DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/L Glicose, w: 2,5 mM L-Glutamina, w: 15 mM HEPES, w: 0,5 mM Piruvato de sódio, w: 1,2 g/L NaHCO3
O DMEM:Ham's F12 é um meio basal amplamente reconhecido e amplamente utilizado na cultura de células para investigação biológica. Serve como uma fonte fundamental de nutrientes para o crescimento de várias linhas celulares de mamíferos, particularmente quando suplementado com Soro Fetal Bovino (FBS).
Esta formulação única combina o Meio Eagle Modificado de Dulbecco (DMEM) e Ham's F-12 (Ham's Nutrient Mixture F-12) num rácio preciso de 1:1. A adição de L-glutamina melhora ainda mais a sua composição.
O DMEM, derivado do Eagle's Minimal Essential Medium (EMEM), oferece uma maior concentração de aminoácidos e vitaminas em comparação com o seu antecessor. Em contrapartida, o Ham's F-12 baseia-se no meio Ham's F-10, fornecendo um conjunto complementar de componentes essenciais.
Para apoiar um crescimento celular ótimo, é prática comum suplementar o DMEM:Ham's F12 com FBS a uma concentração típica de 5-10%. Esta adição é necessária porque o meio carece de hormonas de crescimento, lípidos e proteínas cruciais para o desenvolvimento celular.
O DMEM:Ham's F12 incorpora um sistema tampão de pH e é frequentemente suplementado com vermelho de fenol, um indicador de pH. As células cultivadas em DMEM:Ham's F12, ou em qualquer meio que utilize o sistema tampão de bicarbonato, requerem um ambiente controlado de CO2 de 5-10% para manter níveis de pH adequados.
Controlo de qualidade
- Estéril-filtrado
Armazenamento e prazo de validade
- Armazenar entre +2°C e +8°C, protegido da luz.
- Depois de aberto, conservar a 4°C e utilizar no prazo de 6-8 semanas.
Condições de transporte
- Temperatura ambiente
Manutenção
- Manter refrigerado a uma temperatura entre +2°C e +8°C, ao abrigo da luz. Evitar o congelamento e o aquecimento frequente a +37°C, uma vez que reduz a qualidade do produto.
- Não aquecer o meio para além de 37°C nem utilizar fontes de calor não controladas, tais como aparelhos de micro-ondas.
- Se apenas uma parte do meio for utilizada, retirar a quantidade necessária e aquecê-la à temperatura ambiente antes de a utilizar.
Composição
| Categoria | Componentes | Concentração (mg/L) |
| Aminoácidos | Glicina | 18.75 |
| L-Alanina | 4.45 | |
| L-Arginina HCl | 147.50 | |
| L-Asparagina H₂O | 7.50 | |
| Ácido L-aspártico | 6.65 | |
| L-Cisteína HCl H₂O | 17.56 | |
| L-Cistina 2 HCl | 31.29 | |
| Ácido L-Glutâmico | 7.35 | |
| L-Glutamina | 365.00 | |
| L-Histidina HCl H₂O | 31.48 | |
| L-Isoleucina | 54.47 | |
| L-Leucina | 59.05 | |
| L-Lisina HCl | 91.25 | |
| L-Metionina | 17.24 | |
| L-fenilalanina | 35.48 | |
| L-Prolina | 17.25 | |
| L-Serina | 26.25 | |
| L-Treonina | 53.45 | |
| L-Triptofano | 9.02 | |
| Sal dissódico de L-tirosina | 48.10 | |
| L-Valina | 52.85 | |
| Vitaminas | D-Biotina | 0.0035 |
| Cloreto de colina | 8.98 | |
| Pantotenato de D-Cálcio | 2.24 | |
| Ácido fólico | 2.66 | |
| myo-Inositol | 12.60 | |
| Nicotinamida | 2.02 | |
| Piridoxina HCl | 0.031 | |
| Piridoxal HCl | 2.00 | |
| Riboflavina | 0.219 | |
| Tiamina HCl | 2.17 | |
| Vitamina B12 | 0.68 | |
| Sais inorgânicos | CaCl₂ 2 H₂O | 154.50 |
| CuSO₄ 5 H₂O | 0.0013 | |
| Fe(NO₃)₃ 9 H₂O | 0.05 | |
| FeSO₄ 7 H₂O | 0.417 | |
| KCl | 311.80 | |
| MgCl₂ 6 H₂O | 61.20 | |
| MgSO₄ | 48.84 | |
| NaCl | 6996.00 | |
| NaHCO₃ | 1200.00 | |
| Na₂HPO₄ | 71.02 | |
| NaH₂PO₄ | 54.30 | |
| ZnSO₄ 7 H₂O | 0.432 | |
| Outros componentes | D-Glucose | 3151.00 |
| Hipoxantina | 2.40 | |
| HEPES | 3574.50 | |
| Ácido linoleico | 0.042 | |
| Ácido lipóico | 0.105 | |
| Sal de sódio de vermelho de fenol | 8.63 | |
| Putrescina 2 HCl | 0.081 | |
| Piruvato de sódio | 55.00 | |
| Timidina | 0.365 |