Ham's F12K Medium, w: 2.0 mM L-Glutamine, w: 2.0 mM Sodium pyruvate, w: 2.5 g/L NaHCO3
ขอแนะนำ Ham's F-12K (Kaighn's) Medium สื่ออาหารสูตรพิเศษที่พัฒนาต่อยอดจาก Ham's F-12 medium เพื่อตอบสนองความต้องการเฉพาะในงานวิจัยทางชีววิทยา สื่ออาหารขั้นสูงนี้มอบข้อได้เปรียบที่โดดเด่น ช่วยเพิ่มประสิทธิภาพในการเพาะเลี้ยงเซลล์ตับมนุษย์ต้นกำเนิด เซลล์ตับหนู และเซลล์ตับไก่ โดยเฉพาะอย่างยิ่งในสภาวะที่มีซีรัมต่ำ
Ham's F-12K (Kaighn's) Medium ได้รับการพัฒนาอย่างพิถีพิถันเพื่อปรับสภาพการเพาะเลี้ยงเซลล์ให้เหมาะสมที่สุด ประกอบด้วยส่วนประกอบที่เข้มข้นสูง ซึ่งให้ระดับของส่วนประกอบที่จำเป็น เช่น กรดอะมิโนและโซเดียมไพรูเวตในปริมาณที่สูงขึ้น รวมถึงองค์ประกอบเพิ่มเติม เช่น พูเทรซิน ไทมิดีน ไฮโปแซนธิน และสังกะสี การเติมส่วนประกอบเหล่านี้ช่วยให้นักวิจัยสามารถเสริมอาหารเลี้ยงเซลล์ด้วยซีรัมหรือส่วนประกอบที่กำหนดในปริมาณน้อยสำหรับเซลล์ประเภทเฉพาะ ทำให้สามารถสร้างสภาวะการทดลองที่แม่นยำได้
ที่น่าสังเกตคือ สารอาหาร Ham's F-12K (Kaighn's) Medium ไม่มีโปรตีนหรือปัจจัยการเจริญเติบโต ดังนั้น การเสริมด้วยปัจจัยการเจริญเติบโตและเซรั่มจากเลือดวัวในครรภ์ (FBS) จึงมักจำเป็น ซึ่งช่วยให้นักวิจัยสามารถปรับแต่งสารอาหารให้เหมาะกับความต้องการของสายพันธุ์เซลล์เฉพาะของพวกเขาได้ สำหรับประสิทธิภาพที่ดีที่สุด ความเข้มข้นของ FBS ต้องได้รับการปรับให้เหมาะสมอย่างระมัดระวังสำหรับแต่ละสายพันธุ์เซลล์ เพื่อให้มั่นใจถึงการเจริญเติบโตและการทำงานที่ดีที่สุด
เพื่อรักษาค่า pH ทางสรีรวิทยา สารอาหาร Ham's F-12K (Kaighn's) ใช้ระบบบัฟเฟอร์โซเดียมไบคาร์บอเนต (2.5 กรัม/ลิตร) ซึ่งจำเป็นต้องควบคุมสภาพแวดล้อมให้มี CO2 อยู่ระหว่าง 5-10% ในระหว่างการเพาะเลี้ยง เพื่อให้แน่ใจว่าค่า pH ของสารอาหารอยู่ในช่วงที่เหมาะสมสำหรับการเจริญเติบโตและความมีชีวิตของเซลล์.
การควบคุมคุณภาพ
- pH = 7.2 +/- 0.02 ที่ 20-25 องศาเซลเซียส
- แต่ละล็อตได้รับการทดสอบความปราศจากเชื้อและความไม่มีไมโคพลาสมาและแบคทีเรียแล้ว
การบำรุงรักษา
- เก็บไว้ในตู้เย็นที่อุณหภูมิ +2°C ถึง +8°C ในที่มืด การแช่แข็งหรือการอุ่นให้ถึง +37°C จะลดคุณภาพของผลิตภัณฑ์
- ห้ามให้ความร้อนกับตัวกลางเกิน 37 องศาเซลเซียส หรือใช้แหล่งความร้อนที่ไม่สามารถควบคุมได้ (เช่น เครื่องใช้ไมโครเวฟ)
- หากจะใช้เพียงบางส่วนของสารละลาย ให้ตักปริมาณที่ต้องการออกจากขวดแล้วนำไปอุ่นที่อุณหภูมิห้อง
- อายุการเก็บรักษาสำหรับอาหารเลี้ยงเชื้อทุกชนิด ยกเว้นอาหารเลี้ยงเชื้อพื้นฐาน คือ 8 สัปดาห์นับจากวันที่ผลิต
องค์ประกอบ
| ส่วนประกอบ | มิลลิกรัมต่อลิตร | |
| เกลืออนินทรีย์ | แคลเซียมคลอไรด์ x 2H2O | หนึ่งร้อยสามสิบห้าพันสองร้อยสี่ |
| คอปเปอร์(II) ซัลเฟต x 5H2O | ศูนย์,ศูนย์ | |
| เหล็ก (II) ซัลเฟต x 7H2O | 0.83 | |
| แมกนีเซียมคลอไรด์ x 6H2O | หนึ่งร้อยห้าหมื่นเจ็ดร้อยยี่สิบ | |
| แมกนีเซียมซัลเฟต x 7H2O | 394,49 | |
| โพแทสเซียมคลอไรด์ | 283,29 | |
| โพแทสเซียมไดไฮโดรเจนฟอสเฟต | 58,52 | |
| โซเดียมคลอไรด์ | เจ็ดพันห้าร้อยเก้าสิบเจ็ดจุดสองศูนย์ | |
| ไดโซเดียมไฮโดรเจนฟอสเฟต ไม่มีน้ำ |
หนึ่งแสนห้าพันสอง | |
| ซิงค์ซัลเฟต x 7H2O | 0,14 | |
| ส่วนประกอบอื่น ๆ | กลูโคส (D(+)-) อนไฮเดรต | หนึ่งพันสองร้อยหกสิบ |
| ไฮโปแซนทีน | 4,08 | |
| กรดดีแอล-แอลฟา-ไลโปอิก | 0.21 | |
| ฟีโนล เรด | 3,00 | |
| พุตเทรสซีน x 2HCl | 0.32 | |
| โซเดียมไพรูเวต | สองร้อยยี่สิบ | |
| โซเดียมไบคาร์บอเนต | สองพันห้าร้อย | |
| ไทมีดีน | 0.73 | |
| กรดอะมิโน | แอล-อะลานีน | 17,82 |
| แอล-อาร์จินีน x เกลือไฮโดรคลอไรด์ | 421,40 | |
| แอล-แอสพาราจีน x น้ำ | 30,02 | |
| กรดแอล-แอสพาร์ติก | 26,62 | |
| แอล-ซิสเตอีน x เฮกซะไฮโดรคลอไรด์ x น้ำ | เจ็ดสิบพันสองร้อยสี่ | |
| แอล-กลูตามีน | 292,20 | |
| กรดแอล-กลูตามิก | 29,42 | |
| ไกลซีน | 15,01 | |
| แอล-ฮิสทิดีน x เฮกซะไฮโดรคลอไรด์ x น้ำ | 41,92 | |
| แอล-ไอโซลิวซีน | 7,87 | |
| แอล-ลิวซีน | 26,24 | |
| แอล-ไลซีน x เอชซีแอล | 73,04 | |
| แอล-เมไทโอนีน | 8,95 | |
| แอล-ฟีนิลอะลานีน | 9,91 | |
| แอล-โพรลีน | 69,06 | |
| แอล-ซีรีน | 21,02 | |
| แอล-ทรีโอนีน | 23,82 | |
| แอล-ทริปโตเฟน | 4,08 | |
| แอล-ไทโรซีน | 10,87 | |
| แอล-วาลีน | 23,42 | |
| วิตามิน | ดี(+)-ไบโอติน | 0.07 |
| ดี-แคลเซียมแพนโทเธเนต | 0.48 | |
| โคลีนคลอไรด์ | 13,96 | |
| กรดโฟลิก | 1,32 | |
| ไมโอ-อิโนซิทอล | 18,02 | |
| นิโคตินาไมด์ | 0.04 | |
| ไพริดอกซีน x เฮกซะไฮโดรคลอไรด์ | 0.06 | |
| ไรโบฟลาวิน | 0.04 | |
| ไทอามีน x เฮกซะไฮโดรคลอไรด์ | 0.34 | |
| วิตามินบี12 | 1,36 |