HEK293-FAP-celler

5 000,00 €*

Produkterna levereras frysta på torris i kryorör. Varje kryorör innehåller vanligtvis 3 × 10 ⁶ celler för adherenta cellinjer eller 5 × 10⁶ celler för suspensionscellinjer (se batchens CoA för mer information).

Priserna är exklusive skatter och fraktkostnader

cryovial

Produktnummer: 305419

Säkerhetsdatablad

Produktblad

Avtal med tredje part

Beskrivning	Ansvarsfriskrivning: De priser som visas för cellinjer är uteslutande för icke-vinstdrivande kunder. Om du representerar en kommersiell enhet, vänligen kontakta oss för alternativ prissättning. HEK293-FAP-cellinjen är en stabil rekombinant HEK293-cellinje som är konstruerad för att uttrycka Fibroblast Activation Protein (FAP) på en hög nivå, cirka 123 000 molekyler per cell. Denna cellinje utvecklades med hjälp av inscreenex landing pad-teknik, som säkerställer en exakt och reproducerbar integration av FAP-genen i ett specifikt, förvaliderat genomiskt locus. FAP, även känt som Seprase eller DPPIV, är ett serinproteas som är involverat i ombildningen av den extracellulära matrisen, vilket är särskilt viktigt i processer som sårläkning, vävnadsreparation och fibros. FAP är också starkt uppreglerat i stroma i många epiteliala cancerformer, vilket gör det till ett värdefullt mål för onkologisk forskning och en potentiell biomarkör för cancerassocierade fibroblaster. Uttrycket av FAP i denna cellinje bekräftades med hjälp av flödescytometri med en målspecifik antikropp, vilket säkerställer en konsekvent och tillförlitlig receptortäthet i hela cellpopulationen.
Organism	Människan
Vävnad	Fetal njure

Ålder	Foster
Kön	Kvinna
Morfologi	Epitelliknande
Egenskaper för tillväxt	Monolager, vidhäftande

Citationstecken	HEK293-FAP (Cytion katalognummer 305419)
Biosäkerhetsnivå	1
NCBI_TaxID	9606
GMO-status	GMO-S1: Detta HEK293-derivat innehåller en FAP-uttryckskonstruktion (fibroblast activation protein) för studier av receptorfunktion. Denna klassificering gäller endast inom Tyskland och kan skilja sig åt på andra håll.

Receptorer uttryckta	FAP (Seprase eller DPPIV)

Kulturmedium	RPMI 1640, med: 2,0 mM stabilt glutamin, med: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytion artikelnummer 820700a)
Kosttillskott	Komplettera med 10% FBS, 1 mM natriumpyruvat, 10 mM HEPES, 1% NEAA. Tillsätt Geneticin (G418-Sulfat) för att uppnå en slutlig koncentration på 1 mg/ml.
Dissociationsreagens	Trypsin-EDTA
Subkulturering	För rutinmässig adherent cellkultur: Aspirera det gamla odlingsmediet från de adherenta cellerna och tvätta dem med PBS för att avlägsna eventuellt kvarvarande medium. Efter aspirering av PBS, tillsätt lämplig volym Trypsin/EDTA-lösning baserat på odlingskärlets storlek (t.ex. 1 ml för en T25-kolv, 3 ml för en T75-kolv) och inkubera vid rumstemperatur eller 37°C tills cellerna lossnar (5-10 minuter). Övervaka avskiljningen under mikroskop och knacka försiktigt på kärlet om det behövs för att frigöra cellerna. När cellerna har lossnat, tillsätt komplett medium för att inaktivera trypsin/EDTA, resuspendera cellerna försiktigt och överför en alikvot av cellsuspensionen till ett nytt odlingskärl med färskt medium. Placera kärlet i en inkubator inställd på 37°C med 5%_CO2 och byt medium var 2-3:e dag.
Splitförhållande	Ett förhållande på 1:2 rekommenderas för den första spliten efter upptining. Ett förhållande på 1:5 till 1:10 rekommenderas för rutinodling.
Förnyelse av vätska	2 till 3 gånger per vecka
Återhämtning efter töväder	Efter upptining, dela upp cellerna i förhållandet 1:2 till 1:3 i T25-kolvar och låt cellerna återhämta sig från frysningsprocessen och fästa i minst 24 timmar. För bästa vidhäftning och viabilitet efter upptining av cellerna rekommenderar vi att kollagenbelagda kolvar eller plattor används för den första sådden efter kryoåterhämtning. Kollagenbeläggning krävs inte för efterföljande rutinmässig odling av cellerna.
Frys mediet	Som kryokonserveringsmedium använder vi komplett tillväxtmedium (inklusive FBS) + 10% DMSO för adekvat viabilitet efter upptining, eller CM-1 (Cytion katalognummer 800100), som innehåller optimerade osmoprotektanter och metaboliska stabilisatorer för att förbättra återhämtningen och minska kryoinducerad stress.
Upptining och odling av celler	Bekräfta att flaskan är djupfryst vid leverans, eftersom cellerna skickas på torris för att bibehålla optimala temperaturer under transporten. Vid mottagandet ska du antingen förvara kryovialen omedelbart vid temperaturer under -150 °C för att säkerställa att cellernas integritet bevaras, eller gå vidare till steg 3 om omedelbar odling krävs. Vid omedelbar odling ska injektionsflaskan snabbt tinas genom att den sänks ned i ett 37 °C vattenbad med rent vatten och ett antimikrobiellt medel och omrörs försiktigt i 40-60 sekunder tills en liten isklump återstår. Utför alla efterföljande steg under sterila förhållanden i en flödeshuv och desinficera kryovialerna med 70 % etanol innan de öppnas. Öppna försiktigt den desinficerade flaskan och överför cellsuspensionen till ett 15 ml centrifugrör som innehåller 8 ml rumstempererat odlingsmedium och blanda försiktigt. Centrifugera blandningen vid 300 x g i 3 minuter för att separera cellerna och kassera försiktigt supernatanten som innehåller resterande frysmedium. Resuspendera försiktigt cellpelleten i 10 ml färskt odlingsmedium. För adherenta celler, fördela suspensionen mellan två T25-kulturkolvar; för suspensionskulturer, överför allt medium till en T25-kolv för att främja effektiv cellinteraktion och tillväxt. Följ fastställda subkulturprotokoll för fortsatt tillväxt och underhåll av cellinjen, vilket säkerställer tillförlitliga experimentella resultat.
Inkubationsatmosfär	37°C, 5%_CO2, befuktad atmosfär.
Ytbeläggning av flaska	För optimal vidhäftning och viabilitet efter upptining rekommenderar vi att kollagenbelagda kolvar eller plattor används.
Frysningsprocedur	Kryopreserverade cellinjer skickas på torris i validerade, isolerade förpackningar med tillräckligt med kylmedel för att hålla cirka -78 °C under hela transporten. Vid mottagandet ska behållaren omedelbart inspekteras och flaskorna utan dröjsmål överföras till lämplig förvaring.
Leveransvillkor	Kryopreserverade cellinjer skickas på torris i validerade, isolerade förpackningar med tillräckligt med kylmedel för att hålla cirka -78 °C under hela transporten. Vid mottagandet ska behållaren omedelbart inspekteras och flaskorna utan dröjsmål överföras till lämplig förvaring.
Förvaringsförhållanden	För långtidsförvaring, placera flaskorna i flytande kväve i ångfas vid ca -150 till -196 °C. Förvaring vid -80 °C är acceptabelt endast som ett kort mellanliggande steg innan överföring till flytande kväve.

Sterilitet	Mykoplasmakontaminering utesluts med hjälp av både PCR-baserade analyser och luminiscensbaserade metoder för mykoplasmadiagnostik. För att säkerställa att det inte finns någon kontaminering av bakterier, svamp eller jäst utsätts cellkulturerna för dagliga visuella inspektioner.

Observera att denna cellinje inte är tillgänglig enligt Cytions standard MTA, eftersom den kräver ett tredjepartsavtal och/eller är föremål för förhandling med den ursprungliga licensgivaren.

Produkter som krävs

Produkter som krävs

Frysmedium CM-1 - 50 ml

Varianter av kryopreserveringsmedier: 50 ml

Cytions Freeze Medium CM-1 är ett toppmodernt kryopreserveringsmedium som är utformat för att säkerställa högsta möjliga cellviabilitet och funktionalitet efter upptining. Detta mångsidiga medium är lämpligt för ett brett spektrum av celltyper, inklusive både mänskliga och animaliska celler, vilket gör det till ett viktigt verktyg för olika forskningsapplikationer. Freeze Medium CM-1 är formulerat med en noggrant balanserad kombination av kryoskyddsmedel och viktiga näringsämnen och minimerar bildandet av iskristaller och cellulär stress under frysningsprocessen, vilket bevarar cellens integritet.
Viktiga egenskaper hos Freeze Medium CM-1 inkluderar:

Bred kompatibilitet: Effektivt för ett stort antal olika celltyper, inklusive primära celler, stamceller och etablerade cellinjer.
Hög viabilitet: Optimerat för att maximera cellåtervinning och viabilitet efter upptining, vilket säkerställer tillförlitliga experimentella resultat.
Redo att använda: Bekvämt förberedd och steriliserad för omedelbar användning, vilket minskar förberedelsetiden och risken för kontaminering.
Förbättrad stabilitet: Upprätthåller konsekvent prestanda under standardförhållanden för kryokonservering, vilket säkerställer reproducerbara resultat.
Lång hållbarhetstid: CM-1 är ett serumhaltigt kryopreserveringsmedium som är färdigt att använda och kan förvaras i kylskåp i upp till ett år.

Användning av CM-1 för frysning av celler

Följ dessa steg för att använda CM-1 för frysning av både adherenta celler och suspenderade celler

För adherenta celler, tvätta och separera dem från odlingssubstratet. För suspenderade celler, fortsätt direkt till nästa steg.
Räkna cellerna för att säkerställa att de har rätt koncentration.
Centrifugera cellerna för att pelletera dem och resuspendera sedan i CM-1-frysmedium.
Överför de resuspenderade cellerna till kryovialer.
Använd en metod med långsam frysning innan cellerna överförs till långtidsförvaring

Metod
Beskrivning av metoden
Steg för steg

❄️
Manuell frysning

En steg-för-steg-metod som innebär gradvis temperatursänkning för att säkerställa cellernas livskraft

1️⃣ Placera cellerna i frysmedium i en 4°C frys i 40 minuter.
2️⃣ Överför till en frys på -80°C i 24 timmar.
3️⃣ Förvara cellerna i flytande kväve för långtidsförvaring

❄️
Användning av Mr Frosty

En praktisk anordning som möjliggör kontrollerade fryshastigheter utan elektrisk ström

1️⃣ Förbered celler i kryovialer med frysmedium.
2️⃣ Placera kryovialerna i Mr Frosty-behållaren.
3️⃣ Förvara vid -80°C i 24 timmar innan du överför till flytande kväve

❄️
Frys med kontrollerad hastighet

En högprecisionsfrys från Thermo Fisher eller andra tillverkare som är utformad för kontrollerad temperatursänkning

1️⃣ Programmera enheten för att gradvis sänka temperaturen.
2️⃣ Placera de förberedda cellerna i frysen.
3️⃣ Efter fryscykeln, överför cellerna till flytande kväve

Förvara kryovialerna vid temperaturer under -130°C eller i flytande kväve för långtidsförvaring.

Ingredienser

Innehåller FBS, DMSO, glukos, salter
Buffringskapacitet: pH = 7,2 till 7,6

Cytions Freeze Medium CM-1 erbjuder en tillförlitlig lösning för kryokonservering, vilket säkerställer hög cellviabilitet och funktionalitet efter upptining för ett brett spektrum av forskningsapplikationer.

59,00 €*

RPMI 1640, med: 2,0 mM stabilt glutamin, med: 2,0 g/L NaHCO3

RPMI 1640 Medium, även känt som RPMI medium, är ett mycket mångsidigt cellodlingsmedium som används inom biologisk forskning för att odla olika däggdjursceller. Mediet utvecklades av George E. Moore, Robert E. Gerner och H. Addison Franklin 1966 vid det berömda Roswell Park Comprehensive Cancer Center och har fått sitt namn från sitt ursprung vid Roswell Park Memorial Institute (RPMI).
RPMI 1640 Medium utformades ursprungligen för att stödja tillväxten av mänskliga leukemiceller i både suspension och monolagerkulturer, men har utvecklats genom modifieringar av forskare och kommersiella leverantörer för att bli lämpligt för ett brett spektrum av däggdjursceller. Det är exceptionellt kompatibelt med cellinjer som HeLa, Jurkat, MCF-7, PC12, PBMC, astrocyter och karcinom.
RPMI 1640 Medium skiljer sig från andra cellodlingsmedier på grund av sin unika sammansättning. Det innehåller en betydande mängd fosfat, aminosyror och vitaminer. Framför allt innehåller det biotin, vitamin B12 och PABA, som saknas i Eagle's Minimal Essential Medium eller Dulbecco's Modified Eagle Medium. Dessutom uppvisar RPMI 1640 Medium signifikant förhöjda koncentrationer av vitaminerna inositol och kolin. Det innehåller dock inte proteiner, lipider eller tillväxtfaktorer. Följaktligen krävs ofta tillsats av 10% fetalt bovint serum (FBS) för att ge optimala förutsättningar för celltillväxt.
Buffringssystemet i RPMI 1640 Medium är beroende av natriumbikarbonat och kräver en 5-10% CO2-miljö för att upprätthålla ett fysiologiskt lämpligt pH. Inkluderingen av reduktionsmedlet glutation skiljer detta medium ytterligare från andra.
Kvalitetskontroll

Sterilt filtrerad

Förvaring och hållbarhetstid

Förvaras vid +2°C till +8°C, skyddat från ljus.
Efter öppnandet, förvara vid 4°C och använd inom 6-8 veckor.

Förhållanden vid leverans

Omgivande temperatur

Underhåll

Förvaras i kylskåp vid +2°C till +8°C i mörker. Undvik frysning och frekvent uppvärmning till +37°C, eftersom det försämrar produktkvaliteten.
Värm inte upp mediet över 37°C och använd inte okontrollerade värmekällor som t.ex. mikrovågsugnar.
Om endast en del av mediet ska användas, ta ut den mängd som behövs och värm det till rumstemperatur före användning.

Sammansättning

Kategori
Komponenter
Koncentration (mg/L)

Aminosyror
Glycin
10.00

L-Alanyl-L-Glutamin
434.40

L-arginin
200.00

L-AsparaginH2O
56.82

L-Asparaginsyra
20.00

L-kystin 2HCl
65.20

L-glutaminsyra
20.00

L-Histidin HClH2O
20.27

L-hydroxi-L-prolin
20.00

L-Isoleucin
50.00

L-Leucin
50.00

L-Lysin HCl
40.00

L-metionin
15.00

L-fenylalanin
15.00

L-prolin
20.00

L-Serin
30.00

L-Threonin
20.00

L-Tryptofan
5.00

L-tyrosin 2Na 2H2O
28.83

L-Valin
20.00

Vitaminer
p-Amino bensoesyra
1.00

D-biotin
0.20

Kolinklorid
3.00

D-kalciumpantotenat
0.25

Folsyra
1.00

myo-Inositol
35.00

Nikotinamid
1.00

Pyridoxin HCl
1.00

Riboflavin
0.20

Tiamin HCl
1.00

Vitamin B12
0.005

Oorganiska salter
Ca(NO3)2 4H2O
100.00

KCl
400.00

MgSO4 7H2O
100.00

NaCl
6000.00

NaHCO3
2000.00

Na2HPO4
800.00

Övriga komponenter
D-Glukos
2000.00

L-glutation reducerad
1.00

Fenolrött natriumsalt
5.30

25,00 €*

Accutase

Varianter: 100 ml

Accutase Cell Dissociation Reagent
- Ett skonsamt alternativ till Trypsin
Accutase är en cellavskiljningslösning som revolutionerar cellodlingsindustrin. Det är en blandning av proteolytiska och kollagenolytiska enzymer som efterliknar effekten av trypsin och kollagenas. Till skillnad från trypsin innehåller Accutase inga däggdjurs
- eller bakteriekomponenter och är mycket skonsammare mot cellerna, vilket gör det till en idealisk lösning för rutinmässig avskiljning av celler från vanliga plastbehållare för vävnadsodling och plastbehållare med adhesionsbeläggning. I det här blogginlägget går vi igenom fördelarna och användningsområdena för Accutase och hur det förändrar spelreglerna för cellodling.
Fördelar med Accutase
Accutase har flera fördelar jämfört med traditionella trypsinlösningar. För det första kan det användas när det behövs en skonsam och effektiv avskiljning av en adherent cellinje, vilket gör det till en direkt ersättning för trypsin. För det andra fungerar Accutase mycket bra på embryonala och neuronala stamceller, och det har visat sig att dessa cellers viabilitet bibehålls efter passering. För det tredje bevarar Accutase de flesta epitoper för efterföljande flödescytometrianalys, vilket gör den idealisk för analys av cellytemarkörer.
Dessutom behöver Accutase inte neutraliseras vid passering av adherenta celler. Genom att tillsätta mer media efter att cellerna har delats späds Accutase ut så att det inte längre kan lossa cellerna. Detta eliminerar behovet av ett inaktiveringssteg och sparar tid för cellodlingsteknikerna. Slutligen behöver Accutase inte alikeras, och en flaska är stabil i kylskåpet i 2 månader.
Tillämpningar av Accutase
Accutase är en direkt ersättning för trypsinlösning och kan användas för passering av cellinjer. Dessutom fungerar Accutase bra när celler lossas för analys av många cellytmarkörer med hjälp av flödescytometri och för cellsortering. Andra nedströmsapplikationer för Accutase-behandling inkluderar analys av cellytmarkörer, virustillväxtanalys, cellproliferation, tumörcellsmigrationsanalyser, rutinmässig cellpassage, produktionsuppskalning (bioreaktor) och flödescytometri.
Sammansättning av Accutase
Accutase innehåller inga däggdjurs
- eller bakteriekomponenter och är en naturlig enzymblandning med proteolytisk och kollagenolytisk enzymaktivitet. Den är formulerad i en mycket lägre koncentration än trypsin och kollagenas, vilket gör den mindre toxisk och skonsammare, men lika effektiv.
Effektiviteten hos Accutase
Accutase har visat sig vara effektivt när det gäller att avlägsna primära celler och stamceller och bibehålla hög cellviabilitet jämfört med enzymer av animaliskt ursprung, t.ex. trypsin. 100% av cellerna återvinns efter 10 minuter, och det är ingen fara att låta cellerna ligga i Accutase i upp till 45 minuter, tack vare Accutases autodigestion.
Sammanfattningsvis
Sammanfattningsvis är Accutase en kraftfull lösning som håller på att förändra spelreglerna för cellodling. Med sin skonsamma natur, effektivitet och mångsidighet är Accutase det perfekta alternativet till trypsin. Om du letar efter en tillförlitlig och effektiv lösning för cellavskiljning är Accutase lösningen för dig.

75,00 €*

Antibiotikum/Antimykotikum lösning (100x)

Produktöversikt
Volym: 100 ml Förvaring: ≤-15°C Sterilitet: Sterilt filtrerad
Antibiotic/Antimycotic Solution (100x) är ett sterilt, bruksfärdigt koncentrat som är utformat för att minska riskerna för mikrobiell kontaminering vid cellodling och relaterade laboratorieapplikationer. Denna 100x-lösning innehåller en väletablerad kombination av penicillin, streptomycin och amfotericin B, vilket ger en bredspektrig antimikrobiell aktivitet mot grampositiva och gramnegativa bakterier, jästsvampar och filamentösa svampar. Formuleringen är lämplig för användning i eukaryota cellkulturer, bakteriemedier och andra kontaminationskänsliga system, vilket stöder en ren och konsekvent laboratorieverksamhet.
Tillämpning och fördelar Denna lösning är optimerad för rutinmässiga forskningsprotokoll och används ofta för att upprätthålla aseptiska förhållanden i arbetsflöden för cellodling. Den ger tillförlitlig prestanda i kontamineringskänsliga miljöer och hjälper forskare att minska risken för mikrobiell överväxt utan att äventyra cellernas hälsa eller experimentens reproducerbarhet. Den sterilfiltrerade formuleringen eliminerar behovet av ytterligare solubiliseringssteg, vilket ger en strömlinjeformad medieberedning och minskar variabiliteten i de dagliga laboratorieprocedurerna.
Användning och kompatibilitet För att uppnå standardiserade arbetskoncentrationer, späd lösningen 1:100 i ditt kompletta odlingsmedium. Produkten är kompatibel med ett brett spektrum av mammaliecellinjer och basala medier. Med konsekvent lagertillgänglighet kan forskare dra nytta av pålitlig leveranskontinuitet och förenklad logistikplanering. Lösningen ska förvaras vid ≤ -15 °C och skyddas från upprepade frys
- och upptiningscykler för att bibehålla stabiliteten. Endast för forskningsändamål. Ej för användning i diagnostiska eller terapeutiska procedurer. Ej för användning på människor eller djur.

45,00 €*

PBS

Fosfatbuffrad saltlösning (PBS)
Fosfatbuffrad saltlösning (PBS) är en buffertlösning som används i stor utsträckning inom biologisk och kemisk forskning. Den spelar en avgörande roll för att upprätthålla pH-balansen och osmolariteten under olika experimentella procedurer, inklusive vävnadsbearbetning och cellodling. Vår PBS-lösning är noggrant formulerad med ingredienser med hög renhet för att säkerställa stabilitet och tillförlitlighet i varje experiment. Osmolariteten och jonkoncentrationerna i vår PBS efterliknar i hög grad de som finns i människokroppen, vilket gör den isotonisk och giftfri för de flesta celler.

Sammansättning av vår PBS-lösning
Vår PBS-lösning är en pH-justerad blandning av fosfatbuffertar och saltlösningar av ultrapur kvalitet. Vid en 1X arbetskoncentration innehåller den:

8000 mg/L natriumklorid (NaCl)
200 mg/L kaliumklorid (KCl)
1150 mg/L Natriumfosfat dibasisk vattenfri (Na2HPO4)
200 mg/L Kaliumfosfat monobasiskt vattenfritt (KH2PO4)

Denna sammansättning säkerställer en optimal pH
- och jonbalans, lämplig för ett brett spektrum av biologiska tillämpningar.

Tillämpningar av vår PBS-lösning
Vår PBS-lösning är idealisk för olika tillämpningar inom biologisk forskning. Dess isotoniska och giftfria egenskaper gör den lämplig för utspädning av substanser och sköljning av cellbehållare. PBS-lösningar som innehåller EDTA är effektiva för att frigöra fastsittande och klumpade celler. Tvåvärda metaller som zink bör dock inte tillsättas i PBS, eftersom det kan orsaka utfällning. I sådana fall rekommenderas Good's buffertar. Dessutom är vår PBS-lösning ett godtagbart alternativ till viralt transportmedium för transport och förvaring av RNA-virus, inklusive SARS-CoV-2.

Kvalitetskontroll

Sterilt filtrerad

Förvaring och hållbarhetstid

Förvaras vid +2°C till +25°C, skyddat från ljus.
Efter öppnandet, förvara vid 2°C till 25°C och använd inom 24 månader.

Förhållanden vid leverans

Omgivande temperatur

Underhåll

Förvaras i kylskåp vid +2°C till +8°C i mörker. Undvik frysning och frekvent uppvärmning till +37°C, eftersom det försämrar produktkvaliteten.
Värm inte upp mediet över 37°C och använd inte okontrollerade värmekällor som t.ex. mikrovågsugnar.
Om endast en del av mediet ska användas, ta ut den mängd som behövs och värm det till rumstemperatur före användning.

Sammansättning

Kategori
Komponenter
Koncentration (mg/L)

Salter
Kaliumklorid
200

Kaliumfosfat monobasiskt vattenfritt
200

Natriumklorid
8000

Natriumfosfat dibasisk vattenfri
1150

20,00 €*