NIH-3T3-celler

Cytions Freeze Medium CM-1 är ett toppmodernt kryopreserveringsmedium som är utformat för att säkerställa högsta möjliga cellviabilitet och funktionalitet efter upptining. Detta mångsidiga medium är lämpligt för ett brett spektrum av celltyper, inklusive både mänskliga och animaliska celler, vilket gör det till ett viktigt verktyg för olika forskningsapplikationer. Freeze Medium CM-1 är formulerat med en noggrant balanserad kombination av kryoskyddsmedel och viktiga näringsämnen och minimerar bildandet av iskristaller och cellulär stress under frysningsprocessen, vilket bevarar cellens integritet.
Viktiga egenskaper hos Freeze Medium CM-1 inkluderar:

Bred kompatibilitet: Effektivt för ett stort antal olika celltyper, inklusive primära celler, stamceller och etablerade cellinjer.
Hög viabilitet: Optimerat för att maximera cellåtervinning och viabilitet efter upptining, vilket säkerställer tillförlitliga experimentella resultat.
Redo att använda: Bekvämt förberedd och steriliserad för omedelbar användning, vilket minskar förberedelsetiden och risken för kontaminering.
Förbättrad stabilitet: Upprätthåller konsekvent prestanda under standardförhållanden för kryokonservering, vilket säkerställer reproducerbara resultat.
Lång hållbarhetstid: CM-1 är ett serumhaltigt kryopreserveringsmedium som är färdigt att använda och kan förvaras i kylskåp i upp till ett år.


Användning av CM-1 för frysning av celler

Följ dessa steg för att använda CM-1 för frysning av både adherenta celler och suspenderade celler

För adherenta celler, tvätta och separera dem från odlingssubstratet. För suspenderade celler, fortsätt direkt till nästa steg.
Räkna cellerna för att säkerställa att de har rätt koncentration.
Centrifugera cellerna för att pelletera dem och resuspendera sedan i CM-1-frysmedium.
Överför de resuspenderade cellerna till kryovialer.
Använd en metod med långsam frysning innan cellerna överförs till långtidsförvaring





Metod
Beskrivning av metoden
Steg för steg





❄️
Manuell frysning

En steg-för-steg-metod som innebär gradvis temperatursänkning för att säkerställa cellernas livskraft

1️⃣ Placera cellerna i frysmedium i en 4°C frys i 40 minuter.
2️⃣ Överför till en frys på -80°C i 24 timmar.
3️⃣ Förvara cellerna i flytande kväve för långtidsförvaring



❄️
Användning av Mr Frosty

En praktisk anordning som möjliggör kontrollerade fryshastigheter utan elektrisk ström

1️⃣ Förbered celler i kryovialer med frysmedium.
2️⃣ Placera kryovialerna i Mr Frosty-behållaren.
3️⃣ Förvara vid -80°C i 24 timmar innan du överför till flytande kväve



❄️
Frys med kontrollerad hastighet

En högprecisionsfrys från Thermo Fisher eller andra tillverkare som är utformad för kontrollerad temperatursänkning

1️⃣ Programmera enheten för att gradvis sänka temperaturen.
2️⃣ Placera de förberedda cellerna i frysen.
3️⃣ Efter fryscykeln, överför cellerna till flytande kväve









Förvara kryovialerna vid temperaturer under -130°C eller i flytande kväve för långtidsförvaring.


Ingredienser

Innehåller FBS, DMSO, glukos, salter
Buffringskapacitet: pH = 7,2 till 7,6


Cytions Freeze Medium CM-1 erbjuder en tillförlitlig lösning för kryokonservering, vilket säkerställer hög cellviabilitet och funktionalitet efter upptining för ett brett spektrum av forskningsapplikationer.

DMEM:Ham's F12 är ett allmänt erkänt och flitigt använt basalt medium för cellodling inom biologisk forskning. Det fungerar som en grundläggande näringskälla för tillväxt av olika cellinjer från däggdjur, särskilt när det kompletteras med fetalt bovint serum (FBS).

Denna unika formulering kombinerar Dulbeccos Modified Eagle Medium (DMEM) och Ham's F-12 (Ham's Nutrient Mixture F-12) i ett exakt förhållande 1:1. Tillsatsen av L-glutamin förbättrar dess sammansättning ytterligare.

DMEM, som härrör från Eagle's Minimal Essential Medium (EMEM), erbjuder en ökad koncentration av aminosyror och vitaminer jämfört med sin föregångare. Ham's F-12 är däremot baserat på Ham's F-10 medium, vilket ger en kompletterande uppsättning essentiella komponenter.

För att stödja optimal celltillväxt är det vanligt att DMEM:Ham's F12 kompletteras med FBS i en typisk koncentration på 5-10%. Detta tillskott är nödvändigt eftersom mediet saknar tillväxthormoner, lipider och proteiner som är avgörande för cellutvecklingen.

DMEM:Ham's F12 innehåller ett pH-buffert-system och kompletteras ofta med fenolrött, en pH-indikator. Odlade celler i DMEM:Ham's F12, eller i något annat medium som använder bikarbonatbuffertsystemet, kräver en kontrollerad CO2-miljö på 5-10% för att upprätthålla lämpliga pH-nivåer.


Kvalitetskontroll

Sterilt filtrerad


Förvaring och hållbarhetstid

Förvaras vid +2°C till +8°C, skyddad från ljus.
Efter öppnandet, förvara vid 4°C och använd inom 6-8 veckor.


Förhållanden vid leverans

Omgivande temperatur


Underhåll

Förvaras i kylskåp vid +2°C till +8°C i mörker. Undvik frysning och frekvent uppvärmning till +37°C, eftersom det försämrar produktkvaliteten.
Värm inte upp mediet över 37°C och använd inte okontrollerade värmekällor som t.ex. mikrovågsugnar.
Om endast en del av mediet ska användas, ta ut den mängd som behövs och värm det till rumstemperatur före användning.


Sammansättning



Kategori
Komponenter
Koncentration (mg/L)


Aminosyror
Glycin
18.75


L-Alanin
4.45


L-arginin HCl
147.50


L-Asparagin H₂O
7.50


L-Asparaginsyra
6.65


L-cystein HCl H₂O
17.56


L-cystin 2 HCl
31.29


L-glutaminsyra
7.35


L-glutamin
365.00


L-Histidin HCl H₂O
31.48


L-Isoleucin
54.47


L-Leucin
59.05


L-Lysin HCl
91.25


L-metionin
17.24


L-fenylalanin
35.48


L-prolin
17.25


L-Serin
26.25


L-Threonin
53.45


L-tryptofan
9.02


L-Tyrosin Dinatriumsalt
48.10


L-Valin
52.85


Vitaminer
D-Biotin
0.0035


Kolinklorid
8.98


D-kalciumpantotenat
2.24


Folsyra
2.66


myo-Inositol
12.60


Nikotinamid
2.02


Pyridoxin HCl
0.031


Pyridoxal HCl
2.00


Riboflavin
0.219


Tiamin HCl
2.17


Vitamin B12
0.68


Oorganiska salter
CaCl₂ 2 H₂O
154.50



CuSO₄ 5 H₂O
0.0013



Fe(NO₃)₃ 9 H₂O
0.05



FeSO₄ 7 H₂O
0.417



KCl
311.80



MgCl₂ 6 H₂O
61.20



MgSO₄
48.84



NaCl
6996.00



NaHCO₃
1200.00



Na₂HPO₄
71.02



NaH₂PO₄
54.30



ZnSO₄ 7 H₂O
0.432


Övriga komponenter
D-Glukos
3151.00


Hypoxantin
2.40


HEPES
3574.50


Linolsyra
0.042


Liponsyra
0.105


Fenolrött natriumsalt
8.63


Putrescin 2 HCl
0.081


Natriumpyruvat
55.00


Tymidin
0.365

Accutase Cell Dissociation Reagent
- Ett skonsamt alternativ till Trypsin
Accutase är en cellavskiljningslösning som revolutionerar cellodlingsindustrin. Det är en blandning av proteolytiska och kollagenolytiska enzymer som efterliknar effekten av trypsin och kollagenas. Till skillnad från trypsin innehåller Accutase inga däggdjurs
- eller bakteriekomponenter och är mycket skonsammare mot cellerna, vilket gör det till en idealisk lösning för rutinmässig avskiljning av celler från vanliga plastbehållare för vävnadsodling och plastbehållare med adhesionsbeläggning. I det här blogginlägget går vi igenom fördelarna och användningsområdena för Accutase och hur det förändrar spelreglerna för cellodling.
Fördelar med Accutase
Accutase har flera fördelar jämfört med traditionella trypsinlösningar. För det första kan det användas när det behövs en skonsam och effektiv avskiljning av en adherent cellinje, vilket gör det till en direkt ersättning för trypsin. För det andra fungerar Accutase mycket bra på embryonala och neuronala stamceller, och det har visat sig att dessa cellers viabilitet bibehålls efter passering. För det tredje bevarar Accutase de flesta epitoper för efterföljande flödescytometrianalys, vilket gör den idealisk för analys av cellytemarkörer.
Dessutom behöver Accutase inte neutraliseras vid passering av adherenta celler. Genom att tillsätta mer media efter att cellerna har delats späds Accutase ut så att det inte längre kan lossa cellerna. Detta eliminerar behovet av ett inaktiveringssteg och sparar tid för cellodlingsteknikerna. Slutligen behöver Accutase inte alikeras, och en flaska är stabil i kylskåpet i 2 månader.
Tillämpningar av Accutase
Accutase är en direkt ersättning för trypsinlösning och kan användas för passering av cellinjer. Dessutom fungerar Accutase bra när celler lossas för analys av många cellytmarkörer med hjälp av flödescytometri och för cellsortering. Andra nedströmsapplikationer för Accutase-behandling inkluderar analys av cellytmarkörer, virustillväxtanalys, cellproliferation, tumörcellsmigrationsanalyser, rutinmässig cellpassage, produktionsuppskalning (bioreaktor) och flödescytometri.
Sammansättning av Accutase
Accutase innehåller inga däggdjurs
- eller bakteriekomponenter och är en naturlig enzymblandning med proteolytisk och kollagenolytisk enzymaktivitet. Den är formulerad i en mycket lägre koncentration än trypsin och kollagenas, vilket gör den mindre toxisk och skonsammare, men lika effektiv.
Effektiviteten hos Accutase
Accutase har visat sig vara effektivt när det gäller att avlägsna primära celler och stamceller och bibehålla hög cellviabilitet jämfört med enzymer av animaliskt ursprung, t.ex. trypsin. 100% av cellerna återvinns efter 10 minuter, och det är ingen fara att låta cellerna ligga i Accutase i upp till 45 minuter, tack vare Accutases autodigestion.
Sammanfattningsvis
Sammanfattningsvis är Accutase en kraftfull lösning som håller på att förändra spelreglerna för cellodling. Med sin skonsamma natur, effektivitet och mångsidighet är Accutase det perfekta alternativet till trypsin. Om du letar efter en tillförlitlig och effektiv lösning för cellavskiljning är Accutase lösningen för dig.

Produktöversikt
Volym: 100 ml Förvaring: ≤-15°C Sterilitet: Sterilt filtrerad
Antibiotic/Antimycotic Solution (100x) är ett sterilt, bruksfärdigt koncentrat som är utformat för att minska riskerna för mikrobiell kontaminering vid cellodling och relaterade laboratorieapplikationer. Denna 100x-lösning innehåller en väletablerad kombination av penicillin, streptomycin och amfotericin B, vilket ger en bredspektrig antimikrobiell aktivitet mot grampositiva och gramnegativa bakterier, jästsvampar och filamentösa svampar. Formuleringen är lämplig för användning i eukaryota cellkulturer, bakteriemedier och andra kontaminationskänsliga system, vilket stöder en ren och konsekvent laboratorieverksamhet.
Tillämpning och fördelar Denna lösning är optimerad för rutinmässiga forskningsprotokoll och används ofta för att upprätthålla aseptiska förhållanden i arbetsflöden för cellodling. Den ger tillförlitlig prestanda i kontamineringskänsliga miljöer och hjälper forskare att minska risken för mikrobiell överväxt utan att äventyra cellernas hälsa eller experimentens reproducerbarhet. Den sterilfiltrerade formuleringen eliminerar behovet av ytterligare solubiliseringssteg, vilket ger en strömlinjeformad medieberedning och minskar variabiliteten i de dagliga laboratorieprocedurerna.
Användning och kompatibilitet För att uppnå standardiserade arbetskoncentrationer, späd lösningen 1:100 i ditt kompletta odlingsmedium. Produkten är kompatibel med ett brett spektrum av mammaliecellinjer och basala medier. Med konsekvent lagertillgänglighet kan forskare dra nytta av pålitlig leveranskontinuitet och förenklad logistikplanering. Lösningen ska förvaras vid ≤ -15 °C och skyddas från upprepade frys
- och upptiningscykler för att bibehålla stabiliteten. Endast för forskningsändamål. Ej för användning i diagnostiska eller terapeutiska procedurer. Ej för användning på människor eller djur.

Fosfatbuffrad saltlösning (PBS)
Fosfatbuffrad saltlösning (PBS) är en buffertlösning som används i stor utsträckning inom biologisk och kemisk forskning. Den spelar en avgörande roll för att upprätthålla pH-balansen och osmolariteten under olika experimentella procedurer, inklusive vävnadsbearbetning och cellodling. Vår PBS-lösning är noggrant formulerad med ingredienser med hög renhet för att säkerställa stabilitet och tillförlitlighet i varje experiment. Osmolariteten och jonkoncentrationerna i vår PBS efterliknar i hög grad de som finns i människokroppen, vilket gör den isotonisk och giftfri för de flesta celler.

Sammansättning av vår PBS-lösning
Vår PBS-lösning är en pH-justerad blandning av fosfatbuffertar och saltlösningar av ultrapur kvalitet. Vid en 1X arbetskoncentration innehåller den:

8000 mg/L natriumklorid (NaCl)
200 mg/L kaliumklorid (KCl)
1150 mg/L Natriumfosfat dibasisk vattenfri (Na2HPO4)
200 mg/L Kaliumfosfat monobasiskt vattenfritt (KH2PO4)

Denna sammansättning säkerställer en optimal pH
- och jonbalans, lämplig för ett brett spektrum av biologiska tillämpningar.

Tillämpningar av vår PBS-lösning
Vår PBS-lösning är idealisk för olika tillämpningar inom biologisk forskning. Dess isotoniska och giftfria egenskaper gör den lämplig för utspädning av substanser och sköljning av cellbehållare. PBS-lösningar som innehåller EDTA är effektiva för att frigöra fastsittande och klumpade celler. Tvåvärda metaller som zink bör dock inte tillsättas i PBS, eftersom det kan orsaka utfällning. I sådana fall rekommenderas Good's buffertar. Dessutom är vår PBS-lösning ett godtagbart alternativ till viralt transportmedium för transport och förvaring av RNA-virus, inklusive SARS-CoV-2.

Kvalitetskontroll

Sterilt filtrerad


Förvaring och hållbarhetstid

Förvaras vid +2°C till +25°C, skyddat från ljus.
Efter öppnandet, förvara vid 2°C till 25°C och använd inom 24 månader.


Förhållanden vid leverans

Omgivande temperatur


Underhåll

Förvaras i kylskåp vid +2°C till +8°C i mörker. Undvik frysning och frekvent uppvärmning till +37°C, eftersom det försämrar produktkvaliteten.
Värm inte upp mediet över 37°C och använd inte okontrollerade värmekällor som t.ex. mikrovågsugnar.
Om endast en del av mediet ska användas, ta ut den mängd som behövs och värm det till rumstemperatur före användning.

Sammansättning



Kategori
Komponenter
Koncentration (mg/L)


Salter
Kaliumklorid
200



Kaliumfosfat monobasiskt vattenfritt
200



Natriumklorid
8000



Natriumfosfat dibasisk vattenfri
1150

Organism	Råtta
Vävnad	Hjärta, myokardium

Organism	Råtta
Vävnad	Skelettmuskel

Organism	Mus
Vävnad	Muskler