NIH-3T3-celler

Cytions frysemedium CM-1 er et toppmoderne kryopreserveringsmedium som er utviklet for å sikre det høyeste nivået av cellelevedyktighet og funksjonalitet etter opptining. Dette allsidige mediet er egnet for et bredt spekter av celletyper, inkludert både humane og animalske celler, noe som gjør det til et viktig verktøy for ulike forskningsapplikasjoner. Freeze Medium CM-1 er formulert med en nøye balansert kombinasjon av kryobeskyttende midler og essensielle næringsstoffer, og minimerer dannelsen av iskrystaller og cellestress under fryseprosessen, slik at cellenes integritet bevares.
De viktigste egenskapene til Freeze Medium CM-1 inkluderer

Bred kompatibilitet: Effektivt for et bredt spekter av celletyper, inkludert primærceller, stamceller og etablerte cellelinjer.
Høy levedyktighet: Optimalisert for å maksimere cellegjenvinning og levedyktighet etter opptining, noe som sikrer pålitelige eksperimentelle resultater.
Klar til bruk: Praktisk tilberedt og sterilisert for umiddelbar bruk, noe som reduserer forberedelsestiden og risikoen for kontaminering.
Forbedret stabilitet: Opprettholder konsistent ytelse under standard kryopreserveringsforhold, noe som sikrer reproduserbare resultater.
Lang holdbarhet: CM-1 er et serumholdig kryopreserveringsmedium som er klart til bruk, og som kan oppbevares i kjøleskapet i opptil ett år.


Bruk av CM-1 til nedfrysing av celler

Følg disse trinnene for å bruke CM-1 til nedfrysing av både adherente celler og suspensjonsceller

For adherente celler, vask og dissosier dem fra kultursubstratet. For suspensjonsceller går du direkte til neste trinn.
Tell cellene for å sikre at de har riktig konsentrasjon.
Sentrifuger cellene for å pelleter dem, og resuspender dem deretter i CM-1-frysemedium.
Overfør de resuspenderte cellene til kryovialer.
Bruk en langsom nedfrysingsmetode før du overfører cellene til langtidslagring





Metode
Beskrivelse
Trinn





❄️
Manuell frysing

En trinnvis metode som innebærer gradvis reduksjon av temperaturen for å sikre cellenes levedyktighet

1️⃣ Plasser celler i frysemedium i en fryser på 4 °C i 40 minutter.
2️⃣ Overfør til en fryser på -80 °C i 24 timer.
3️⃣ Oppbevar cellene i flytende nitrogen for langtidsoppbevaring



❄️
Bruk av Mr. Frosty

Et praktisk apparat som gjør det mulig å kontrollere frysehastigheten uten elektrisk strøm

1️⃣ Klargjør celler i kryovialer med frysemedium.
2️⃣ Plasser kryovialene i Mr. Frosty-beholderen.
3️⃣ Oppbevares ved -80 °C i 24 timer før de overføres til flytende nitrogen



❄️
Fryser med kontrollert hastighet

En høypresisjonsfryser fra Thermo Fisher eller andre produsenter som er utviklet for kontrollert temperaturreduksjon

1️⃣ Programmer enheten til å senke temperaturen gradvis.
2️⃣ Plasser de forberedte cellene i fryseren.
3️⃣ Etter frysesyklusen overføres cellene til flytende nitrogen









Oppbevar kryovialene ved temperaturer under -130 °C eller i flytende nitrogen for langtidsoppbevaring.


Ingredienser

Inneholder FBS, DMSO, glukose, salter
Bufferkapasitet: pH = 7,2 til 7,6


Cytions frysemedium CM-1 er en pålitelig løsning for kryopreservering som sikrer høy cellelevedyktighet og funksjonalitet etter opptining for et bredt spekter av forskningsapplikasjoner.

DMEM:Ham's F12 er et anerkjent og mye brukt basalmedium i cellekulturer for biologisk forskning. Det fungerer som en grunnleggende næringskilde for vekst av ulike cellelinjer fra pattedyr, særlig når det er supplert med Fetal Bovine Serum (FBS).

Denne unike formuleringen kombinerer Dulbecco's Modified Eagle Medium (DMEM) og Ham's F-12 (Ham's Nutrient Mixture F-12) i et nøyaktig 1:1-forhold. Sammensetningen er ytterligere forbedret ved tilsetning av L-glutamin.

DMEM, som er avledet fra Eagle's Minimal Essential Medium (EMEM), har en høyere konsentrasjon av aminosyrer og vitaminer enn forgjengeren. Ham's F-12 er derimot basert på Ham's F-10 medium, og gir et komplementært sett med essensielle komponenter.

For å støtte optimal cellevekst er det vanlig praksis å supplere DMEM:Ham's F12 med FBS i en typisk konsentrasjon på 5-10 %. Dette er nødvendig fordi mediet mangler veksthormoner, lipider og proteiner som er avgjørende for cellenes utvikling.

DMEM:Ham's F12 inneholder et pH-buffersystem og tilsettes ofte fenolrødt, som er en pH-indikator. Celler som dyrkes i DMEM:Ham's F12, eller i et hvilket som helst medium som bruker bikarbonatbuffersystemet, krever et kontrollert CO2-miljø på 5-10 % for å opprettholde passende pH-nivåer.


Kvalitetskontroll

Sterilfiltrert


Oppbevaring og holdbarhet

Oppbevares ved +2 °C til +8 °C, beskyttet mot lys.
Etter åpning, oppbevares ved 4 °C og brukes innen 6-8 uker.


Transportforhold

Omgivelsestemperatur


Vedlikehold

Oppbevares i kjøleskap ved +2 °C til +8 °C i mørke. Unngå frysing og hyppig oppvarming til +37 °C, da det reduserer produktkvaliteten.
Ikke varm opp mediet til mer enn 37 °C eller bruk ukontrollerte varmekilder som mikrobølgeovner.
Hvis bare en del av mediet skal brukes, ta ut den nødvendige mengden og varm den opp til romtemperatur før bruk.


Sammensetning



Kategori
Komponenter
Konsentrasjon (mg/L)


Aminosyrer
Glysin
18.75


L-Alanin
4.45


L-arginin HCl
147.50


L-asparagin H₂O
7.50


L-asparaginsyre
6.65


L-cystein HCl H₂O
17.56


L-Cystin 2 HCl
31.29


L-glutaminsyre
7.35


L-glutamin
365.00


L-Histidin HCl H₂O
31.48


L-isoleucin
54.47


L-Leucin
59.05


L-Lysin HCl
91.25


L-metionin
17.24


L-fenylalanin
35.48


L-prolin
17.25


L-Serin
26.25


L-Threonin
53.45


L-Tryptofan
9.02


L-Tyrosin Dinatriumsalt
48.10


L-Valin
52.85


Vitaminer
D-Biotin
0.0035


Kolinklorid
8.98


D-kalsiumpantotenat
2.24


Folsyre
2.66


myo-Inositol
12.60


Nikotinamid
2.02


Pyridoksin HCl
0.031


Pyridoksal HCl
2.00


Riboflavin
0.219


Tiamin HCl
2.17


Vitamin B12
0.68


Uorganiske salter
CaCl₂ 2 H₂O
154.50



CuSO₄ 5 H₂O
0.0013



Fe(NO₃)₃ 9 H₂O
0.05



FeSO₄ 7 H₂O
0.417



KCl
311.80



MgCl₂ 6 H₂O
61.20



MgSO₄
48.84



NaCl
6996.00



NaHCO₃
1200.00



Na₂HPO₄
71.02



NaH₂PO₄
54.30



ZnSO₄ 7 H₂O
0.432


Andre komponenter
D-Glukose
3151.00


Hypoksantin
2.40


HEPES
3574.50


Linolsyre
0.042


Liposyre
0.105


Fenolrødt natriumsalt
8.63


Putrescin 2 HCl
0.081


Natriumpyruvat
55.00


Tymidin
0.365

Accutase Cell Dissociation Reagent
- et skånsomt alternativ til Trypsin
Accutase er en celledissosiasjonsløsning som revolusjonerer cellekulturindustrien. Det er en blanding av proteolytiske og kollagenolytiske enzymer som etterligner virkningen av trypsin og kollagenase. I motsetning til trypsin inneholder Accutase ingen pattedyr
- eller bakteriekomponenter og er mye mer skånsom mot cellene, noe som gjør den til en ideell løsning for rutinemessig løsgjøring av celler fra standard vevskulturplast og adhesjonsbelagt plast. I dette blogginnlegget skal vi se nærmere på fordelene og bruksområdene til Accutase, og hvordan det endrer spillet innen cellekultur.
Fordeler med Accutase
Accutase har flere fordeler sammenlignet med tradisjonelle trypsinløsninger. For det første kan den brukes når det er behov for skånsom og effektiv løsgjøring av en hvilken som helst adherente cellelinje, noe som gjør den til en direkte erstatning for trypsin. For det andre fungerer Accutase svært godt på embryonale og nevronale stamceller, og det har vist seg at den opprettholder levedyktigheten til disse cellene etter passering. For det tredje bevarer Accutase de fleste epitoper for påfølgende flowcytometrianalyse, noe som gjør den ideell for analyse av celleoverflatemarkører.
I tillegg trenger ikke Accutase å nøytraliseres ved passering av adherente celler. Ved å tilsette mer media etter at cellene er delt, fortynnes Accutase slik at den ikke lenger er i stand til å løsrive celler. Dette eliminerer behovet for et inaktiveringstrinn og sparer tid for cellekulturteknikerne. Accutase trenger heller ikke å alikvoteres, og en flaske er stabil i kjøleskapet i to måneder.
Bruksområder for Accutase
Accutase er en direkte erstatning for trypsinløsning og kan brukes til passering av cellelinjer. I tillegg fungerer Accutase godt når celler skal løsnes for analyse av mange celleoverflatemarkører ved hjelp av flowcytometri og for cellesortering. Andre nedstrøms bruksområder for Accutase-behandling omfatter analyse av celleoverflatemarkører, virusvekstanalyse, celleproliferasjon, tumorcellemigrasjonsanalyser, rutinemessig cellepassasje, produksjonsoppskalering (bioreaktor) og strømningscytometri.
Sammensetning av Accutase
Accutase inneholder ingen pattedyr
- eller bakteriekomponenter og er en naturlig enzymblanding med proteolytisk og kollagenolytisk enzymaktivitet. Den er formulert i en mye lavere konsentrasjon enn trypsin og kollagenase, noe som gjør den mindre giftig og mer skånsom, men like effektiv.
Effektiviteten til Accutase
Accutase har vist seg å være effektivt når det gjelder å løsrive primær
- og stamceller og opprettholde høy cellelevedyktighet sammenlignet med enzymer av animalsk opprinnelse, som trypsin. 100 % av cellene gjenvinnes etter 10 minutter, og det er ikke farlig å la cellene ligge i Accutase i opptil 45 minutter, takket være Accutases autodigestion.
Oppsummering
Konklusjonen er at Accutase er en kraftfull løsning som er i ferd med å endre spillereglene for cellekultur. Med sin skånsomme natur, effektivitet og allsidighet er Accutase det ideelle alternativet til trypsin. Hvis du er på utkikk etter en pålitelig og effektiv løsning for celledelingen, er Accutase løsningen for deg.

Produktoversikt
Volum: 100 ml Oppbevaring: ≤-15 °C Sterilitet: Sterilfiltrert
Antibiotic/Antimycotic Solution (100x) er et sterilt, bruksklart konsentrat som er utviklet for å redusere risikoen for mikrobiell kontaminering i cellekulturer og relaterte laboratorieapplikasjoner. Denne 100x-løsningen inneholder en veletablert kombinasjon av penicillin, streptomycin og amfotericin B, som gir bredspektret antimikrobiell aktivitet mot grampositive og gramnegative bakterier, gjærsopp og filamentøse sopper. Formuleringen er egnet for bruk i eukaryote cellekulturer, bakteriemedier og andre systemer som er følsomme for kontaminering, og støtter rene og konsekvente laboratorieoperasjoner.
Anvendelse og fordeler Denne løsningen er optimalisert for rutinemessige forskningsprotokoller og brukes i stor utstrekning for å opprettholde aseptiske forhold i arbeidsflyter for cellekulturer. Den gir pålitelig ytelse i kontamineringssensitive miljøer, og hjelper forskere med å redusere risikoen for mikrobiell overvekst uten at det går på bekostning av cellenes helse eller eksperimentell reproduserbarhet. Den sterilfiltrerte formuleringen eliminerer behovet for ytterligere solubiliseringstrinn, noe som bidrar til strømlinjeformet tilberedning av medier og reduserer variabiliteten i daglige laboratorieprosedyrer.
Bruk og kompatibilitet For å oppnå standard arbeidskonsentrasjoner fortynner du løsningen 1:100 i ditt komplette dyrkingsmedium. Produktet er kompatibelt med et bredt spekter av pattedyrcellelinjer og basalmedier. Med konsekvent lagertilgjengelighet kan forskere dra nytte av pålitelig forsyningskontinuitet og forenklet logistikkplanlegging. Løsningen skal oppbevares ved ≤ -15 °C og beskyttes mot gjentatte fryse-tine-sykluser for å opprettholde stabiliteten. Kun til forskningsbruk. Ikke til bruk i diagnostiske eller terapeutiske prosedyrer. Ikke til bruk på mennesker eller dyr.

Fosfatbufret saltvannsløsning (PBS)
Fosfatbufret saltvann (PBS) er en mye brukt bufferløsning i biologisk og kjemisk forskning. Den spiller en avgjørende rolle når det gjelder å opprettholde pH-balansen og osmolariteten under ulike eksperimentelle prosedyrer, inkludert vevsprosessering og cellekultur. Vår PBS-løsning er omhyggelig formulert med ingredienser av høy renhet for å sikre stabilitet og pålitelighet i hvert eneste eksperiment. Osmolariteten og ionekonsentrasjonene i PBS-løsningen vår etterligner i stor grad de som finnes i menneskekroppen, noe som gjør den isotonisk og ugiftig for de fleste celler.

Sammensetningen av vår PBS-løsning
Vår PBS-løsning er en pH-justert blanding av ultrarene fosfatbuffere og saltvannsløsninger. Ved en 1X arbeidskonsentrasjon inneholder den

8000 mg/L natriumklorid (NaCl)
200 mg/L kaliumklorid (KCl)
1150 mg/L vannfritt dibasisk natriumfosfat (Na2HPO4)
200 mg/L Vannfritt kaliumfosfat monobasisk (KH2PO4)

Denne sammensetningen sikrer en optimal pH
- og ionebalanse, og er egnet for et bredt spekter av biologiske anvendelser.

Bruksområder for vår PBS-løsning
Vår PBS-løsning er ideell for ulike bruksområder innen biologisk forskning. De isotone og giftfrie egenskapene gjør den egnet til fortynning av substanser og skylling av cellebeholdere. PBS-løsninger som inneholder EDTA, er effektive for å løsne celler som sitter fast og klumper seg sammen. PBS bør imidlertid ikke tilsettes toverdige metaller som sink, da dette kan føre til utfelling. I slike tilfeller anbefales Good's buffere. I tillegg er vår PBS-løsning et akseptabelt alternativ til viralt transportmedium for transport og lagring av RNA-virus, inkludert SARS-CoV-2.

Kvalitetskontroll

Sterilfiltrert


Oppbevaring og holdbarhet

Oppbevares ved +2 °C til +25 °C, beskyttet mot lys.
Etter åpning, oppbevares ved 2 °C til 25 °C og brukes innen 24 måneder.


Transportforhold

Omgivelsestemperatur


Vedlikehold

Oppbevares i kjøleskap ved +2 °C til +8 °C i mørke. Unngå frysing og hyppig oppvarming til +37 °C, da det reduserer produktkvaliteten.
Ikke varm opp mediet til mer enn 37 °C eller bruk ukontrollerte varmekilder som mikrobølgeovner.
Hvis bare en del av mediet skal brukes, ta ut den nødvendige mengden og varm den opp til romtemperatur før bruk.

Sammensetning



Kategori
Komponenter
Konsentrasjon (mg/L)


Salter
Kaliumklorid
200



Kaliumfosfat, vannfritt, monobasisk
200



Natriumklorid
8000



Natriumfosfat, vannfritt, dibasisk
1150

Organisme	Rotte
Vev	Hjerte, myokard

Organisme	Rotte
Vev	Skjelettmuskulatur

Organisme	Mus
Vev	Muskel