A549-RFP細胞
一般情報
| 説明 | A549-RFPは、ヒトA549肺腺癌細胞株の蛍光標識派生株であり、リアルタイム可視化および追跡を可能にするため、赤色蛍光タンパク質(RFP)を恒常的に発現するよう改変されている。親株であるA549細胞株は成人ドナー由来の肺腺癌から樹立され、上皮様形態と付着性増殖特性を示す。 A549細胞は、サイトケラチンの発現や界面活性剤関連タンパク質産生能など、II型肺胞上皮細胞の特徴を保持している。安定的なRFP発現カセットの導入により、親株の固有の増殖性および代謝特性を著しく変化させることなく持続的な蛍光発現が可能となり、A549-RFPは経時的イメージング研究に適している。 大規模がん細胞パネル内におけるA549細胞の機能的特性評価では、細胞サイズ・タンパク質含有量・タンパク質合成速度が細胞体積と正の相関を示し、大型細胞ほど増殖速度が遅い傾向が確認された。比較解析では、A549細胞は比較的小型で増殖速度の速い上皮性がん細胞株に位置づけられる一方、大型で間葉系様細胞はビメンチン発現が高くE-カドヘリンレベルが低い。 これらの代謝的・表現型の差異は実験解釈において重要である。タンパク質合成速度や代謝流は細胞サイズに比例し、増殖やmTOR制御の同化経路を標的とする薬剤への感受性に影響を与えるためである。RFP修飾は、直接可視化を可能としながらも、A549細胞がこうした代謝・薬理学的調査に適した特性を維持する。 A549-RFPは、蛍光標識により腫瘍細胞と間質・宿主成分の識別を容易にするため、共培養系、同所性・異所性異種移植モデル、浸潤・転移アッセイで広く利用されている。 安定した赤色蛍光は、生細胞イメージング、ハイコンテンツスクリーニング、フローサイトメトリーによる定量化、生体内光学イメージングなどの応用を支える。よく特徴づけられた肺腺癌モデルの追跡可能な変異体として、A549-RFPは、in vitroおよびin vivo環境における腫瘍細胞増殖、上皮間葉転換、薬剤応答、腫瘍-微小環境相互作用の研究のための堅牢なプラットフォームを提供する。 |
|---|---|
| 生物 | 人間 |
| 組織 | 肺 |
| 病気 | 肺腺がん |
| 同義語 | A 549、A549、NCI-A549、A549/ATCC、A549 ATCC、A549ATCC、hA549 |
特徴
| 年齢 | 58年 |
|---|---|
| 性別 | 男性 |
| エスニシティ | 白人 |
規制データ
| 引用 | A549-RFP(Cytionカタログ番号 305659) |
|---|---|
| バイオセーフティレベル | 1 |
| NCBI_TaxID | 9606 |
| セロサウルス・アクセション | CVCL_0023 |
| GMOステータス | GMO-S1: このA549肺癌細胞株は、赤色蛍光イメージングを可能にするレンチウイルスRFP構築体を含有する。この分類はドイツ国内でのみ適用され、その他の地域では異なる場合がある。 |
生体分子データ
| タンパク質発現 | 提案依頼書 |
|---|---|
| 三井住友海上ステータス | 変異:p.Gly12Ser、ホモ接合体;変異:p.Gln37Ter、ホモ接合体 |
| 変異プロファイル | 変異:p.Gly12Ser、ホモ接合体;変異:p.Gln37Ter、ホモ接合体 |
ハンドリング
| 培地 | DMEM、w:4.5g/Lグルコース、w:4mM L-グルタミン、w:3.7g/L NaHCO3、w:1.0mMピルビン酸ナトリウム(Cytion品番820300a) |
|---|---|
| サプリメント | 培地に10% FBSを加える |
| 解離試薬 | アキュターゼ |
| 倍増時間 | 20~40時間 |
| フリーズ・ミディアム | 凍結保存培地としては、解凍後の生存率を十分に高めるため、完全増殖培地+10%DMSOを使用している。 |
| 細胞の解凍と培養 |
|
| インキュベーションの雰囲気 | 37℃、5%CO2、加湿雰囲気。 |
| 配送条件 | 凍結保存された細胞株は、輸送中約-78℃を維持するのに十分な保冷剤とともに、有効な断熱包装でドライアイスとともに輸送される。受領後、直ちに容器を検査し、遅滞なくバイアルを適切な保管場所に移してください。 |
| 保管条件 | 長期保存の場合、バイアルを-150~-196℃の気相液体窒素に入れる。80℃での保存は、液体窒素に移す前の短い暫定措置としてのみ許容される。 |
品質管理/遺伝子プロファイル/HLA
資材譲渡契約
単一研究施設内での内部研究のみを目的としてCytion細胞株をご利用になる場合は、当社材料移転契約書(MTA)にご記入・ご署名の上、ご注文書と併せてご提出ください。
商業用途(サービス提供業務、品質管理試験、製品リリース、診断用途、規制研究などを含むがこれらに限定されない)については、プロジェクトに適した契約書を作成するため、使用目的フォームにご記入ください。
ご注意:本MTAは特定の細胞株にのみ適用されます。製品ページに本告知およびMTA文書が表示されている場合、当該契約が適用されます。MTAの対象外となる細胞株については、契約に関する記載は表示されません。MTAはアメリカ大陸、中国、台湾のお客様には適用されません。該当する契約書をご希望の場合は、当社の米国法人までお問い合わせください。
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必要な製品
必要な製品
凍結培地 CM-1 - 50 ml凍結保存培地のバリエーション: 50ミリリットルCytion's Freeze Medium CM-1 は、融解後の細胞の生存率と機能性を最高レベルに保つように設計された最先端の凍結保存培地です。この汎用性の高い培地は、ヒトおよび動物細胞を含む幅広い種類の細胞に適しており、多様な研究用途に不可欠なツールとなっています。凍結保護剤と必須栄養素を絶妙なバランスで配合したFreeze Medium CM-1は、凍結過程における氷結晶形成と細胞ストレスを最小限に抑え、細胞の完全性を維持します。
Freeze Medium CM-1の主な特徴は以下の通り:
幅広い適合性:プライマリー細胞、幹細胞、樹立細胞株など、幅広い種類の細胞に有効。
高い生存率融解後の細胞の回復と生存率を最大化するように最適化されており、信頼性の高い実験結果を保証する。
すぐに使えるすぐに使用できるように調製・滅菌されているため、調製時間とコンタミネーションのリスクが軽減される。
安定性の向上:標準的な凍結保存条件下で一貫した性能を維持し、再現性のある結果を保証します。
長い保存期間:CM-1は血清を含む、すぐに使用可能な凍結保存培地で、冷蔵庫で最長1年間保存可能です。
細胞の凍結にCM-1を使用する
接着細胞および浮遊細胞の凍結にCM-1を使用するには、以下の手順に従う:
接着細胞の場合は、洗浄して培養基材から剥離する。浮遊細胞の場合は、そのまま次のステップに進む。
細胞を数え、適切な濃度であることを確認する。
細胞を遠心してペレット化し、CM-1凍結培地に再懸濁する。
再懸濁した細胞をクライオバイアルに移す。
細胞を長期保存に移す前に、緩慢凍結法を用いる。
方法
手順
手順
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マニュアル凍結
段階的に温度を下げ、細胞の生存性を確保する方法。
1️⃣ 細胞を凍結培地中、4℃のフリーザーに40分間置く。
2️ ⃣ -80℃のフリーザーに24時間移す。
3️ ⃣ 長期保存のため、細胞を液体窒素で保存する。
❄️
Mr.Frostyの使用
電力を使わずに凍結速度を制御できる便利な装置。
1️ ⃣ 細胞を凍結培地を入れたクライオバイアルに準備する。
2️ ⃣ Mr.Frosty容器にクライオバイアルを入れる。
3️⃣ 液体窒素に移す前に、-80℃で24時間保存する。
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コントロールレートフリーザー
サーモ・フィッシャー社などの高精度フリーザーで、温度を 制御して下げるように設計されている。
1️ ⃣ 徐々に温度が下がるように装置をプログラムする。
2️ ⃣ 準備した細胞をフリーザーに入れる。
3️ ⃣ 凍結サイクル終了後、細胞を液体窒素に移す。
クライオバイアルは-130℃以下で保存するか、長期保存のために液体窒素中で保存する。
成分
FBS、DMSO、グルコース、塩類を含む。
緩衝能:pH=7.2~7.6
Cytion's Freeze Medium CM-1 は、凍結保存のための信頼性の高いソリューションを提供し、幅広い研究用途において解凍後の高い細胞生存率と機能性を保証します。€59.00*アキュターゼバリエーション: 100ミリリットルAccutase 細胞剥離試薬
- トリプシンに代わる優しい試薬
Accutaseは、細胞培養業界に革命を起こす細胞剥離液です。タンパク質分解酵素とコラーゲン分解酵素の混合物で、トリプシンやコラゲナーゼの作用を模倣しています。トリプシンとは異なり、アキュターゼは哺乳類やバクテリアの成分を含まず、細胞に非常に優しいため、標準的な組織培養用プラスチックウェアや接着コーティングされたプラスチックウェアからの細胞の日常的な剥離に理想的なソリューションです。このブログ記事では、Accutaseの利点と使用法、そして細胞培養におけるAccutaseの変化をご紹介します。
アキュターゼの利点
Accutaseには、従来のトリプシン溶液と比較していくつかの利点がある。第一に、どのような付着細胞株でも、穏やかで効率的な剥離が必要な場合にはいつでも使用でき、トリプシンの直接的な代替品となる。第二に、Accutaseは胚性幹細胞や神経幹細胞に非常によく作用し、継代後もこれらの細胞の生存能力を維持することが示されている。第三に、アキュターゼは、その後のフローサイトメトリー解析のために、ほとんどのエピトープを保持するので、細胞表面マーカー解析に理想的である。
さらに、Accutaseは接着細胞を継代する際に中和する必要がない。細胞を分割した後、さらに培地を加えることで、Accutaseは希釈され、細胞を剥離することができなくなる。これにより、不活性化ステップが不要になり、細胞培養技術者の時間を節約することができる。最後に、Accutaseは分注の必要がなく、1瓶は冷蔵庫で2ヶ月間安定である。
Accutase の用途
Accutase は、トリプシン溶液の直接的な代替品であ り、細胞株の継代に使用することができる。さらに、Accutaseは、フローサイトメトリーを用いた多くの細胞表面マーカーの分析および細胞選別のために細胞を剥離する際にも優れた性能を発揮する。Accutase処理のその他の下流用途としては、細胞表面マーカーの分析、ウイルス増殖アッセイ、細胞増殖、腫瘍細胞遊走アッセイ、ルーチン細胞継代、生産スケールアップ(バイオリアクター)、フローサイトメトリーなどがある。
アキュターゼの組成
Accutaseは、哺乳動物やバクテリアの成分を含まず、タンパク質分解酵素活性とコラーゲン分解酵素活性を持つ天然酵素混合物である。アキュターゼは、トリプシンやコラゲナーゼよりもはるかに低い濃度で配合されているため、毒性が低く体に優しいが、効果は同等である。
アキュターゼの効率
アキュターゼは、トリプシンのような動物由来の酵素と比較して、初代細胞や幹細胞を効率的に剥離し、高い細胞生存率を維持することが示されている。10分後には100%の細胞が回収され、Accutaseの自己消化作用により、細胞をAccutase中に最長45分間放置しても害はない。
要約すると
結論として、Accutaseは、細胞培養の常識を変える強力なソリューションである。その穏やかな性質、効率性、多用途性により、 Accutase はトリプシンの理想的な代替品である。細胞剥離のための信頼性が高く効率的な解決策をお探しなら、Accutaseはあなたのための解決策です。€75.00*抗生物質/抗真菌剤溶液(100倍)製品概要
容量:100ml 保存:15℃以下 無菌:無菌ろ過
抗生物質/抗真菌剤溶液(100x)は、細胞培養および関連するラボアプリケーションにおける微生物汚染リスクを低減するために設計された、無菌ですぐに使用できる濃縮液です。この100倍希釈液は、ペニシリン、ストレプトマイシン、アムホテリシンBの定評ある配合で、グラム陽性菌、グラム陰性菌、酵母、糸状菌に対して幅広い抗菌活性を示します。この製剤は、真核細胞培養、細菌培地、およびその他の汚染に敏感なシステムでの使用に適しており、クリーンで一貫性のあるラボ業務をサポートします。
用途と利点 日常的な研究プロトコール用に最適化されたこのソリューションは、細胞培養ワークフローにおける無菌状態の維持に広く使用されています。汚染に敏感な環境で信頼性の高い性能を発揮し、細胞の健康状態や実験の再現性を損なうことなく、微生物の過剰増殖のリスクを低減します。無菌ろ過製剤は、追加の可溶化工程を必要とせず、合理的な培地調製をサポートし、日常的なラボ手順のばらつきを低減します。
使用法と適合性 標準作業濃度を達成するには、溶液を100分の1に希釈し、完全培地に添加します。本製品は、広範な哺乳類細胞株および基礎培地に適合します。安定した在庫により、研究者は信頼できる供給継続性と簡素化されたロジスティクス計画の恩恵を受けることができます。安定性を維持するため、溶液は-15℃以下で保存し、凍結融解の繰り返しから保護してください。 研究用のみ。診断や治療には使用できません。ヒトおよび動物には使用できません。€45.00*PBSリン酸緩衝生理食塩水(PBS)溶液
リン酸緩衝生理食塩水(PBS)は、生物学および化学の研究において広く使用されている緩衝液である。組織処理や細胞培養を含む様々な実験手順において、pHバランスと浸透圧の維持に重要な役割を果たしています。当社のPBS溶液は、あらゆる実験において安定性と信頼性を確保するために、高純度成分を用いて細心の注意を払って調合されています。当社のPBSの浸透圧とイオン濃度は、人体の浸透圧に近いため、ほとんどの細胞に対して等張で無毒です。
PBS溶液の組成
当社のPBS溶液は、超高純度グレードのリン酸緩衝液と生理食塩水をpH調整したものです。1倍濃度で、以下を含む:
8000 mg/L 塩化ナトリウム(NaCl)
200 mg/L 塩化カリウム(KCl)
1150 mg/L 二塩基性無水リン酸ナトリウム (Na2HPO4)
200 mg/L 無水リン酸一塩基性カリウム (KH2PO4)
この組成により、最適なpHとイオンバランスが確保され、幅広い生物学的用途に適しています。
PBS溶液の用途
当社のPBS溶液は、生物学研究における様々な用途に最適です。等張で無毒性であるため、物質の希釈や細胞容器の洗浄に適しています。EDTAを含むPBS溶液は、付着・凝集した細胞の剥離に効果的です。しかし、亜鉛のような二価の金属は沈殿の原因となるため、PBSに添加すべきではない。このような場合は、Good's緩衝液を推奨する。さらに、当社のPBS溶液は、SARS-CoV-2を含むRNAウイルスの輸送および保存のためのウイルス輸送培地の代替品として許容される。
品質管理
無菌ろ過
保管および保存期間
遮光し、+2℃~+25℃で保存する。
開封後は2℃~25℃で保存し、24ヶ月以内に使用してください。
出荷条件
周囲温度
メンテナンス
冷蔵で+2℃~+8℃の暗所に保管する。製品の品質を低下させるため、凍結や+37℃への頻繁な加温は避けてください。
培地を37℃以上に加熱したり、電子レンジのような制御されていない熱源を使用しないでください。
培地の一部のみを使用する場合は、必要な量を取り出し、室温まで温めてから使用してください。
組成
カテゴリー
成分
濃度(mg/L)
塩類
塩化カリウム
200
無水リン酸一塩基性カリウム
200
塩化ナトリウム
8000
無水リン酸二塩基性ナトリウム
1150€20.00* -
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