培养基 199,w:2.7 mM 稳定谷氨酰胺,w:2.2 g/L NaHCO3,w:EBSS
培养基 199 是一种用途广泛的细胞培养基,专门用于培养原代外植体。这种全面的培养基结合了必需维生素、氨基酸和其他因子,可为各种类型的细胞提供完全确定的营养源。它特别适用于非转化细胞,是生物研究的宝贵工具。
199 培养基在该领域有广泛的应用。它能有效维持积液-卵母细胞复合体(COC),支持卵母细胞的体外成熟。此外,在德国荷斯坦奶牛卵子采集过程中,它还可用于冲洗抽吸管路。此外,199 培养基还是培养大鼠心脏内皮细胞的理想培养基。这些应用证明了 199 培养基的多功能性和对各种实验需求的适应性。
历史
20 世纪 50 年代 199 培养基的开发标志着组织培养基的重大进步。在它问世之前,许多培养基都依赖于动物源性产品和组织提取物。然而,摩根及其同事为细胞培养配制了一种完全明确的营养源,从而彻底改变了这一领域。通过对维生素、氨基酸和其他因素的不同组合进行实验,他们发现了 199 培养基的特殊生长促进特性。
质量控制
- pH = 7.2 +/- 0.02,温度 20-25°C。
- 每批产品都经过无菌、无支原体和细菌测试。
保存
- 避光冷藏,温度为 +2°C 至 +8°C。冷冻和加温至 +37°C 会降低产品的质量。
- 不要将培养基加热到 37 摄氏度以上或使用不可控的热源(如微波炉)。
- 如果只需使用部分培养基,可将其从瓶中取出,在室温下加热。
- 除基本培养基外,其他培养基的保质期为自生产日期起 8 周。
组成
| 成分 | 毫克/升 | |
| 无机盐 | 氯化钙 x 2H2O | 264,92 |
| 硝酸铁 (III) x 9H2O | 0,72 | |
| 硫酸镁 | 97,67 | |
| 氯化钾 | 400,00 | |
| 乙酸钠 x 3H2O | 82,95 | |
| 氯化钠 | 6,800.00 | |
| 磷酸二氢钠 x H2O | 140,00 | |
| 其他成分 | 腺嘌呤硫酸盐 | 10,00 |
| 腺嘌呤核苷酸 | 0,20 | |
| ATP | 1,00 | |
| 胆固醇 | 0,20 | |
| 2'-脱氧核糖 | 0,50 | |
| 无水 D(+)-葡萄糖 | 1,000.00 | |
| 谷胱甘肽(红色) | 0,05 | |
| 鸟嘌呤 x HCl | 0,30 | |
| 次黄嘌呤 | 0,30 | |
| 酚红 | 10,00 | |
| D-核糖 | 0,50 | |
| 胸腺嘧啶 | 0,30 | |
| 吐温 80 | 4,90 | |
| 尿嘧啶 | 0,30 | |
| 黄嘌呤 | 0,30 | |
| NaHCO3 | 2,200.00 | |
| 氨基酸 | 左旋丙氨酸 | 25,00 |
| L-Arginine x HCl | 70,00 | |
| L-天门冬氨酸 | 30,00 | |
| L-Cysteine x HCl x H2O | 0,10 | |
| L-胱氨酸 | 20,00 | |
| 稳定的 L-谷氨酰胺 | 149,00 | |
| L-谷氨酸 | 67,00 | |
| 甘氨酸 | 50,00 | |
| L 组氨酸 x HCl x H2O | 21,88 | |
| L-羟脯氨酸 | 10,00 | |
| L-异亮氨酸 | 20,00 | |
| L-亮氨酸 | 60,00 | |
| L 赖氨酸 x HCl | 70,00 | |
| L-蛋氨酸 | 15,00 | |
| L-苯丙氨酸 | 25,00 | |
| L 脯氨酸 | 40,00 | |
| L -丝氨酸 | 25,00 | |
| L-苏氨酸 | 30,00 | |
| 左旋色氨酸 | 10,00 | |
| L-酪氨酸 | 40,00 | |
| L-Valine | 25,00 | |
| 维生素 | 4-氨基苯甲酸 | 0,05 |
| 抗坏血酸 | 0,05 | |
| D(+)-生物素 | 0,01 | |
| 骨化醇 | 0,10 | |
| 泛酸钙 | 0,01 | |
| 氯化胆碱 | 0,50 | |
| 叶酸 | 0,01 | |
| 肌醇 | 0,05 | |
| 甲萘醌 | 0,01 | |
| 烟酸 | 0.025 | |
| 烟酰胺 | 0.025 | |
| 吡哆醛盐酸盐 | 0.025 | |
| 吡哆醇盐酸盐 | 0.025 | |
| 核黄素 | 0,01 | |
| DL-α-生育酚磷酸二钠盐 | 0,01 | |
| 硫胺素盐酸盐 | 0,01 | |
| 维生素 A 醋酸酯 | 0,14 |