RPMI 1640, com: 2,0 mM de glutamina estável, com: 2,0 g/L NaHCO3
O meio RPMI 1640, também conhecido como meio RPMI, é um meio de cultura de células altamente versátil, amplamente utilizado na investigação biológica para cultivar várias células de mamíferos. Desenvolvido por George E. Moore, Robert E. Gerner e H. Addison Franklin em 1966 no famoso Roswell Park Comprehensive Cancer Center, este meio derivou o seu nome da sua origem no Roswell Park Memorial Institute (RPMI).
Inicialmente concebido para suportar o crescimento de células leucémicas humanas em culturas em suspensão e em monocamada, o meio RPMI 1640 evoluiu através de modificações efectuadas por investigadores e fornecedores comerciais para se tornar adequado a uma gama diversificada de células de mamíferos. É excecionalmente compatível com linhas celulares como HeLa, Jurkat, MCF-7, PC12, PBMC, astrócitos e carcinomas.
O meio RPMI 1640 distingue-se de outros meios de cultura de células devido à sua composição única. Contém uma quantidade substancial de fosfato, aminoácidos e vitaminas. Nomeadamente, inclui biotina, vitamina B12 e PABA, ausentes no Eagle's Minimal Essential Medium ou no Dulbecco's Modified Eagle Medium. Além disso, o meio RPMI 1640 apresenta concentrações significativamente elevadas de vitaminas inositol e colina. No entanto, não contém proteínas, lípidos ou factores de crescimento. Consequentemente, a suplementação com 10% de Soro Fetal Bovino (FBS) é normalmente necessária para proporcionar condições óptimas para o crescimento celular.
O sistema tampão do meio RPMI 1640 baseia-se no bicarbonato de sódio e necessita de um ambiente com 5-10% de CO2 para manter um pH fisiologicamente adequado. A inclusão do agente redutor glutatião distingue ainda mais este meio dos outros.
Controlo de qualidade
- Estéril-filtrado
Armazenamento e prazo de validade
- Armazenar entre +2°C e +8°C, protegido da luz.
- Depois de aberto, conservar a 4°C e utilizar no prazo de 6-8 semanas.
Condições de transporte
- Temperatura ambiente
Manutenção
- Manter refrigerado a uma temperatura entre +2°C e +8°C, ao abrigo da luz. Evitar a congelação e o aquecimento frequente a +37°C, uma vez que reduz a qualidade do produto.
- Não aquecer o meio para além de 37°C nem utilizar fontes de calor não controladas, tais como aparelhos de micro-ondas.
- Se apenas uma parte do meio for utilizada, retirar a quantidade necessária e aquecê-la à temperatura ambiente antes de a utilizar.
Composição
| Categoria | Componentes | Concentração (mg/L) |
| Aminoácidos | Glicina | 10.00 |
| L-Alanil-L-Glutamina | 434.40 | |
| L-Arginina | 200.00 | |
| L-Asparagina H2O | 56.82 | |
| Ácido L-aspártico | 20.00 | |
| L-Cistina 2HCl | 65.20 | |
| Ácido L-Glutâmico | 20.00 | |
| L-Histidina HCl H2O | 20.27 | |
| L-hidroxi-L-prolina | 20.00 | |
| L-Isoleucina | 50.00 | |
| L-Leucina | 50.00 | |
| L-Lisina HCl | 40.00 | |
| L-Metionina | 15.00 | |
| L-fenilalanina | 15.00 | |
| L-Prolina | 20.00 | |
| L-Serina | 30.00 | |
| L-Treonina | 20.00 | |
| L-Triptofano | 5.00 | |
| L-tirosina 2Na 2H2O | 28.83 | |
| L-Valina | 20.00 | |
| Vitaminas | ácido p-amino-benzoico | 1.00 |
| D-Biotina | 0.20 | |
| Cloreto de colina | 3.00 | |
| D-pantotenato de cálcio | 0.25 | |
| Ácido fólico | 1.00 | |
| myo-Inositol | 35.00 | |
| Nicotinamida | 1.00 | |
| Piridoxina HCl | 1.00 | |
| Riboflavina | 0.20 | |
| Tiamina HCl | 1.00 | |
| Vitamina B12 | 0.005 | |
| Sais inorgânicos | Ca(NO3)2 4H2O | 100.00 |
| KCl | 400.00 | |
| MgSO4 7H2O | 100.00 | |
| NaCl | 6000.00 | |
| NaHCO3 | 2000.00 | |
| Na2HPO4 | 800.00 | |
| Outros componentes | D-Glucose | 2000.00 |
| L-Glutatião reduzido | 1.00 | |
| Sal de sódio de vermelho de fenol | 5.30 |