. Médium Freeze Medium CM-1, ktorého zloženie obsahuje starostlivo vyváženú kombináciu kryoprotektantov a základných živín, minimalizuje tvorbu ľadových kryštálov a bunkový stres počas procesu zmrazovania, čím zachováva bunkovú integritu.
Kľúčové vlastnosti Freeze Medium CM-1 zahŕňajú:
Široká kompatibilita: Účinné pre širokú škálu typov buniek vrátane primárnych buniek, kmeňových buniek a zavedených bunkových línií.
Vysoká životaschopnosť: Optimalizované na maximalizáciu obnovy a životaschopnosti buniek po rozmrazení, čo zaručuje spoľahlivé výsledky experimentov.
Pripravené na použitie: Pohodlne pripravené a sterilizované na okamžité použitie, čo skracuje čas prípravy a znižuje riziko kontaminácie.
Zvýšená stabilita: Zachováva konzistentný výkon za štandardných podmienok kryokonzervácie, čím zabezpečuje reprodukovateľné výsledky.
Dlhá skladovateľnosť: CM-1 je médium na kryokonzerváciu s obsahom séra, pripravené na použitie, ktoré sa môže skladovať v chladničke až jeden rok.
Používanie CM-1 na zmrazovanie buniek
Ak chcete použiť CM-1 na zmrazovanie adherentných aj suspenzných buniek, postupujte podľa nasledujúcich krokov
V prípade adherentných buniek ich umyte a oddeľte od kultivačného substrátu. V prípade suspenzných buniek prejdite priamo na ďalší krok.
Spočítajte bunky, aby ste sa uistili, že majú správnu koncentráciu.
Odstreďte bunky, aby sa z nich vytvorili pelety, a potom ich znovu rozpusťte v zmrazovacom médiu CM-1.
Resuspendované bunky preneste do kryovínií.
Pred prenosom buniek na dlhodobé uskladnenie použite metódu pomalého zmrazovania
Metóda
Popis
Kroky
❄️
Manuálne zmrazenie
Postupná metóda zahŕňajúca postupné znižovanie teploty na zabezpečenie životaschopnosti buniek
1️⃣ Umiestnite bunky do zmrazovacieho média do mrazničky s teplotou 4 °C na 40 minút.
2️⃣ Preneste do mrazničky s teplotou -80 °C na 24 hodín.
3️⃣ Uskladnite bunky v tekutom dusíku na dlhodobé uchovanie
❄️
Používanie pána Frostyho
Praktické zariadenie, ktoré umožňuje kontrolovanú rýchlosť zmrazovania bez elektrickej energie
1️⃣ Pripravte bunky v kryovíniách s mraziacim médiom.
2️⃣ Umiestnite kryovílie do nádoby Mr. Frosty.
3️⃣ Pred prenesením do tekutého dusíka uchovávajte pri teplote -80 °C po dobu 24 hodín
❄️
Mraznička s riadenou rýchlosťou
Vysoko presná mraznička od spoločnosti Thermo Fisher alebo iných výrobcov určená na riadené znižovanie teploty
1️⃣ Naprogramujte zariadenie na postupné znižovanie teploty.
2️⃣ Umiestnite pripravené bunky do mrazničky.
3️⃣ Po skončení zmrazovacieho cyklu preneste bunky do tekutého dusíka
Kryovílie skladujte pri teplote nižšej ako -130 °C alebo v tekutom dusíku na dlhodobé uchovávanie.
Zloženie
Obsahuje FBS, DMSO, glukózu, soli
Pufrovacia kapacita: pH = 7,2 až 7,6
Mraziace médium CM-1 spoločnosti Cytion ponúka spoľahlivé riešenie na kryokonzerváciu, ktoré zabezpečuje vysokú životaschopnosť a funkčnosť buniek po rozmrazení pre širokú škálu výskumných aplikácií.59,00 €*RPMI 1640, w: 2,0 mM stabilný glutamín, w: 2,0 g/l NaHCO3Médium RPMI 1640, známe aj ako médium RPMI, je veľmi univerzálne médium na kultiváciu buniek, ktoré sa široko využíva v biologickom výskume na kultiváciu rôznych buniek cicavcov. Toto médium, ktoré vyvinuli George E. Moore, Robert E. Gerner a H. Addison Franklin v roku 1966 v známom Roswell Park Comprehensive Cancer Center, získalo svoj názov podľa svojho pôvodu v Roswell Park Memorial Institute (RPMI).
Médium RPMI 1640, ktoré bolo pôvodne navrhnuté na podporu rastu ľudských leukemických buniek v suspenzných aj monovrstvových kultúrach, sa modifikáciami výskumníkov a komerčných dodávateľov vyvinulo tak, aby bolo vhodné pre rôzne druhy buniek cicavcov. Je výnimočne kompatibilné s bunkovými líniami, ako sú HeLa, Jurkat, MCF-7, PC12, PBMC, astrocyty a karcinómy.
Médium RPMI 1640 sa odlišuje od ostatných médií na kultiváciu buniek vďaka svojmu jedinečnému zloženiu. Obsahuje značné množstvo fosfátov, aminokyselín a vitamínov. Najmä obsahuje biotín, vitamín B12 a PABA, ktoré sa v Eagle's Minimal Essential Medium alebo Dulbecco's Modified Eagle Medium nenachádzajú. Okrem toho RPMI 1640 Medium vykazuje výrazne zvýšené koncentrácie vitamínov inozitolu a cholínu. Neobsahuje však proteíny, lipidy ani rastové faktory. V dôsledku toho sa na zabezpečenie optimálnych podmienok pre rast buniek bežne vyžaduje doplnenie 10 % fetálneho hovädzieho séra (FBS).
Pufrovací systém média RPMI 1640 sa spolieha na hydrogenuhličitan sodný a na udržanie fyziologicky vhodného pH si vyžaduje 5
- 10 % CO2. Zahrnutie redukčného činidla glutatiónu ďalej odlišuje toto médium od ostatných.
Kontrola kvality
Sterilne filtrované
Skladovanie a trvanlivosť
Skladujte pri teplote +2 °C až +8 °C, chránené pred svetlom.
Po otvorení skladujte pri teplote 4 °C a spotrebujte do 6 až 8 týždňov.
Podmienky prepravy
Okolitá teplota
Údržba
Uchovávajte v chlade pri teplote +2°C až +8°C v tme. Vyhnite sa zmrazovaniu a častému zahrievaniu na +37 °C, pretože sa tým znižuje kvalita výrobku.
Neohrievajte médium na teplotu vyššiu ako 37 °C a nepoužívajte nekontrolované zdroje tepla, ako sú mikrovlnné zariadenia.
Ak sa má použiť len časť média, odoberte požadované množstvo a pred použitím ho zohrejte na izbovú teplotu.
Zloženie
Kategória
Zložky
Koncentrácia (mg/l)
Aminokyseliny
Glycín
10.00
L-alanyl-L-glutamín
434.40
L-arginín
200.00
L-asparagínH2O
56.82
Kyselina L-aspartová
20.00
L-cystín 2HCl
65.20
Kyselina L-glutámová
20.00
L-histidín HClH2O
20.27
L-Hydroxy-L-Prolín
20.00
L-izoleucín
50.00
L-leucín
50.00
L-Lyzín HCl
40.00
L-metionín
15.00
L-fenylalanín
15.00
L-Prolín
20.00
L-serín
30.00
L-Treonín
20.00
L-tryptofán
5.00
L-Tyrozín 2Na 2H2O
28.83
L-Valín
20.00
Vitamíny
kyselina p-aminobenzoová
1.00
D-Biotín
0.20
Cholín chlorid
3.00
D-pantotenát vápenatý
0.25
Kyselina listová
1.00
myo-Inozitol
35.00
Nikotínamid
1.00
Pyridoxín HCl
1.00
Riboflavín
0.20
Tiamín HCl
1.00
Vitamín B12
0.005
Anorganické soli
Ca(NO3)2 4H2O
100.00
KCl
400.00
MgSO4 7H2O
100.00
NaCl
6000.00
NaHCO3
2000.00
Na2HPO4
800.00
Ostatné zložky
D-glukóza
2000.00
L-Glutatión redukovaný
1.00
Fenolová červená sodná soľ
5.3025,00 €*AccutaseVarianty: 100 mlReagent na disociáciu buniek Accutase
- šetrná alternatíva trypsínu
Accutase je roztok na oddeľovanie buniek, ktorý spôsobuje revolúciu v odvetví bunkových kultúr. Je to zmes proteolytických a kolagenolických enzýmov, ktorá napodobňuje účinok trypsínu a kolagenázy. Na rozdiel od trypsínu Accutase neobsahuje žiadne cicavčie ani bakteriálne zložky a je oveľa šetrnejší k bunkám, čo z neho robí ideálny roztok na rutinné oddeľovanie buniek od štandardného plastového riadu na kultiváciu tkanív a plastového riadu s adhéznym povlakom. V tomto príspevku na blogu sa budeme venovať výhodám a použitiu Accutase a tomu, ako mení pravidlá hry v oblasti bunkových kultúr.
Výhody Accutase
Accutase má oproti tradičným roztokom trypsínu niekoľko výhod. Po prvé, možno ju použiť vždy, keď je potrebné jemné a účinné oddelenie akejkoľvek adherentnej bunkovej línie, čím priamo nahrádza trypsín. Po druhé, Accutase funguje veľmi dobre na embryonálnych a neurónových kmeňových bunkách a bolo preukázané, že zachováva životaschopnosť týchto buniek po pasážovaní. Po tretie, Accutase zachováva väčšinu epitopov pre následnú analýzu prietokovou cytometriou, takže je ideálna na analýzu markerov bunkového povrchu.
Okrem toho sa Accutase nemusí neutralizovať pri pasážovaní adherentných buniek. Pridaním väčšieho množstva média po rozdelení buniek sa Accutase zriedi, takže už nie je schopná oddeliť bunky. Tým sa eliminuje potreba inaktivácie a šetrí sa čas technikov bunkových kultúr. A nakoniec, Accutase sa nemusí alikvótovať a fľaša je stabilná v chladničke 2 mesiace.
Aplikácie Accutase
Accutase je priamou náhradou roztoku trypsínu a môže sa použiť na pasážovanie bunkových línií. Okrem toho sa Accutase dobre osvedčuje pri oddeľovaní buniek na analýzu mnohých povrchových markerov buniek pomocou prietokovej cytometrie a na triedenie buniek. Medzi ďalšie následné aplikácie ošetrenia Accutase patrí analýza povrchových markerov buniek, test rastu vírusov, proliferácia buniek, testy migrácie nádorových buniek, rutinné pasážovanie buniek, zväčšovanie výroby (bioreaktor) a prietoková cytometria.
Zloženie Accutase
Accutase neobsahuje žiadne cicavčie ani bakteriálne zložky a je zmesou prírodných enzýmov s proteolytickou a kolagenolytickou enzýmovou aktivitou. Je formulovaná v oveľa nižšej koncentrácii ako trypsín a kolagenáza, takže je menej toxická a šetrnejšia, ale rovnako účinná.
Účinnosť Accutase
Ukázalo sa, že Accutase je účinná pri oddeľovaní primárnych a kmeňových buniek a udržiavaní vysokej životaschopnosti buniek v porovnaní s enzýmami živočíšneho pôvodu, ako je trypsín. po 10 minútach sa obnoví 100 % buniek a vďaka autodigescii Accutase nie je na škodu ponechať bunky v Accutase až 45 minút.
Zhrnutie
Na záver možno povedať, že Accutase je výkonné riešenie, ktoré mení pravidlá hry v oblasti bunkových kultúr. Vďaka svojej šetrnosti, účinnosti a všestrannosti je Accutase ideálnou alternatívou trypsínu. Ak hľadáte spoľahlivé a účinné riešenie na oddeľovanie buniek, Accutase je riešenie pre vás.75,00 €*Roztok antibiotík/antimykotík (100x)Prehľad produktov
Objem: 100 ml Skladovanie: ≤-15 °C Sterilita: Sterilná filtrácia
Roztok antibiotík/antimykotík (100x ) je sterilný koncentrát pripravený na použitie určený na zníženie rizika mikrobiálnej kontaminácie v bunkových kultúrach a súvisiacich laboratórnych aplikáciách. Tento 100x roztok obsahuje osvedčenú kombináciu penicilínu, streptomycínu a amfotericínu B, ktorá poskytuje široké spektrum antimikrobiálnej aktivity proti grampozitívnym a gramnegatívnym baktériám, kvasinkám a vláknitým hubám. Prípravok je vhodný na použitie v kultúrach eukaryotických buniek, bakteriálnych médiách a iných systémoch citlivých na kontamináciu, čím podporuje čistú a konzistentnú laboratórnu prevádzku.
Použitie a výhody Tento roztok optimalizovaný pre bežné výskumné protokoly sa široko používa na udržiavanie aseptických podmienok v pracovných postupoch bunkových kultúr. Ponúka spoľahlivý výkon v prostrediach citlivých na kontamináciu, čím pomáha výskumníkom znížiť riziko nadmerného rastu mikroorganizmov bez toho, aby bolo ohrozené zdravie buniek alebo reprodukovateľnosť experimentov. Sterilne filtrované zloženie eliminuje potrebu ďalších krokov solubilizácie, čím podporuje zjednodušenú prípravu médií a znižuje variabilitu každodenných laboratórnych postupov.
Použitie a kompatibilita Na dosiahnutie štandardných pracovných koncentrácií roztok zrieďte v pomere 1:100 do kompletného kultivačného média. Produkt je kompatibilný so širokou škálou bunkových línií cicavcov a základných médií. Vďaka stálej dostupnosti zásob môžu výskumní pracovníci využívať výhody spoľahlivej kontinuity dodávok a zjednodušeného plánovania logistiky. Roztok by sa mal skladovať pri teplote ≤ -15 °C a chrániť pred opakovanými cyklami zmrazovania a rozmrazovania, aby sa zachovala jeho stabilita. Len na výskumné účely. Nie je určený na použitie pri diagnostických alebo terapeutických postupoch. Nie je určený na použitie u ľudí alebo zvierat.45,00 €*PBSRoztok fosfátového tlmivého roztoku (PBS)
Fyziologický roztok s fosfátovým pufrom (PBS) je široko používaný tlmivý roztok v biologickom a chemickom výskume. Zohráva kľúčovú úlohu pri udržiavaní rovnováhy pH a osmolarity počas rôznych experimentálnych postupov vrátane spracovania tkanív a bunkových kultúr. Náš roztok PBS je starostlivo pripravený z vysoko čistých zložiek, aby sa zabezpečila stabilita a spoľahlivosť pri každom experimente. Osmolarita a koncentrácie iónov nášho roztoku PBS presne kopírujú koncentrácie v ľudskom tele, takže je izotonický a netoxický pre väčšinu buniek.
Zloženie nášho roztoku PBS
Náš roztok PBS je zmesou fosfátových pufrov a fyziologických roztokov ultračistej kvality s upraveným pH. V 1X pracovnej koncentrácii obsahuje:
8000 mg/l chloridu sodného (NaCl)
200 mg/L chlorid draselný (KCl)
1150 mg/L fosforečnan sodný dvojzložkový bezvodý (Na2HPO4)
200 mg/L Fosforečnan draselný jednozložkový bezvodý (KH2PO4)
Toto zloženie zabezpečuje optimálne pH a iónovú rovnováhu, vhodné pre širokú škálu biologických aplikácií.
Aplikácie nášho roztoku PBS
Náš roztok PBS je ideálny na rôzne aplikácie v biologickom výskume. Vďaka svojim izotonickým a netoxickým vlastnostiam je vhodný na riedenie látok a oplachovanie bunkových nádob. Roztoky PBS obsahujúce EDTA sú účinné na uvoľnenie prichytených a zhlukovaných buniek. Do PBS by sa však nemali pridávať dvojmocné kovy, ako napríklad zinok, pretože môžu spôsobiť zrážanie. V takýchto prípadoch sa odporúčajú Goodove pufre. Okrem toho je náš roztok PBS prijateľnou alternatívou vírusového transportného média na transport a skladovanie RNA vírusov vrátane SARS-CoV-2.
Kontrola kvality
Sterilne filtrované
Skladovanie a trvanlivosť
Skladujte pri teplote +2 °C až +25 °C, chránené pred svetlom.
Po otvorení skladujte pri teplote 2 °C až 25 °C a spotrebujte do 24 mesiacov.
Podmienky prepravy
Okolitá teplota
Údržba
Uchovávajte v chlade pri teplote +2°C až +8°C v tme. Vyhnite sa zmrazovaniu a častému zohrievaniu na +37 °C, pretože sa tým znižuje kvalita výrobku.
Neohrievajte médium na teplotu vyššiu ako 37 °C ani nepoužívajte nekontrolované zdroje tepla, napríklad mikrovlnné zariadenia.
Ak sa má použiť len časť média, odoberte požadované množstvo a pred použitím ho zohrejte na izbovú teplotu.
Zloženie
Kategória
Zložky
Koncentrácia (mg/l)
Soli
Chlorid draselný
200
Fosforečnan draselný monobázický bezvodý
200
Chlorid sodný
8000
Fosforečnan sodný dvojzložkový bezvodý
115020,00 €* -
Súvisiace produkty
Súvisiace produkty