DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3.1 กรัม/ลิตร กลูโคส, w: 2.5 มิลลิโมลาร์ L-กลูตามีน, w: 15 มิลลิโมลาร์ HEPES, w: 0.5 มิลลิโมลาร์ โซเดียมไพรูเวต, w: 1.2 กรัม/ลิตร NaHCO3
DMEM:Ham's F12 เป็นอาหารเลี้ยงเซลล์พื้นฐานที่ได้รับการยอมรับอย่างกว้างขวางและใช้กันอย่างแพร่หลายในงานวิจัยทางชีววิทยาในห้องปฏิบัติการเพาะเลี้ยงเซลล์ โดยทำหน้าที่เป็นแหล่งสารอาหารพื้นฐานสำหรับการเจริญเติบโตของเซลล์ต้นกำเนิดจากสัตว์เลี้ยงลูกด้วยนมหลากหลายชนิด โดยเฉพาะเมื่อมีการเติมเซรั่มจากเลือดวัวในครรภ์ (Fetal Bovine Serum: FBS)
สูตรเฉพาะนี้ผสมผสาน Dulbecco's Modified Eagle Medium (DMEM) และ Ham's F-12 (Ham's Nutrient Mixture F-12) ในอัตราส่วนที่แม่นยำ 1:1 การเติม L-glutamine ช่วยเสริมองค์ประกอบของสูตรนี้ให้ดียิ่งขึ้น
DMEM ซึ่งพัฒนามาจาก Eagle's Minimal Essential Medium (EMEM) มีความเข้มข้นของกรดอะมิโนและวิตามินสูงกว่าสูตรเดิม ในทางตรงกันข้าม Ham's F-12 มีพื้นฐานมาจาก Ham's F-10 medium โดยให้ชุดองค์ประกอบที่จำเป็นซึ่งเสริมกัน
เพื่อสนับสนุนการเจริญเติบโตของเซลล์อย่างเหมาะสม การเติม FBS ลงใน DMEM:Ham's F12 ที่ความเข้มข้นทั่วไป 5-10% เป็นวิธีปฏิบัติที่พบได้บ่อย การเติมนี้มีความจำเป็นเนื่องจากมีเดียขาดฮอร์โมนการเจริญเติบโต ไขมัน และโปรตีนที่จำเป็นต่อการพัฒนาของเซลล์
DMEM:Ham's F12 ประกอบด้วยระบบบัฟเฟอร์ pH และมักถูกเติมด้วยฟีโนลเรด ซึ่งเป็นตัวบ่งชี้ pH เซลล์ที่เพาะเลี้ยงใน DMEM:Ham's F12 หรืออาหารเลี้ยงเซลล์ใด ๆ ที่ใช้ระบบบัฟเฟอร์ไบคาร์บอเนต จำเป็นต้องอยู่ในสภาพแวดล้อมที่มี CO2 ควบคุมอยู่ที่ 5-10% เพื่อรักษาระดับ pH ที่เหมาะสม
การควบคุมคุณภาพ
- ผ่านการกรองแบบปลอดเชื้อ
การเก็บรักษาและอายุการเก็บรักษา
- เก็บไว้ที่ +2°C ถึง +8°C ป้องกันแสง
- เมื่อเปิดแล้ว ให้เก็บไว้ที่อุณหภูมิ 4°C และใช้ให้หมดภายใน 6–8 สัปดาห์
เงื่อนไขการจัดส่ง
- อุณหภูมิแวดล้อม
การบำรุงรักษา
- เก็บไว้ในตู้เย็นที่อุณหภูมิ +2°C ถึง +8°C ในที่มืด หลีกเลี่ยงการแช่แข็งและการอุ่นบ่อยครั้งถึง +37°C เนื่องจากจะทำให้คุณภาพของผลิตภัณฑ์ลดลง
- ห้ามให้ความร้อนกับตัวกลางเกิน 37°C หรือใช้แหล่งความร้อนที่ไม่สามารถควบคุมได้ เช่น เตาไมโครเวฟ
- หากจะใช้เพียงบางส่วนของสารให้ใช้ปริมาณที่ต้องการและอุ่นให้ถึงอุณหภูมิห้องก่อนใช้
องค์ประกอบ
| หมวดหมู่ | ส่วนประกอบ | ความเข้มข้น (มิลลิกรัมต่อลิตร) |
| กรดอะมิโน | ไกลซีน | 18.75 |
| แอล-อะลานีน | 4.45 | |
| แอล-อาร์จินีน เฮสเพอไรดิน | 147.50 | |
| แอล-แอสพาราจีน ไฮโดรเจน 2 อะตอม | 7.50 | |
| กรดแอล-แอสพาร์ติก | 6.65 | |
| แอล-ซิสเตอีน เอชซีแอล เอช₂โอ | 17.56 | |
| แอล-ซิสเตอีน 2 เฮกซอนไฮโดรคลอไรด์ | 31.29 | |
| แอล-กลูตามิก แอซิด | 7.35 | |
| แอล-กลูตามีน | 365.00 | |
| แอล-ฮิสทิดีน เฮกซะไฮโดรคลอไรด์ ไฮโดรเจน 2 โมเลกุล | 31.48 | |
| แอล-ไอโซลิวซีน | 54.47 | |
| แอล-ลิวซีน | 59.05 | |
| แอล-ไลซีน เฮกซะไฮโดรคลอไรด์ | 91.25 | |
| แอล-เมไทโอนีน | 17.24 | |
| แอล-ฟีนิลอะลานีน | 35.48 | |
| แอล-โพรลีน | 17.25 | |
| แอล-ซีรีน | 26.25 | |
| แอล-ทรีโอนีน | 53.45 | |
| แอล-ทริปโตเฟน | 9.02 | |
| แอล-ไทโรซีน ไดโซเดียมซัลต์ | 48.10 | |
| แอล-วาลีน | 52.85 | |
| วิตามิน | ดี-ไบโอติน | 0.0035 |
| โคลีนคลอไรด์ | 8.98 | |
| ดี-แคลเซียมแพนโทเธเนต | 2.24 | |
| กรดโฟลิก | 2.66 | |
| ไมโอ-อิโนซิทอล | 12.60 | |
| นิโคตินาไมด์ | 2.02 | |
| ไพริดอกซีน เฮเซ็กซ์คลอไรด์ | 0.031 | |
| ไพริดอกซาล เฮเซียมไฮโดรคลอไรด์ | 2.00 | |
| ไรโบฟลาวิน | 0.219 | |
| ไทอามีน เฮกซะไฮโดรคลอไรด์ | 2.17 | |
| วิตามินบี12 | 0.68 | |
| เกลืออนินทรีย์ | แคลเซียมคลอไรด์ 2 ไฮโดรเจน 2 ออกไซด์ | 154.50 |
| CuSO₄ 5 H₂O | 0.0013 | |
| เหล็ก(III)ไนเตรต 9 น้ำ 10 | 0.05 | |
| เฟอร์ริกซัลเฟต 7 น้ำ | 0.417 | |
| โพแทสเซียมคลอไรด์ | 311.80 | |
| แมกนีเซียมคลอไรด์ 6 น้ำ | 61.20 | |
| แมกนีเซียมซัลเฟต | 48.84 | |
| NaCl | 6996.00 | |
| โซเดียมไบคาร์บอเนต | 1200.00 | |
| Na₂HPO₄ | 71.02 | |
| NaH₂PO₄ | 54.30 | |
| ซิงค์ซัลเฟต 7 ไฮโดรเจนซัลเฟต | 0.432 | |
| ส่วนประกอบอื่น ๆ | ดี-กลูโคส | 3151.00 |
| ไฮโปแซนธิน | 2.40 | |
| HEPES | 3574.50 | |
| กรดไลโนเลอิก | 0.042 | |
| กรดไลโปอิก | 0.หนึ่งร้อยห้า | |
| โซเดียมฟีนอลเรด | 8.63 | |
| พุตเทรสซีน 2 เฮกซ์อะมิโนไคด์ | 0.081 | |
| โซเดียมไพรูเวต | 55.00 | |
| ไทมีดีน | 0.365 |