DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/L Glukose, w: 2,5 mM L-Glutamin, w: 15 mM HEPES, w: 0,5 mM Natriumpyruvat, w: 1,2 g/L NaHCO3
DMEM:Ham's F12 er et bredt anerkendt og meget anvendt basalmedium i cellekultur til biologisk forskning. Det fungerer som en grundlæggende kilde til næringsstoffer til vækst af forskellige cellelinjer fra pattedyr, især når det suppleres med føtalt bovint serum (FBS).
Denne unikke formulering kombinerer Dulbecco's Modified Eagle Medium (DMEM) og Ham's F-12 (Ham's Nutrient Mixture F-12) i et præcist forhold på 1:1. Tilsætningen af L-glutamin forbedrer sammensætningen yderligere.
DMEM, der stammer fra Eagle's Minimal Essential Medium (EMEM), giver en øget koncentration af aminosyrer og vitaminer sammenlignet med sin forgænger. I modsætning hertil er Ham's F-12 baseret på Ham's F-10 medium, hvilket giver et supplerende sæt af essentielle komponenter.
For at understøtte optimal cellevækst er det almindelig praksis at supplere DMEM:Ham's F12 med FBS i en typisk koncentration på 5-10 %. Denne tilsætning er nødvendig, da mediet mangler væksthormoner, lipider og proteiner, der er afgørende for cellernes udvikling.
DMEM:Ham's F12 indeholder et pH-buffersystem og suppleres ofte med fenolrødt, en pH-indikator. Celler, der dyrkes i DMEM:Ham's F12 eller et hvilket som helst medium, der anvender bikarbonatbuffersystemet, kræver et kontrolleret CO2-miljø på 5-10 % for at opretholde et passende pH-niveau.
Kvalitetskontrol
- Sterilt filtreret
Opbevaring og holdbarhed
- Opbevares ved +2°C til +8°C, beskyttet mod lys.
- Når den er åbnet, skal den opbevares ved 4 °C og bruges inden for 6-8 uger.
Betingelser for forsendelse
- Omgivelsestemperatur
Vedligeholdelse
- Opbevares på køl ved +2 °C til +8 °C i mørke. Undgå frysning og hyppig opvarmning til +37 °C, da det forringer produktkvaliteten.
- Opvarm ikke mediet til mere end 37 °C, og brug ikke ukontrollerede varmekilder som f.eks. mikrobølgeovne.
- Hvis kun en del af mediet skal bruges, skal du fjerne den nødvendige mængde og varme den op til stuetemperatur før brug.
Sammensætning
| Kategori | Komponenter | Koncentration (mg/L) |
| Aminosyrer | Glycin | 18.75 |
| L-Alanin | 4.45 | |
| L-arginin HCl | 147.50 | |
| L-Asparagin H₂O | 7.50 | |
| L-Asparaginsyre | 6.65 | |
| L-cystein HCl H₂O | 17.56 | |
| L-Cystin 2 HCl | 31.29 | |
| L-glutaminsyre | 7.35 | |
| L-Glutamin | 365.00 | |
| L-Histidin HCl H₂O | 31.48 | |
| L-Isoleucin | 54.47 | |
| L-Leucin | 59.05 | |
| L-Lysin HCl | 91.25 | |
| L-Methionin | 17.24 | |
| L-Phenylalanin | 35.48 | |
| L-Prolin | 17.25 | |
| L-Serin | 26.25 | |
| L-Threonin | 53.45 | |
| L-Tryptofan | 9.02 | |
| L-tyrosin dinatriumsalt | 48.10 | |
| L-Valin | 52.85 | |
| Vitaminer | D-Biotin | 0.0035 |
| Cholinklorid | 8.98 | |
| D-Calcium Pantothenat | 2.24 | |
| Folinsyre | 2.66 | |
| myo-Inositol | 12.60 | |
| Nikotinamid | 2.02 | |
| Pyridoxin HCl | 0.031 | |
| Pyridoxal HCl | 2.00 | |
| Riboflavin | 0.219 | |
| Thiamine HCl | 2.17 | |
| Vitamin B12 | 0.68 | |
| Uorganiske salte | CaCl₂ 2 H₂O | 154.50 |
| CuSO₄ 5 H₂O | 0.0013 | |
| Fe(NO₃)₃ 9 H₂O | 0.05 | |
| FeSO₄ 7 H₂O | 0.417 | |
| KCl | 311.80 | |
| MgCl₂ 6 H₂O | 61.20 | |
| MgSO₄ | 48.84 | |
| NaCl | 6996.00 | |
| NaHCO₃ | 1200.00 | |
| Na₂HPO₄ | 71.02 | |
| NaH₂PO₄ | 54.30 | |
| ZnSO₄ 7 H₂O | 0.432 | |
| Andre komponenter | D-Glucose | 3151.00 |
| Hypoxanthin | 2.40 | |
| HEPES | 3574.50 | |
| Linolsyre | 0.042 | |
| Lipoic Acid | 0.105 | |
| Phenol Red Sodium Salt | 8.63 | |
| Putrescin 2 HCl | 0.081 | |
| Sodium Pyruvate | 55.00 | |
| Thymidin | 0.365 |