การทดสอบไมโคพลาสมาแบบรวดเร็ว

ไมโคพลาสมาเป็นจุลินทรีย์ขนาดเล็กที่มีลักษณะเป็นโพรคาริโอตซึ่งมีขนาดเล็กเกินกว่าจะมองเห็นได้ด้วยกล้องจุลทรรศน์และไม่สามารถกำจัดได้ด้วยสารปฏิชีวนะทั่วไป ไมโคพลาสมาอาจส่งผลต่อการเจริญเติบโต การเพิ่มจำนวน และรูปร่างของเซลล์ในสายพันธุ์เซลล์ ซึ่งอาจนำไปสู่ผลการทดลองที่ไม่เชื่อถือได้ ประมาณ 15 ถึง 35% ของวัฒนธรรมเซลล์ในห้องปฏิบัติการมีการปนเปื้อนด้วยไมโคพลาสมา ดังนั้นจึงแนะนำให้มีการควบคุมอย่างสม่ำเสมอเพื่อรับประกันสภาพแวดล้อมที่ปราศจากไมโคพลาสมา

วิธีการวิเคราะห์

CLS ให้บริการทดสอบการตรวจหาเชื้อไมโคพลาสมาทั้งแบบระยะสั้นและระยะยาว สำหรับการทดสอบแบบระยะสั้น ตัวอย่างจะถูกทดสอบทันทีหลังจากมาถึง ในขณะที่การทดสอบแบบระยะยาวจะมีการเริ่มเพาะเลี้ยงเซลล์และทดสอบเซลล์หลังจากเพาะเลี้ยงเป็นเวลา 14 วันโดยไม่ใช้ยาปฏิชีวนะการทดสอบไมโคพลาสมาดำเนินการโดยใช้ระบบการตรวจจับสองจุด โดยใช้ทั้งชุดตรวจ PlasmoTest™ - Mycoplasma Detection Kit (Invivogen) และชุดตรวจ Certus QC – mycoADVANCED detection kit (Certus)

ตัวอย่าง

• สำหรับการทดสอบแบบรวดเร็ว กรุณาจัดเตรียมสารแขวนลอยเซลล์อย่างน้อย 50 µl ที่มีเซลล์ 50,000 เซลล์ สารแขวนลอยเซลล์สามารถจัดส่งที่อุณหภูมิห้องได้
• สำหรับการทดสอบพรีเมียม กรุณาจัดเตรียมเซลล์อย่างน้อย 1 ล้านเซลล์ในสารละลายแช่แข็งที่เหมาะสมเพื่อให้แน่ใจว่าเซลล์จะแข็งแรงและสมบูรณ์สำหรับการเพาะเลี้ยงและการทดสอบในขั้นตอนต่อไป กรุณาส่งตัวอย่างทางไปรษณีย์โดยใช้ความเย็นแห้ง
• กรุณากรอกแบบฟอร์มตัวอย่างการทดสอบไมโคพลาสมาและแนบมาพร้อมกับตัวอย่างของคุณในการจัดส่ง

การทดสอบรายงานผลด้วยวิธีวัดค่าสี

การทดสอบนี้เป็นวิธีวัดสีแบบใช้เซลล์เป็นตัวกลาง ในการมีไมโคพลาสมา สายพันธุ์เซลล์รายงานจะกระตุ้นการส่งสัญญาณซึ่งทำให้เกิดการเปลี่ยนแปลงของสีในตัวกลางจากสีแดงเป็นสีน้ำเงิน การทดสอบนี้ดำเนินการในจานหลุมหลายหลุมขนาด 96 หลุมสัญญาณถูกตรวจพบในไมโครเพลทสเปกโตรโฟโตมิเตอร์ที่ความยาวคลื่น 620-655 นาโนเมตร สามารถตรวจพบเชื้อไมโคพลาสมาและอะโคเลพลาสมาทุกสายพันธุ์ รวมถึงสิ่งปนเปื้อนอื่น ๆ ในเซลล์เพาะเลี้ยง เช่น แบคทีเรีย

การขยายตัวแบบอุณหภูมิคงที่

การขยายพันธุ์แบบคงอุณหภูมิเดียวเป็นวิธีทดสอบที่รวดเร็วและเชื่อถือได้ โดยอาศัยการขยายปริมาณดีเอ็นเอเฉพาะของไมโคพลาสมาควบคู่กับการตรวจจับแบบเรียลไทม์ด้วยสารเรืองแสงที่แทรกตัวในสายดีเอ็นเอ การทดสอบนี้สามารถตรวจพบเชื้อได้ 6 สายพันธุ์ที่พบบ่อยที่สุดซึ่งคิดเป็นมากกว่า 95% ของการปนเปื้อน ได้แก่ M.orale, M.hyorhinis, M.arginini, M.fermentans, M.hominis และ A.laidlawiiเนื่องจากความคล้ายคลึงของลำดับพันธุกรรม จึงสามารถตรวจพบเชื้อไมโคพลาสมาชนิดอื่น ๆ ได้เช่นกัน (M. pneumoniae, M. gallisepticum และ M. synoviae) เพื่อระบุว่าร่างการตัวอย่างมีเชื้อไมโคพลาสมาหรือไม่ จะทำการศึกษาอุณหภูมิหลอมละลาย (Tm)