McCoys 5A แบบกลาง (ดัดแปลง), w: กลูโคส 3.0 กรัม/ลิตร, w: กลูตามีนคงที่, w: โซเดียมไพรูเวต 2.0 มิลลิโมลาร์, w: โซเดียมไบคาร์บอเนต 2.2 กรัม/ลิตร
McCoy's 5A Medium เป็นอาหารเลี้ยงเชื้อชนิดกลางที่ได้รับการแนะนำอย่างสูงและออกแบบมาโดยเฉพาะเพื่อส่งเสริมการเจริญเติบโตและการจำลองตัวของไวรัสในเซลล์เพาะเลี้ยงขั้นต้น ได้รับการยอมรับอย่างกว้างขวางในด้านประสิทธิภาพที่โดดเด่นในการใช้งานวิจัยทางชีววิทยาหลากหลายประเภท
หนึ่งในตัวอย่างการใช้งานที่โดดเด่นของ McCoy's 5A Medium คือการใช้ในกระบวนการเพาะเลี้ยงเซลล์มะเร็งลำไส้ใหญ่ของมนุษย์ โดยเฉพาะอย่างยิ่งในการศึกษาตัวรับชนิด G-protein-coupled ที่มีลำดับกรดอะมิโนซ้ำและอุดมด้วยลิวซีน (LGR5) และบทบาทของมันในการแพร่กระจายของมะเร็งลำไส้ใหญ่ สื่อนี้ได้ถูกนำมาใช้อย่างมีประสิทธิภาพในการเพาะเลี้ยงเซลล์มะเร็งลำไส้ใหญ่หลายสายพันธุ์ รวมถึง HCT116, RKO, FET, CBS, HCT116b และ TENN ซึ่งช่วยให้นักวิจัยสามารถศึกษาเชิงลึกเกี่ยวกับกลไกที่อยู่เบื้องหลังการแพร่กระจายของมะเร็งลำไส้ใหญ่ได้
นอกเหนือจากการนำไปใช้ในงานวิจัยมะเร็งแล้ว สื่อ McCoy's 5A Medium ยังได้รับการพิสูจน์แล้วว่ามีความจำเป็นอย่างยิ่งในการศึกษาเซลล์ออสทีโอบลาสต์ (osteoblasts) นักวิจัยที่ทำการศึกษาปฏิกิริยาของไอออนในไฮดรอกซีอะพาไทต์ที่ขาดแคลเซียมในสื่อเพาะเลี้ยงเซลล์มาตรฐานได้ใช้สื่อนี้ในการเพาะเลี้ยงเซลล์ออสทีโอบลาสต์ การนำไปใช้ในครั้งนี้ได้ช่วยให้เกิดความเข้าใจที่ดีขึ้นเกี่ยวกับปฏิสัมพันธ์ระหว่างเซลล์ออสทีโอบลาสต์กับไฮดรอกซีอะพาไทต์ที่ขาดแคลเซียม ซึ่งช่วยส่งเสริมการก้าวหน้าในสาขาการวิจัยเกี่ยวกับกระดูก
McCoy's 5A Medium ได้รับการพัฒนาอย่างพิถีพิถันโดยการปรับแต่งกรดอะมิโนที่พบใน Basal Medium Eagle เพื่อให้การสนับสนุนที่เหมาะสมที่สุดสำหรับเซลล์เนื้องอกในตับ สูตรที่เสริมคุณค่านี้ทำให้เหมาะสมกับสายเซลล์ที่หลากหลาย รวมถึงเซลล์ต้นกำเนิด เพิ่มความหลากหลายในการใช้งานและการประยุกต์ใช้ในสภาพแวดล้อมการวิจัยต่างๆ
McCoy's 5A Medium ขยายผลทางชีวเคมีและสรีรวิทยาของมันให้ครอบคลุมเซลล์เนื้องอกในตับได้มากขึ้น มันถูกนำมาใช้สำเร็จในการสนับสนุนการเจริญเติบโตในวัฒนธรรมเซลล์ต้นกำเนิดของไขกระดูก, ผิวหนัง, เหงือก, ไต, เยื่อบุช่องท้อง, ต่อมหมวกไต, ปอด, ม้าม, ตัวอ่อนหนู และเซลล์ชนิดอื่น ๆ ได้อย่างมีประสิทธิภาพ ความหลากหลายของการใช้งานนี้ยืนยันถึงประโยชน์อันกว้างขวางของ McCoy's 5A Medium ในการสนับสนุนการเจริญเติบโตและการรักษาเซลล์ชนิดต่าง ๆ สำหรับการวิจัยทางชีววิทยาอย่างครอบคลุม
สูตร
McCoy's 5A medium (modified) นี้ประกอบด้วย กลูโคส 3.0 กรัม/ลิตร, กลูตามีนที่เสถียร, โซเดียมไพรูเวต 2.0 มิลลิโมลาร์ และ NaHCO3 2.2 กรัม/ลิตร
การควบคุมคุณภาพ
- pH = 7.2 +/- 0.02 ที่ 20-25°C.
- แต่ละล็อตได้รับการทดสอบความปราศจากเชื้อและความไม่มีเชื้อราและแบคทีเรียแล้ว
การบำรุงรักษา
- เก็บไว้ในตู้เย็นที่อุณหภูมิ +2°C ถึง +8°C ในที่มืด การแช่แข็งและการอุ่นถึง +37°C จะลดคุณภาพของผลิตภัณฑ์
- ห้ามให้ความร้อนกับตัวกลางเกิน 37°C หรือใช้แหล่งความร้อนที่ไม่สามารถควบคุมได้ (เช่น เครื่องใช้ไมโครเวฟ)
- หากจะใช้เพียงบางส่วนของสารละลาย ให้ตักปริมาณที่ต้องการออกจากขวดแล้วอุ่นให้อยู่ในอุณหภูมิห้อง
- อายุการเก็บรักษาสำหรับทุกชนิดของอาหารเลี้ยงเชื้อ ยกเว้นอาหารเลี้ยงเชื้อพื้นฐาน คือ 6 ถึง 8 สัปดาห์นับตั้งแต่วันที่เปิดใช้
องค์ประกอบ
| ส่วนประกอบ | มิลลิกรัมต่อลิตร | |
| เกลืออนินทรีย์ | แคลเซียมคลอไรด์ x 2H2O | หนึ่งร้อยสามสิบสองจุดศูนย์ศูนย์ |
| แมกนีเซียมซัลเฟต | 97.67 | |
| โพแทสเซียมคลอไรด์ | สี่ร้อยศูนย์ศูนย์ | |
| โซเดียมคลอไรด์ | หกพันสี่ร้อยหกสิบ | |
| ไดโซเดียมไฮโดรเจนฟอสเฟต (ชนิดไม่มีน้ำ) | 504.00 | |
| ส่วนประกอบอื่น ๆ | D(+)-กลูโคส (ไม่มีน้ำ) | สามพันบาทถ้วน |
| กลูตาไธโอน (รีดิวซ์) | 0.50 | |
| เพปโทนเนื้อ | หกร้อยบาทถ้วน | |
| โซเดียมฟีนอลเรด | สิบเอ็ดโมง | |
| กรดอะมิโน | แอล-อะลานีน | 13.36 |
| แอล-อาร์จินีน x เฮสเพอร์ไฮโดรคลอไรด์ | 42.14 | |
| แอล-แอสพาราจีน x น้ำ | สี่สิบห้าจุดศูนย์สาม | |
| กรดแอล-แอสปาร์ติก | 19.97 | |
| แอล-ซิสเตอีน x เฮกซะไฮโดรคลอไรด์ x น้ำ | 31.75 | |
| แอล-กลูตามีน (เสถียร) | 219.15 | |
| กรดแอล-กลูตามิก | 22.07 | |
| ไกลซีน | 7.51 | |
| แอล-ฮีสติดีน x เกลือไฮโดรคลอไรด์ x น้ำ | 20.96 | |
| แอล-ไฮดรอกซีโพรลีน | 19.67 | |
| แอล-ไอโซลิวซีน | 39.36 | |
| แอล-ลิวซีน | 39.36 | |
| แอล-ไลซีน x เอชซีแอล | 36.54 | |
| แอล-เมไทโอนีน | 14.92 | |
| แอล-ฟีนิลอะลานีน | 16.52 | |
| แอล-โพรลีน | 17.27 | |
| แอล-ซีรีน | 26.28 | |
| แอล-ทรีโอนีน | 17.87 | |
| แอล-ทริปโตเฟน | 3.06 | |
| แอล-ไทโรซีน ไดโซเดียมซัลต์ | 26.10 | |
| แอล-วาลีน | 17.57 | |
| วิตามิน | กรดพารา-อะมิโนเบนโซอิก | หนึ่งจุดศูนย์ศูนย์ |
| กรดแอสคอร์บิก | 0.56 | |
| ดี(+)-ไบโอติน | 0.20 | |
| ดี-แคลเซียมแพนโทเธเนต | 0.20 | |
| โคลีนคลอไรด์ | ห้าโมงตรง | |
| กรดโฟลิก | สิบโมง | |
| ไมโอ-อิโนซิทอล | สามสิบหกจุดศูนย์ศูนย์ | |
| นิโคตินาไมด์ | 0.50 | |
| กรดนิโคตินิก | 0.50 | |
| ไพริดอกซัล เฮเซียมคลอไรด์ | 0.50 | |
| ไพริดอกซีน เฮเซ็กซ์คลอไรด์ | 0.50 | |
| ไรโบฟลาวิน | 0.20 | |
| ไทอามีน เฮกซะไฮโดรคลอไรด์ | 0.20 | |
| วิตามินบี12 | 2.00 |