มีเดียม 199, w: 2.7 mM สเตเบิลกลูตามีน, w: 2.2 g/L NaHCO3, w: EBSS
Medium 199 เป็นอาหารเลี้ยงเซลล์ที่มีความหลากหลายและใช้กันอย่างแพร่หลาย ออกแบบมาโดยเฉพาะสำหรับการเพาะเลี้ยงเซลล์ต้นกำเนิดจากเนื้อเยื่อ (primary explants) อาหารเลี้ยงเซลล์นี้ประกอบด้วยวิตามินที่จำเป็น กรดอะมิโน และปัจจัยอื่น ๆ ที่จำเป็นอย่างครบถ้วน เพื่อเป็นแหล่งสารอาหารที่สมบูรณ์สำหรับเซลล์หลากหลายชนิด เหมาะอย่างยิ่งสำหรับเซลล์ที่ไม่ผ่านการเปลี่ยนแปลงพันธุกรรม (non-transformed cells) จึงเป็นเครื่องมือที่มีคุณค่าอย่างยิ่งสำหรับการวิจัยทางชีววิทยา
Medium 199 มีการใช้งานที่หลากหลายในภาคสนาม สามารถรักษาคอมเพล็กซ์ของเซลล์ไข่และเซลล์รอบไข่ (COC) ได้อย่างมีประสิทธิภาพ และสนับสนุนการเจริญเติบโตของเซลล์ไข่ในหลอดทดลองนอกจากนี้ ยังใช้ในการล้างสายดูดระหว่างการเก็บไข่จากวัวพันธุ์เยอรมันโฮลสไตน์อีกด้วย นอกจากนี้ สารอาหาร 199 ยังเป็นสารอาหารที่ยอดเยี่ยมสำหรับการเพาะเลี้ยงเซลล์เยื่อบุผนังหลอดเลือดหัวใจที่ได้จากหนูอีกด้วย การใช้งานเหล่านี้แสดงให้เห็นถึงความหลากหลายและความสามารถในการปรับตัวของสารอาหาร 199 ต่อความต้องการในการทดลองต่างๆ
ประวัติศาสตร์
การพัฒนาของ Medium 199 ในทศวรรษ 1950 ถือเป็นความก้าวหน้าครั้งสำคัญในสื่อเพาะเลี้ยงเนื้อเยื่อ ก่อนที่จะมีการแนะนำ Medium 199 สื่อเพาะเลี้ยงหลายชนิดต้องพึ่งพาผลิตภัณฑ์ที่ได้จากสัตว์และสารสกัดจากเนื้อเยื่อ อย่างไรก็ตาม Morgan และคณะได้ปฏิวัติวงการด้วยการคิดค้นแหล่งสารอาหารที่กำหนดไว้อย่างสมบูรณ์สำหรับเซลล์เพาะเลี้ยง ผ่านการทดลองที่ผสมผสานวิตามิน กรดอะมิโน และปัจจัยอื่นๆ พวกเขาได้ค้นพบคุณสมบัติส่งเสริมการเจริญเติบโตที่โดดเด่นของ Medium 199
การควบคุมคุณภาพ
- pH = 7.2 +/- 0.02 ที่ 20-25°C.
- แต่ละล็อตได้รับการทดสอบความปราศจากเชื้อและความไม่มีเชื้อราและแบคทีเรียแล้ว
การบำรุงรักษา
- เก็บไว้ในตู้เย็นที่อุณหภูมิ +2°C ถึง +8°C ในที่มืด การแช่แข็งและการอุ่นถึง +37°C จะลดคุณภาพของผลิตภัณฑ์
- ห้ามให้ความร้อนกับตัวกลางเกิน 37° C หรือใช้แหล่งความร้อนที่ไม่สามารถควบคุมได้ (เช่น เตาไมโครเวฟ)
- หากจะใช้เพียงบางส่วนของสารละลาย ให้ตักปริมาณที่ต้องการออกจากขวด แล้วนำไปอุ่นที่อุณหภูมิห้อง
- อายุการเก็บรักษาสำหรับทุกชนิดของอาหารเลี้ยงเชื้อ ยกเว้นอาหารเลี้ยงเชื้อพื้นฐาน คือ 8 สัปดาห์นับตั้งแต่วันที่ผลิต
องค์ประกอบ
| ส่วนประกอบ | มิลลิกรัมต่อลิตร | |
| เกลืออนินทรีย์ | แคลเซียมคลอไรด์ x 2H2O | 264,92 |
| เหล็ก (III) นิเตรต x 9H2O | 0.72 | |
| แมกนีเซียมซัลเฟต | 97,67 | |
| โพแทสเซียมคลอไรด์ | สี่ร้อย | |
| โซเดียมอะซิเตต x 3H2O | 82,95 | |
| โซเดียมคลอไรด์ | หกพันแปดร้อยบาท | |
| โซเดียมไดไฮโดรเจนฟอสเฟต x H2O | หนึ่งร้อยสี่สิบพัน | |
| ส่วนประกอบอื่น ๆ | อะดีนีนซัลเฟต | 10,000 |
| AMP | 0.20 | |
| เอทีพี | หนึ่งพัน | |
| โคเลสเตอรอล | 0.20 | |
| 2'-ดีออกซีไรโบส | 0.50 | |
| กลูโคส (D(+)-กลูโคส) ชนิดไม่มีน้ำ | หนึ่งพันบาทถ้วน | |
| กลูตาไธโอน (สีแดง) | 0.05 | |
| กัวนีน x เอชคลอไรด์ | 0.30 | |
| ไฮโปแซนทีน | 0.30 | |
| ฟีโนล เรด | 10,000 | |
| ดี-ไรโบส | 0.50 | |
| ไทมีน | 0.30 | |
| ทวีน 80 | 4,90 | |
| ยูราซิล | 0.30 | |
| แซนทีน | 0.30 | |
| โซเดียมไบคาร์บอเนต | สองพันสองร้อยบาท | |
| กรดอะมิโน | แอล-อะลานีน | ยี่สิบห้าพัน |
| แอล-อาร์จินีน x เฮกซะไฮเดรต | เจ็ดสิบพัน | |
| กรดแอล-แอสพาร์ติก | สามหมื่น | |
| แอล-ซิสเตอีน x เฮกซะไฮโดรคลอไรด์ x น้ำ | 0,10 | |
| แอล-ซิสตีน | ยี่สิบพัน | |
| แอล-กลูตามีน คงตัว | หนึ่งแสนสี่หมื่นเก้าพัน | |
| กรดแอล-กลูตามิก | 67,00 | |
| ไกลซีน | ห้าสิบพัน | |
| แอล-ฮิสทิดีน x เฮกซะไฮโดรคลอไรด์ x น้ำ | 21,88 | |
| แอล-ไฮดรอกซีโพรลีน | 10,000 | |
| แอล-ไอโซลิวซีน | ยี่สิบพัน | |
| แอล-ลิวซีน | หกสิบพัน | |
| แอล-ไลซีน x เฮกซะไฮโดรคลอไรด์ | เจ็ดสิบพัน | |
| แอล-เมไทโอนีน | 15,000 | |
| แอล-ฟีนิลอะลานีน | ยี่สิบห้าพัน | |
| แอล-โพรลีน | สี่สิบพัน | |
| แอล-ซีรีน | ยี่สิบห้าพัน | |
| แอล-ทรีโอนีน | สามหมื่น | |
| แอล-ทริปโตเฟน | 10,000 | |
| แอล-ไทโรซีน | สี่สิบ,00 | |
| แอล-วาลีน | ยี่สิบห้าพัน | |
| วิตามิน | กรดอะมิโนเบนโซอิก 4 | 0.05 |
| กรดแอสคอร์บิก | 0.05 | |
| ดี(+)-ไบโอติน | 0.01 | |
| แคลซิเฟอรอล | 0,10 | |
| ดี-แคลเซียมแพนโทเธเนต | 0.01 | |
| โคลีนคลอไรด์ | 0.50 | |
| กรดโฟลิก | 0.01 | |
| ไมโอ-อิโนซิทอล | 0.05 | |
| เมนาไดโอน | 0.01 | |
| กรดนิโคตินิก | 0.025 | |
| นิโคตินาไมด์ | 0.025 | |
| ไพริดอกซาล x เฮกซะไฮโดรคลอไรด์ | 0.025 | |
| ไพริดอกโซล x เฮกซะไฮโดรคลอไรด์ | 0.025 | |
| ไรโบฟลาวิน | 0.01 | |
| เกลือดิบฟอสเฟตของดีแอล-แอลฟา-โทโคเฟอรอล | 0.01 | |
| ไทอามีน x เฮกซะไฮโดรคลอไรด์ | 0.01 | |
| วิตามินเออะซิเตต | 0,14 |