Células HEK293T

O Freeze Medium CM-1 da Cytion é um meio de criopreservação de última geração concebido para garantir o mais alto nível de viabilidade e funcionalidade celular após o descongelamento. Este meio versátil é adequado para um amplo espetro de tipos de células, incluindo células humanas e animais, tornando-o uma ferramenta essencial para diversas aplicações de investigação. Formulado com uma combinação meticulosamente equilibrada de crioprotectores e nutrientes essenciais, o Freeze Medium CM-1 minimiza a formação de cristais de gelo e o stress celular durante o processo de congelação, preservando assim a integridade celular.
As principais caraterísticas do Freeze Medium CM-1 incluem:

Ampla compatibilidade: Eficaz para uma vasta gama de tipos de células, incluindo células primárias, células estaminais e linhas celulares estabelecidas.
Alta Viabilidade: Optimizado para maximizar a recuperação e a viabilidade das células pós-descongelamento, garantindo resultados experimentais fiáveis.
Pronto a utilizar: Convenientemente preparado e esterilizado para aplicação imediata, reduzindo o tempo de preparação e o risco de contaminação.
Estabilidade melhorada: Mantém um desempenho consistente sob condições padrão de criopreservação, garantindo resultados reprodutíveis.
Longo prazo de validade: O CM-1 é um meio de criopreservação pronto a utilizar que contém soro e que pode ser armazenado no frigorífico até um ano.


Utilização do CM-1 para congelação de células

Para utilizar o CM-1 para congelar células aderentes e em suspensão, siga estes passos

Para células aderentes, lavar e dissociar as células do substrato de cultura. No caso das células em suspensão, avançar diretamente para o passo seguinte.
Contar as células para garantir que estão na concentração correta.
Centrifugar as células para as pelletar e, em seguida, ressuspender em meio de congelação CM-1.
Transferir as células ressuspensas para frascos criogénicos.
Utilize um método de congelação lenta antes de transferir as células para armazenamento a longo prazo





Método
Descrição
Passos





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Congelação manual

Um método passo a passo que envolve a redução gradual da temperatura para garantir a viabilidade das células

1️⃣ Colocar as células em meio de congelação num congelador a 4°C durante 40 minutos.
2️⃣ Transferir para um congelador a -80°C durante 24 horas.
3️⃣ Armazenar as células em azoto líquido para preservação a longo prazo



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Utilização do Mr. Frosty

Um dispositivo conveniente que permite taxas de congelação controladas sem energia eléctrica

1️⃣ Preparar as células em frascos criogénicos com meio de congelação.
2️⃣ Colocar os frascos criogénicos no recipiente Mr. Frosty.
3️⃣ Armazenar a -80°C durante 24 horas antes de transferir para azoto líquido



❄️
Congelador de velocidade controlada

Um congelador de alta precisão da Thermo Fisher ou de outros fabricantes, concebido para a redução controlada da temperatura

1️⃣ Programar o dispositivo para diminuir gradualmente a temperatura.
2️⃣ Colocar as células preparadas no congelador.
3️⃣ Após o ciclo de congelação, transferir as células para azoto líquido









Armazenar os frascos criogénicos a temperaturas inferiores a -130°C ou em azoto líquido para preservação a longo prazo.


Ingredientes

Contém FBS, DMSO, Glucose, Sais
Capacidade tampão: pH = 7,2 a 7,6


O Freeze Medium CM-1 da Cytion oferece uma solução fiável para a criopreservação, garantindo uma elevada viabilidade celular e funcionalidade pós-descongelamento para uma vasta gama de aplicações de investigação.

Um dos meios sintéticos de cultura de células mais utilizados é o Minimum Essential Medium Eagle (MEM). Desenvolvido por Harry Eagle, este meio foi introduzido pela primeira vez em 1959 e desde então tornou-se uma escolha popular para vários tipos de células cultivadas em monocamadas e linhas celulares aderentes.
O que é que o EMEM contém?
O EMEM é uma versão modificada do meio essencial mínimo de Eagle, contendo a solução salina equilibrada de Earle, aminoácidos não essenciais, L-glutamina, piruvato de sódio e bicarbonato de sódio. É importante notar que este nível de bicarbonato de sódio se destina a ser utilizado em 5% de CO2 no ar. Para manter a sua eficácia, recomenda-se que o meio seja armazenado entre 2°C e 8°C, no escuro, quando não estiver a ser utilizado.
Para que é utilizado o EMEM?
O meio essencial mínimo de Eagle (EMEM) é um meio de cultura celular que pode manter as células em cultura de tecidos. O meio contém concentrações mais elevadas de aminoácidos, permitindo uma aproximação mais exacta da composição proteica das células de mamíferos em cultura. O EMEM pode ser utilizado para cultivar várias células, incluindo fibroblastos, células da linha celular do cancro do fígado humano (HepG2) e células astrocitárias derivadas de progenitores cerebrais fetais humanos (PDA). É normalmente utilizado na presença de soro fetal bovino (FBS), soro de vitelo ou de cavalo.
Em que é que o EMEM é diferente de outros meios de cultura de células?
Embora o EMEM e o meio de Eagle modificado de Dulbecco (DMEM) partilhem algumas semelhanças, também são diferentes. Ambos os meios carecem de proteínas e contêm os aminoácidos, sais, glucose e vitaminas necessários para fornecer energia a uma célula e mantê-la em cultura de tecidos. No entanto, a formulação DMEM é modificada para conter até quatro vezes mais vitaminas e aminoácidos e duas a quatro vezes mais glucose do que o EMEM. Vale a pena notar que o EMEM também é diferente da formulação original do MEM.


Controlo de qualidade

Estéril-filtrado


Armazenamento e prazo de validade

Armazenar entre +2°C e +8°C, protegido da luz.
Depois de aberto, conservar a 4°C e utilizar no prazo de 6-8 semanas.


Condições de transporte

Temperatura ambiente


Conservação

Manter refrigerado a uma temperatura entre +2°C e +8°C, ao abrigo da luz. Evitar o congelamento e o aquecimento frequente a +37°C, uma vez que reduz a qualidade do produto.
Não aquecer o meio para além de 37°C nem utilizar fontes de calor não controladas, tais como aparelhos de micro-ondas.
Se apenas uma parte do meio for utilizada, retirar a quantidade necessária e aquecê-la à temperatura ambiente antes de a utilizar.



Composição



Categoria
Componentes
Concentração (mg/L)


Aminoácidos
L-Arginina HCl
126.00


L-Cistina 2 HCl
31.30


L-Glutamina
292.00


L-Histidina HCl H2O
42.00


L-Isoleucina
52.00


L-Leucina
52.00


L-Lisina HCl
72.50


L-Metionina
15.00


L-fenilalanina
32.00


L-Treonina
48.00


L-Triptofano
10.00


L-tirosina 2 Na 2 H2O
51.90


L-Valina
46.00


Vitaminas
Cloreto de colina
1.00


Vitaminas
Pantotenato de D-Cálcio
1.00


Ácido fólico
1.00


myo-Inositol
2.00


Nicotinamida
1.00


Piridoxal HCl
1.00


Riboflavina
0.10


Tiamina HCl
1.00


Sais inorgânicos
CaCl2 2 H2O
265.00


Sais inorgânicos
KCl
400.00


MgSO4
97.67


NaCl
6800.00


NaHCO3
2200.00


NaH2PO4
122.00


Outros componentes
D-Glucose
1000.00


Outros componentes
Sal de sódio de vermelho de fenol
11.00

Reagente de Dissociação Celular Accutase
- Uma Alternativa Suave à Tripsina
Accutase é uma solução de descolamento celular que está a revolucionar a indústria da cultura celular. É uma mistura de enzimas proteolíticas e colagenolíticas que imita a ação da tripsina e da colagenase. Ao contrário da tripsina, o Accutase não contém quaisquer componentes de mamíferos ou bactérias e é muito mais suave para as células, o que o torna uma solução ideal para o descolamento rotineiro de células de material plástico de cultura de tecidos padrão e material plástico revestido de adesão. Nesta publicação do blogue, vamos explorar as vantagens e utilizações do Accutase e a forma como está a mudar o jogo na cultura de células.
Vantagens do Accutase
A Accutase tem várias vantagens em relação às soluções tradicionais de tripsina. Em primeiro lugar, pode ser utilizado sempre que for necessário um descolamento suave e eficiente de qualquer linha celular aderente, o que o torna um substituto direto da tripsina. Em segundo lugar, a Accutase funciona extremamente bem em células estaminais embrionárias e neuronais, tendo sido demonstrado que mantém a viabilidade destas células após a passagem. Em terceiro lugar, a Accutase preserva a maioria dos epítopos para posterior análise por citometria de fluxo, tornando-a ideal para a análise de marcadores de superfície celular.
Além disso, a Accutase não necessita de ser neutralizada aquando da passagem das células aderentes. A adição de mais meios após a divisão das células dilui a Accutase de modo a que esta deixe de ser capaz de destacar as células. Isto elimina a necessidade de um passo de inativação e poupa tempo aos técnicos de cultura de células. Finalmente, o Accutase não precisa de ser aliquotado e um frasco mantém-se estável no frigorífico durante 2 meses.
Aplicações do Accutase
Accutase é um substituto direto da solução de tripsina e pode ser utilizado para a passagem de linhas celulares. Além disso, Accutase tem um bom desempenho na separação de células para a análise de muitos marcadores de superfície celular utilizando citometria de fluxo e para a seleção de células. Outras aplicações a jusante do tratamento com Accutase incluem a análise de marcadores de superfície celular, ensaio de crescimento de vírus, proliferação celular, ensaios de migração de células tumorais, passagem celular de rotina, aumento da escala de produção (bioreactor) e citometria de fluxo.
Composição do Accutase
Accutase não contém componentes de mamíferos ou bactérias e é uma mistura de enzimas naturais com atividade enzimática proteolítica e colagenolítica. É formulado numa concentração muito mais baixa do que a tripsina e a colagenase, tornando-o menos tóxico e mais suave, mas igualmente eficaz.
Eficácia do Accutase
O Accutase demonstrou ser eficiente na separação de células primárias e estaminais e na manutenção de uma elevada viabilidade celular em comparação com enzimas de origem animal, como a tripsina. 100% das células são recuperadas ao fim de 10 minutos e não há qualquer problema em deixar as células no Accutase até 45 minutos, graças à autodigestão do Accutase.
Em resumo
Em conclusão, o Accutase é uma solução poderosa que está a mudar o jogo na cultura de células. Com a sua natureza suave, eficiência e versatilidade, Accutase é a alternativa ideal à tripsina. Se procura uma solução fiável e eficiente para o descolamento de células, Accutase é a solução para si.

Visão geral do produto
Volume: 100 ml Armazenamento: ≤-15°C Esterilidade: Estéril-filtrado
A Solução Antibiótica/Antimicótica (100x) é um concentrado estéril, pronto a usar, concebido para reduzir os riscos de contaminação microbiana em culturas celulares e aplicações laboratoriais relacionadas. Esta solução 100x contém uma combinação bem estabelecida de penicilina, estreptomicina e anfotericina B, proporcionando uma atividade antimicrobiana de largo espetro contra bactérias Gram-positivas e Gram-negativas, leveduras e fungos filamentosos. A formulação é adequada para utilização em culturas de células eucarióticas, meios bacterianos e outros sistemas sensíveis à contaminação, apoiando operações laboratoriais limpas e consistentes.
Aplicação e benefícios Optimizada para protocolos de investigação de rotina, esta solução é amplamente utilizada para manter condições assépticas em fluxos de trabalho de cultura de células. Oferece um desempenho fiável em ambientes sensíveis à contaminação, ajudando os investigadores a reduzir o risco de crescimento microbiano excessivo sem comprometer a saúde das células ou a reprodutibilidade experimental. A formulação estéril-filtrada elimina a necessidade de etapas adicionais de solubilização, apoiando a preparação simplificada de meios e reduzindo a variabilidade nos procedimentos laboratoriais diários.
Utilização e compatibilidade Para obter concentrações de trabalho padrão, diluir a solução 1:100 no seu meio de cultura completo. O produto é compatível com uma vasta gama de linhas celulares de mamíferos e meios basais. Com uma disponibilidade de stock consistente, os investigadores beneficiam de uma continuidade de fornecimento fiável e de um planeamento logístico simplificado. A solução deve ser armazenada a ≤ -15 °C e protegida de ciclos repetidos de congelamento e descongelamento para manter a estabilidade. Apenas para uso em investigação. Não se destina a ser utilizado em procedimentos de diagnóstico ou terapêuticos. Não se destina a ser utilizado em seres humanos ou animais.

Solução salina tamponada com fosfato (PBS)
A solução salina tamponada com fosfato (PBS) é uma solução tampão amplamente utilizada na investigação biológica e química. Desempenha um papel crucial na manutenção do equilíbrio do pH e da osmolaridade durante vários procedimentos experimentais, incluindo o processamento de tecidos e a cultura de células. A nossa solução PBS é meticulosamente formulada com ingredientes de elevada pureza para garantir estabilidade e fiabilidade em todas as experiências. A osmolaridade e as concentrações de iões do nosso PBS imitam de perto as do corpo humano, tornando-o isotónico e não tóxico para a maioria das células.

Composição da nossa solução PBS
A nossa solução PBS é uma mistura com pH ajustado de tampões de fosfato de grau ultrapuro e soluções salinas. Numa concentração de trabalho 1X, contém

8000 mg/L de cloreto de sódio (NaCl)
200 mg/L de cloreto de potássio (KCl)
1150 mg/L Fosfato de sódio dibásico anidro (Na2HPO4)
200 mg/L Fosfato de potássio monobásico anidro (KH2PO4)

Esta composição assegura um pH e um equilíbrio iónico óptimos, adequados a uma vasta gama de aplicações biológicas.

Aplicações da nossa solução PBS
A nossa solução PBS é ideal para várias aplicações na investigação biológica. As suas propriedades isotónicas e não tóxicas tornam-na adequada para a diluição de substâncias e lavagem de recipientes de células. As soluções PBS que contêm EDTA são eficazes para desprender células ligadas e aglomeradas. No entanto, os metais divalentes, como o zinco, não devem ser adicionados ao PBS, uma vez que podem causar precipitação. Nestes casos, recomenda-se a utilização de tampões Good's. Além disso, a nossa solução de PBS é uma alternativa aceitável ao meio de transporte viral para o transporte e armazenamento de vírus de ARN, incluindo o SARS-CoV-2.

Controlo de qualidade

Estéril-filtrado


Armazenamento e prazo de validade

Armazenar entre +2°C e +25°C, protegido da luz.
Depois de aberto, conservar a uma temperatura entre 2°C e 25°C e utilizar no prazo de 24 meses.


Condições de transporte

Temperatura ambiente


Manutenção

Manter refrigerado a uma temperatura entre +2°C e +8°C, ao abrigo da luz. Evitar o congelamento e o aquecimento frequente a +37°C, uma vez que reduz a qualidade do produto.
Não aquecer o meio para além de 37°C nem utilizar fontes de calor não controladas, tais como aparelhos de micro-ondas.
Se apenas uma parte do meio for utilizada, retirar a quantidade necessária e aquecê-la à temperatura ambiente antes de a utilizar.

Composição



Categoria
Componentes
Concentração (mg/L)


Sais
Cloreto de potássio
200



Fosfato de potássio monobásico anidro
200



Cloreto de sódio
8000



Fosfato de sódio dibásico anidro
1150

Organismo	Humano
Tecido	Rim

Organismo	Humano
Tecido	Rim

Organismo	Humano
Tecido	Rim embrionário

Organismo	Humano
Tecido	Rim

Organismo	Humano
Tecido	Rim embrionário

Organismo	Humano
Tecido	Rim embrionário

Organismo	Humano
Tecido	Rim fetal

Organismo	Humano
Tecido	Rim fetal